Распределение рибосомного материала бактерий в организме животного (радиоизотопное исследование)

Распределение рибосомного материала бактерий в организме животного (радиоизотопное исследование)

Автор: Кошелева, Светлана Владимировна

Автор: Кошелева, Светлана Владимировна

Шифр специальности: 03.00.07

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2007

Место защиты: Москва

Количество страниц: 0 с. 145 ил.

Артикул: 4665193

Стоимость: 250 руб.

1.1. Рибосома и рибосомный аппарат бактерий.
1.2. Рибосомные вакцины и современная вакцинология
1.2.1. Про тективные свойства рибосом микроорганизмов
1.2.2. Бактериальные рибосомы и формы иммунного ответа
1.2.3. Влияние бактериальных рибосом на неспецифическую резистентность макроорганизма.
1.2.4. Бактериальные рибосомы и феномен тахифилаксии. .
1.2.5. Преимущества рибосомных иммунобиологических препаратов
1.3. Роль изучения фармакокинетики в создании новых лекарственных средств
1.4. Изучение локализации бактериальных антигенов в организме животных.
1.5. Применение радиоизотопного метода исследования в изучении бактериальных рибосом.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика экспериментального материала.
2.1.1. Характеристика лабораторных животных, используемых в экспериментах.
2.1.2. Характеристика штаммов бактерий
2.2. Получение биомассы и дезинтеграция бактериальных клеток .
2.2.1. Культивирование бактерий.
2.2.2. Буферные системы.
2.2.3. Дезинтеграция бактериальных клеток.
2.3. Получение рибосомного материала.
2.3.1. Расчт выхода рибосомных фракций.
2.3.2. Выделение рибосомных фракций.
2.3.3. Разделение рибосом . i на большие и малые субъединицы.
2.3.3.1. Диссоциация рибосом.
2.3.3.2. Получение фракций и рибосомных
субъединиц.
2.3.4. Хранение рибосомного материала.
2.3.5. Контроль качества полученного рибосомного материала .
2.3.5.1. Спектрофотометрический анализ.
2.3.5.2. Седиментационный анализ.
2.3.5.3. Электрофоретический анализ
2.3.5.3.1. Электрофорез рибосомных белков.
2.3.5.3.2. Электрофорез рибосомной РНК
2.4. Изучение распределения радиоактивного эквивалента 4 рибосом в организме животного с помощью радиоизотопного метода исследования.
2.4.1. Обоснование доз радиоактивности рибосомного материала, использованных в эксперименте
2.4.2. Введение меченых веществ в организм животного
2.4.3. Взятие биологического материала и подготовка проб к анализу.
2.4.4. Измерение радиоактивности органов и тканей животного
2.5. Изучение иммунологической специфичности препаратов бактериальных рибосом, различной степени целостности
2.5.1. Получение антирибосомных антисывороток
2.5.2. Определение антирибосомных антител в сыворотках иммунизированных животных.
2.5.3. Реакция преципитации антирибосомных антител с
, и рибосомами.
2.6. Изучение распределения рибосомного материала среди клеток крови
2.6.1. Схема введения меченых рибосом подопытным
животным
2.6.2. Выделение чистой взвеси нейтрофильных гранулоцитов
с помощью фиколлверографинового градиента
2.6.3. Радиометрия клеточных фракций крови
2.7. Изучение иммунотропной активности рибосом . i
в эксперименте i viv
2.7.1. Изучение иммунотропной активности , 5 и
рибосом . i в эксперименте i viv при трхкратном введении
2.7.2. Изучение иммунотропной активности рибосом . i в эксперименте i viv через 1 час после
однократного введения.
2.7.3. Популяционный состав лейкоцитов периферической
2.7.3.1. Выделение лейкоцитарной взвеси
2.7.3.2. Определение спонтанного розеткообразования
лимфоцитов ЕРОК
2.7.4. Реакция бактериального фагоцитоза нейтрофильных гранулоцитов с определением степени завершенности .
2.7.5. Методы изучения микробицидных систем
нейтрофильных гранулоцитов
2.7.5.1. Спонтанный и стимулированный НСТтест.
2.7.5.2. Лизосомальнокатионный тест.
2.7.5.3. Активность неспецифической
анафтилацетатэстеразы
2.7.5.4. Активность миелопероксидазы
2.8. Статистическая обработка результатов исследований.
ГЛАВА 3. ПОЛУЧЕНИЕ ВЫСОКОМЕЧЕНЫХ
РИБОСОМ II I0.
3.1. Рост Е. i на различных питательных средах
3.1.1. Рост Е. i на жидкой синтетической среде М9, содержащей 0,4 глюкозы, 0,1 рыбного гидролизата
и комплекс витаминов.
3.1.2. Рост Е. i на жидкой синтетической среде М9, содержащей 0,4 глюкозы и комплекс витаминов
3.1.3. Рост Е. i на жидкой синтетической среде М9, содержащей 0,4 глюкозы, полный набор аминокислот
и комплекс витаминов.
3.2. Включение радиоактивной метки в бактерии Е. i.
3.3. Получение высокомеченых 4 рибосом Е. i .
3.4. Характеристика физикохимических свойств полученных препаратов бактериальных рибосом
3.4.1. Спектрофотометрический анализ.
3.4.2. Седиментационный анализ.
3.4.3. Электрофоретический анализ
3.4.3.1. Электрофорез рибосомных белков.
3.4.3.2. Электрофорез рибосомной РНК
ГЛАВА 4. РАСПРЕДЕЛЕНИЕ РАДИОАКТИВНОГО ЭКВИВАЛЕНТА
БАКТЕРИАЛЬНЫХ РИБОСОМ В ОРГАНИЗМЕ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
4.1. Распределение радиоактивности среди органов и тканей экспериментальных животных при внутривенном введении 4 рибосом
4.2. Распределение радиоактивности среди органов и тканей экспериментальных животных при виутрибрюшинном введении 4С8 рибосом.
4.3. Распределение радиоактивности среди органов и тканей экспериментальных животных при подкожном введении 4С8 рибосом
4.4. Сравнение распределения радиоактивности среди органов и тканей экспериментальных животных при разных способах введения 4С8 рибосом
4.5. Анализ накопления радиоактивности в органах и тканях экспериментальных животных при разных способах введения С8 рибосом
ГЛАВА 5. РАСПРЕДЕЛЕНИЕ РАДИОАКТИВНОСТИ СРЕДИ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ ,4С
РИБОСОМ
. Распределение радиоактивности среди клеток крови после
введения ,4 рибосом Е. i в организм животного.
5.2. Иммунотропная активность рибосом Е. i в
эксперименте i viv через 1 час после однократного введения
ГЛАВА 6. ИММУНОТРОПНАЯ АКТИВНОСТЬ , И РИБОСОМ II I 0 В
ЭКСПЕРИМЕНТЕ I VIV
6.1. Иммунотропная активность , и рибосом
. i в эксперименте i viv при трхкратном введении I
6.1.1. Популяционный состав лейкоцитов периферической
6.1.2. Бактериальный фагоцитоз и микробицидные системы
нейтрофияьных грану лоцитовИЗ
6.2. Иммунологическая специфичность препаратов
бактериальных рибосом, различной степени целостности
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА
Благодарности.
ВВЕДЕНИЕ


Взятие биологического материала и подготовка проб к анализу. Определение антирибосомных антител в сыворотках иммунизированных животных. Изучение иммунотропной активности рибосом . Изучение иммунотропной активности рибосом . Популяционный состав лейкоцитов периферической
2. Реакция бактериального фагоцитоза нейтрофильных гранулоцитов с определением степени завершенности . Спонтанный и стимулированный НСТтест. Лизосомальнокатионный тест. Статистическая обработка результатов исследований. ГЛАВА 3. РИБОСОМ II I0. Рост Е. Рост Е. Рост Е. Рост Е. Включение радиоактивной метки в бактерии Е. Получение высокомеченых 4 рибосом Е. Спектрофотометрический анализ. Седиментационный анализ. Электрофорез рибосомных белков. ГЛАВА 4. Распределение радиоактивности среди органов и тканей экспериментальных животных при виутрибрюшинном введении 4С8 рибосом. ГЛАВА 5. Е. i в организм животного. Иммунотропная активность рибосом Е. ГЛАВА 6. Популяционный состав лейкоцитов периферической
6. Благодарности. Разработка новых иммунобиологических препаратов является важной задачей современной вакцинологии к клинической иммунологии А. А. Воробьв, В. И. Покровский, Б. Ф. Семнов, В. М. Манько, Р. В. Петров, Р. М. Хаитов, . Сегодня можно считать установленным, что ни при одном из патологических состояний, которое сопровождается приобретенной вторичной иммунной недостаточностью, не может адекватно проводиться лечение без применения иммунокорригирующих препаратов Л. И. Винницкий, . Актуальными задачами современной медицинской науки в области иммунопрофилактики становятся изучение природы и механизмов раннего специфического иммунного ответа, поиск средств, которые могут этот ответ индуцировать и регулировать В. В. Зверев, Б. Ф. Семенов, . При этом приоритетным является поиск более эффективных и менее реактогенных иммуногенов. К их числу следует отнести бактериальные рибосомы. Роль рибосом в биосинтезе белка была окончательно выяснена ещ в середине XX века Ф. Шапвиль, Э. Л. Энни, А. С. Спирин, . Изучение иммуногенных свойств рибосом, начиная с первого сообщения . За это время сформировалось самостоятельное направление в современной вакцинологии Т. Е. , . В. И. Левенсон, В. В. Хазанова, . V. iv, . В. И. Левенсон и др. И. Н. Бакулин, Т. И. Сергеева, П. В. Оветчин, А. Я. Цыганенко, . Препараты на основе бактериальных рибосом в настоящее время применяются не только как классические вакцины, но и как иммуномодуляторы Р. М. Хаитов и др. С. М. Гордиенко, О. И. Ласица, А. Г. Федорчук, . Вс это позволяет рассматривать их в качестве основы для конструирования вакцинных препаратов нового поколения. Однако до настоящего времени не исследованы в эксперименте особенности фармакокинетики рибосомного материала. Наиболее точную оценку о содержании веществ обеспечивает исследование с использованием радионуклидного маркера. Метод радиоизотопного измерения позволяет дать комплексный анализ распределения и накопления в макроорганизме экспериментальных животных радиоактивной метки, введнной в составе рибосом. Мечение бактериальных рибосом путм биологического синтеза максимально сохраняет их структуру, что необходимо для соблюдения принципа интактности рибосом при реализации их иммунотропной активности В. П. Крылов, В. Г. Орлов и др. Информация о распределении рибосомного материала в органах и тканях экспериментального животного будет способствовать пониманию механизма действия препаратов на основе бактериальных рибосом, тем более что до настоящего времени этот вопрос остатся открытым. Изучение иммунотропной активности бактериальных рибосом разной степени целостности также позволит приблизиться к ответу на этот вопрос. Целью данной работы являлось определение закономерности распределения рибосомного материала . Получить препарат рибосом . Оценить характер распределения и накопления меченного радиоактивным углеродом рибосомного материала . Установить закономерности распределения рибосом . С, в зависимости от пути их введения в макроорганизм экспериментального животного. Оценить влияние структурной целостности рибосом . Научная новизна.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.330, запросов: 145