Антистрессовые и антимутагенные свойства пропионовокислых бактерий

Антистрессовые и антимутагенные свойства пропионовокислых бактерий

Автор: Варюхина, Светлана Юрьевна

Шифр специальности: 03.00.07

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2004

Место защиты: Москва

Количество страниц: 127 с. ил.

Артикул: 2629029

Автор: Варюхина, Светлана Юрьевна

Стоимость: 250 руб.

Антистрессовые и антимутагенные свойства пропионовокислых бактерий  Антистрессовые и антимутагенные свойства пропионовокислых бактерий 

Введение.
1. Обзор литературы.
1.1 Пропиновокислые бактерии
1.1.1 Классификация.
1.1.2 Общая характеристика классических пропноновокислых бактерий.
1.1.3 Морфолошя.
1.1.4 Анатомия
1.1.5 Питательныевые потребности
1.1.6 Брожение, осуществляемое пропионовокислыми бактериями.
1.1.7 Синтез витамина В2.
1.1.8 Применение пропноновокислых бактерий
1.2 Мутагены и мутагенез. Классификация мутагенов.
1.3 Антимутагенез. Классификация антимутагенов
1.3.1 Свойства и критерии оценки а1ггимутагенов.
1.3.2 Бактериальный антимутагенез новое важное направление в микробиологии
1.4 Антимутагенные свойства бактерий
1.4.1 Антимутагенные свойства молочнокислых и бифидобактерий
1.4.2 Антимутагенез пропноновокислых бактерий.
1.5 Методы определения мутагенных и антимутагенных свойств химических соединений
1.6 Стрессы и регуляция стрессовых ответов
1.6.1 Системы сигнализации
1.6.2 Перекрывание антисрсссовых ответов
1.6.3 Молекулярные шапероны.
1.7 Тепловой шок
1.8 Низкотемпературный шок
1.9 Кислотный шок.
1. Окислительный стресс.
1. Осмотический шок.
2. Экспериментальная часть
2.1 Материалы
2.1.1 Реактивы
2.1.2 Буферные системы
2.1.3 Сорбенты
2.1.4 Среда для выращивания пронионовокислых бактерий, способствующая включению радиоактивных аминокислот.
2.1.5 Рабочая субстанция
2.1.6 Приборы и оборудование
2.1.7 Источники мутагенов.
2.1.8 Подготовка микросомалыюй активирующей смеси 9 ix.
2.1.9 Источники антимутагенов.
2.1. Тесткультуры
2.1. Условия роста культур
2.1. Растворы используемые для постановки теста Эймса.
2.2 Методы.
2.2.1 Фракционирование клеточного экстракта сульфатом аммония.
2.2.2 Обработка растворов сульфатных фракций .
2.2.3 Концентрирование белкового раствора I.
2.2.4 Концентрирование белкового раствора перед электрофорезом
2.2.5 Электрофорез
2.2.6 Двумерный электрофорез
.7 Введение радиоактивной метки.
2.2.8 Хроматографические методы.
2.2.9 Определение аминокислотной последовательности белка с терминалыюго участка молекулы
2.2. Определение концентрации белка и содержания нуклеиновых кислот.
2.2. Определение гомогенности препаратов метолом ВЭЖХ.
2.2. Определение молекулярной массы белков
2.2. Определение биологической активности белковых фракций
2.2. Постановка модифицированного теста Эймса с использованием индикаторных штаммов
ii.
3. Результаты.
3.1 Защитные и реактивирующие свойства пропионОвокислых бактерий
3.1.1 Фракционирование на сефарозе.
3.1.2 Гельфильтрация на сорбенте
3.1.3 Изучение физикохимических характеристик очищенного белкового препарата.
3.1.4 Изучение зависимости протекторной активности белка от его концентрации в отношении клеток
Е. соИ, инактивированных УФсветом.
3.1.5 Изучение реактивирующего эффекта белка в отношении действия желчных кислот и теплового
стресса
3.2 Лиги мутагенные свойства пропионовокислых бактерий
3.2.1 Проверка генотипа тестштамма
3.2.2 Исследование влияния компонентов сред на антимутагенную активность бактерий, используемых для их выращивания.
3.2.3 Изучение влияния различных факторов на АМакгивность бактерий
а Исследование АМэфекта в зависимости от возраста исследуемых культур
б Изучение влияния концентрации микросомальной активирующей смеси на выражение АМэффскта
в Изучение влияния типа регистрируемой мутации на выражение АМэффекта
3.2.4 Антимутагенные свойства пропионовокислых бактерий
а Скрининг штаммов пропионовокислых бактерий в связи с их антимутагеиной активностью
б Антимутагенное действие культуральной жидкости и клеток в отношении мутагенеза, индуцируемого азидом натрия
в Антимутагенное действие культуральной жидкости и клеток в отношении мутагенеза, индуцируемого 2НФ. .
г Антимутагенное действие культуральной жидкости и клеток в отношении мутагенеза, индуцируемого
д Антимутагснный эффект культуральной жидкости и клеток Р.геис1епгекИИ виЬБр. зИегтапи КМ 3 и Р.геие1епге1сИИ ьиЪьр. геи1епге1сИН КМ 3 в отношении мутагенеза, индуцируемого Н2. ВАР, РЫР . з Антимутагениый эффект культуральной жидкости и клеток Р.геис1епге1скИ виЬзр. зИегтапИ КМ 3 в отношении мутагенеза, индуцируемого МПНГ и9АА
3.3.3 Исследование механизма АМдействия эффект культуральной жидкости и клеток Р.гсиЛепгекИИ иЬр. зИегтапи КМ 3 вотношенни мутагенов, индуцирующих мутации замены пар оснований у тестсрного штамма Б. 1урЫтипит ТА 0.
3.3.4 Изучение влияния нагревания, диализа и протсолиза на антимутагенное действие культуральной жидкости Р. Ггсис1епгскЬн виЬзр. БЬегтапм КМ 3 и Р. геи1епгекИИ иЬзр. геи1епгекИИ КМ 3.
3.3.5 Изучение АМсвойств представителей другигих видов бактерий
4. Обсуждение результатов
4.1 Антистрессовые свойства пропионовокислых бактерий.
4.2 Антимутагенные свойства пропионовокислых бактерий.
Список литературы
Список сокращений
2 поглощение при длине волны, равной 0 нанометрам
Агбо поглощение при длине волны, равной 0 нанометрам
9Л А 9аминоакридин
Акт. биологическая активность
антимутаген
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография ИД индекс деления
Конця белка, мгмл, В. концентрация белка, определенная
спектрофотометрическим методом ВарбургаКристиана
Конця белка, мгмл, I. концентрация белка, определенная методом Лоури
МННГ ЫметилЫнитроЫнитрозогуанидин
ПК нуклеиновые кислоты
2НФ 2нитрофлуорен
4НХО 4нитрохинолин1оксид
Пост постзащита или реактивирующее действие
Пред и Пр предзащита или защитное действие
Трис трисоксиметиламинометан
ЭГ этиленгликоль
ВАР бснзапирен
СА сульфат аммония
холамидопропил диметиламмоний1пропансульфонат
СВВ кумасси бриллиантовый голубой
диэтиламиноэтил
ли метилсульфоксид
днтиотрситол
этилендиаминтетрауксусная кислота
I иммобилизованный градиент
фенилметансульфонилфторид
i 2амино1 метил5фенилимидопиридин
персульфат аммония
V поливинилдифлуорид
додецилсульфат натрия
ЗВЭ РАОЕ электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додеци л сульфата натрия
Б9 гшх микросомальная активирующая смссь ТЕМЕИ тстрамстилэтилсндиамнн иУ или УФ ультрафиолетовое облучение
Введение


Прокариоты, как потенциальные источники антимутагенов почти не изучались, хотя, учитывая общность фундаментальных реакций прокариот и эукариот, а также способность прокариот осуществлять реакции некоторых уникальных синтезов, позволили ученым предположить, что бактерии могут быть источниками ценных антимутагеиов. Есть и другие положения, подтверждающие важность поиска и использования бактериальных антимутагеиов. Л также, существуют возможности воздействия на бактериальный метаболизм, позволяющие стимулировать преимущественную выработку необходимого человеку продукта и его дальнейшую экскрецию из клеток. Вовторых, бактерии являющиеся облигатными составляющими нормальной микрофлоры, а также используемые в приготовлении разнообразных продуктов представлены главным образом анаэробами. Значит, они в большей степени, чем аэробные микроорганизмы, нуждаются в защите от кислорода и его активных форм, и, следовательно, должны иметь эффективнейшие системы с антимутаген ной активностью. Кроме антимутагенного действия в отношении мутагенеза, индуцированного химическими соединениями, бактерии привлекли к себе внимание исследователей способностью к реактивирующему действию в ответ на стрессовые ситуации. Стрсссэто ситуация при которой параметры окружающей среды резко отличаются от обычных. Венгерский врач Ганс Селье, дал имя и идею, стрессорного ответа как запрограмированной реакции организма на резкое изменение условий окружающей среды. Со времен Г. Селье этот термин стал очень популярен и приобрел более широкий смысл, включая сейчас действие экстремальных факторов на биообъект и противодействие им. Удивительная общность стрессорных ответов у всех исследованных про и эукариотных организмов позволила выявить высокую консервативность, фундаментальных механизмов клеточной регуляции. Поэтому микроорганизмы могут служить моделями для изучения стрессовых ответов. Целью настоящей работы стало изучение, с одной стороны, антистрессовых, а также антимутагенных свойств пропионовокислых бактерий, что открывает широкие перспективы их практического использования в качестве профилактических и лекарственных препаратов. Объект наших исследований выбран нами в связи с тем, что пропионовокислые бактерии рассматриваются как перспективные пробиотики, положительное влияние которых на здоровье человека общепризнанно. Кроме того, иропионовокислые бактерии не перевариваются в желудочнокишечном тракте людей, устойчивы к действию желчных кислот и выдерживают низкую 2. Р. ас иИргор юта ингибирует акивиость 3глюкуронидазы, азаредуктазы и нитроредуктазы ферментов, образуемых кишечной микрофлорой и вовлекаемых в образование мутагенов, канцерогенов и промоторов роста опухолей. Пропионовые бактерии стимулируют рост фекальных бифидобактерий и помогают в лечении бактериальных дисбактериозов. Пропионовокислые бактерии ПКБ относятся к семейству iii, роду iii. Другой род этого семейства i. После исследований X. Дугласа и С. Гантера в род iii стали включать виды анаэробных коринебактерий. Корннебактерии живут на поверхности кожи людей их выделяют также из угрей, ран, крови, гнойных и мягких тканей. Поскольку поверхность кожи людей главное место обитания коринсбакгсрий, их также стали называть кожными пропионовокислыми бактериями. А бактерии, выделенные из сыра и молока, молочными или классическими. Классические и кожные пропионовые бактерии различают не только места их обитания, но также и ряд биохимических особенностей. Так классические пропионовые бактерии, в отличие от кожных, не образуют индол и не способны к гидролизу жедатнны. Кроме того, корннебактерии обладают высокой протеолитичсской активностью и отличаются от молочных пропионовых в отношении температурного оптимума у кожных пропионовокислых бактерий и классических С. На основании работ К. Ниля и других исследователей в седьмом издании определителя описывается И видов классических пропионовокислых бактерий. Однако, после установления высокой степени гомологии ДНК число видов сокращено до 4 таблица 1. В г. Эта бактерия образует нитчатые ветвистые клетки, в отличие от палочковидных клеток других пропионовокислых бактерий, что делает род iii гетерогенным в морфологическом отношении. В г. Л.И. Воробьева и др. ДНК. Новый вид предложено называть . В г.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.202, запросов: 145