Влияние микоплазм на пролиферацию и устойчивость к апоптозу опухолевых клеток, несущих Толл-подобные рецепторы 2 и 6

Влияние микоплазм на пролиферацию и устойчивость к апоптозу опухолевых клеток, несущих Толл-подобные рецепторы 2 и 6

Автор: Щебляков, Дмитрий Викторович

Шифр специальности: 03.00.07

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2009

Место защиты: Москва

Количество страниц: 136 с. ил.

Артикул: 4336991

Автор: Щебляков, Дмитрий Викторович

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Общая характеристика микоплазм.
1.1.1. Классификация, строение и физиология микоплазм.
1.1.2. Адгезия микоплазм па клетки хозяина
1.1.3. Особенности взаимодействия микоплазм с клеткой хозяина и его иммунной системой.
1.2. Транскрипционный фактор и его роль в реализации различных клеточных функций.
1.2.1. Счроение и функции транскрипционного фактора .
1.2.2. Пути активации транскрипционного фактора .
1.2.3. Аиоптоз. Роль в регуляции аюптоза.
1.2.3.1. Апоптоз. Механизм реализации.
1.2.3.2. Роль в регуляции аиоптоза
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Материалы
2.1.1. Вирусы и бактериальные штаммы
2.1.2. Клеточные линии
2.1.3. Плазмидные векторы.
2.1.4. Ферменты и другие реактивы.
2.1.5. Лабораторные животные
2.1.6. Лабораторное оборудование
2.2. Методы.
2.2.1. Подготовка компетентных клеток . i штамма 5.
2.2.2. Трансформация компетентных клеток . i штамма 5
2.2.3. Выделение аналитических количеств плазмидной ДНК.
2.2.4. Выделение тотальной ДНК
3.2. Анализ способности различных видов микоплазм активировать
транскрипционный фактор ОТкВ в результате взаимодействия с Толл
3.2.1. Различные виды микоплазм приводят к активации в клетках
3.2.2 Определение возможных сочетаний Толлподобных рецепторов,
вызывающих активацию транскрипционного фактора после взаимодействия .iii или ее структурными компонентами
3.3. Микоплазмы и их липидассоциированные мембранные белки повышают выживаемость клеток линии 3, экспрессирующих Толлподобные рецепторы , при действии химиотерапевтических препаратов.
3.4. Блокирование функциональной активности в клетках, инфицированных микоплазмой, приводит к отмене их устойчивости к химио терапевтическим препаратам.
3.5. Анализ экспрессии Толлподобных рецепторов 2 и 6 в различных опухолевых линиях клеток.
3.6. .iii и ее структурные компоненты подавляют апоптоз в опухолевых клетках, экспрессирующих Толлподобные рецепторы , при действии химиотерапевтических препаратов.
3.7. Изучение кинетики роста опухолевых клеток I3 при инфекции .iii или добавлении ее структурных компонентов в эксперименте i vi
3.8. Влияние микоплазменной инфекции клеток I3 на прогрессию мышиной миеломоноцитарной лейкемии в экспериментах i viv.
3.9. Влияние диациллипопептида .iii на пролиферацию и резистентность к химиотерапевтическим препаратам опухолевых клеток I3 в экспериментах i viv.
подобными рецепторами
при взаимодействии с Толлрецептором 2.
ЗЛО. Изучение влияния структурного компонента .iii 2 на продукцию факторов, стимулирующих пролиферацию клеток
мышиной миеломоноцитарной лейкемии I3 i viv
ГЛАВА 4.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
ЛК аминокислота
БСА бычий сывороточный альбумин
ГМКСФ гранулоцитарномакрофат альный колониестимулирующий фактор
ДА Г диацилглицерин
ДНК дезоксирибонуклеиновая кисло та
дНТФ дезоксинуклеотидтри фосфат
ИЛ интерлейкин
кДа килодальтон
КОЕ колониеобразующая единица
ЛАМБ лииидассоциированные мембранные белки
ЛПС липополисахарид
мРНК матричная рибонуклеиновая кислота
МТТ ,5диметилтиазол2у2,5дифенил тетранатрий бромид
ПАМС патогенассоциированные молекулярные структуры
ПЦР полимеразная цепная реакция
ПЭГ полиэтиленгликоль
РНК рибонуклеиновая кислота
рРНК рибосомальная рибонуклеиновая кислота
ТМ трансмембранный домен
тРНК транспортная рибонуклеиновая кислота
тыс.н.п. тысяч нуклеотидных пар
УФ ультрафиолет
ФИО фактор некроза опухоли
ЭДТА этилсндиаминтетрауксусная кислота
ЛЫК анкириновые повторы
АР1 активаторный белок
ЛРАР1 фактор, активирующий апоптозную протеазу ВАХ белок X, ассоциированный с Вс
Вс белок Вклсточной лимфомы ВН 2гомологичный домен домен, привлекающий каспазу I1 белок, ингибитор апоптоза СК2 казеинкиназойП V цитомсгаповирус домен смерти
регион, гомологичный домену смерти
I сигнальный комплекс, индуцирующий смерть
белок богатый глютамином Е, лейцином , лизином К
сериуом
ФНОассоциированный домен смерти
V вирус гепатита В
НСС злокачественная гепатома
V вирус гепатита С
домен типа спиральпстля спираль
I ингибитор каппаби
I I киназа
I киназа, ассоциированная с рецептором ИЛ1 киназа Януса
1 латентный мембранный белок
макрофагактивирующий липопептид микоплазм
МСР1 моноцитарный хсмоатрактантный белок
I1 макрофагальный воспалительный белок
микоплазмаподобиые организмы
марганец супероксиддисмутазы
белок первичного ответа миелоидной дифференциации связывающий домен эссенциальный модулятор кБ сигнал ядерного экспорта
кВ ядерный фактор каппаби
фактор роста нервов I индуцирующая киназа сигнал ядерной локализации оптическая плотность
0нитрофенилЬ0галактопиранозидаза
пролин Р, глутамин Е, серии богатый домен
РКС протеинкиназа С
гомологичный домен
активные формы кислорода
натрия додецилсульфат
супероксиддисмутазы
ТЛВ1 ТАКсвязывающий белок
ТАЕ трисацетатный буфер
ТАК трансформирующий ростовой фактор активируемая киназа
Тклеточный рецептор
трансактивационный домен
Толлподобный рецептор
фактор некроза опухоли
белок, ассоциированный с доменом смерти рецептора ФИО фактор, ассоциированный с рецептором ФИО I лиганд, вызывающий апоптоз, связанный с ФИО XIАР Хсвязанный ингибитор белков апоптоза домен типа цинковый палец
ВВЕДЕНИЕ


ГЛАВА 4. Микоплазмы класс i мельчайшие патогенные бактерии, характерной особенностью которых является отсутствие клеточной стенки, что обуславливает специфику таких их морфологических и физиологических свойств, как полиморфизм, пластичность, осмотическая неустойчивость к воздействию детергентов и т. Представители данного семейства являются причиной различных инфекций животных и человека острых и хронических заболеваний суставов, инфекций респираторного и урогенитального факта. Многие виды микоплазм М. Главными особенностями микоплазм является их способность персистировать i viv и i vi в течение длительного периода без какихлибо клинических проявлений. Такая способность микоплазм обусловлена рядом особенностей,, которые позволяют им эффективно ускользать от иммунной системы хозяина. К таким особенностям относятся молекулярная мимикрия и фенотипическая пластичность, которые приводят к тому, что микоплазмы не полностью или не эффективно распознается иммунной системой хозяина. Наличие таких механизмов изменчивости позволяют микоплазмам персистировать в организме хозяина в течение длительного периода, часто переходя в хроническую форму , 9, 2. В работах различных отечественных и зарубежных авторов было показано, что различные бактериальные и вирусные патогены, способные вызывать хронические инфекции, ассоциированы с опухолевой прогрессией. Наряду с перечисленными патогенами, в различных исследованиях, выполненных в ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН иод руководством Г. Я. Каган, И. В. Раковской, а также рядом зарубежных авторов было показано, что микоплазмы также способны стимулировать опухолевую прогрессию. В частности было установлено, что при совместном инфицировании с вирусом саркомы Раушсра микоплазма индуцирует лейкозы у мышей, резистентных к данному вирусу белок р . Однако механизмы, которые обусловливают это свойство микоплазм, остаются невыясненными. В связи с чем, получение новых данных, связанных с изучением влияния микоплазм на рост клеток опухоли и прогрессию опухолевого заболевания, имеет существенное значение для выяснения молекулярных механизмов взаимодействия бактериальных патогенов с клетками хозяина, а также для выяснения роли хронических бактериальных инфекции в прогрессии опухолевых заболеваний. Поэтому изучение описанных свойств микоплазм в настоящее время представляет научный и практический интерес. Недавние исследования показали, что микоплазма способна в результате взаимодействия с Толлподобными рецепторами на поверхности клетки приводить к активации транскрипционного фактора . Описанные свойства транскрипционного фактора РРкВ обусловливают его роль в стимуляции канцерогенеза. Известно, что конститутивная активация ЫРкВ наблюдается более чем в опухолей, среди которых болезнь Ходжкина 7, острый лимфобластозный лейкоз 7, 1, , множественная миелома , рак молочной железы , рак толстой кишки 6, рак легкого 4, рак яичников, рак простаты, различные виды лимфом 6, 2, рак печени 6, меланома 5 и др. В настоящее время не показана способность микоплазм в результате активации транскрипционного фактора ИРкВ при взаимодействии с Толлподобными рецепторами оказывать влияние на пролиферацию и выживаемость опухолевых клеток и тем самым усиливать опухолевую прогрессию. Изучение указанного свойства микоплазм дает основания полагать, что определенные закономерности, выявленные в этом исследовании, могут иметь не только теоретический интерес, но могут оказаться полезными и для практической онкологии. В целом исследование молекулярных механизмов взаимоотношения микоплазм с клетками хозяина даст возможность адекватно оценить значение микоплазм при многих патологических процессах. Изучение влияния микоплазм и их липидассоциированпых мембранных белков на выживаемость и пролиферацию опухолевых клеток в результате активации в них транскрипционного фактора ЫРкВ. Отработать условия экспериментального заражения культур клеток различными видами микоплазм с последующей идентификацией и количественной оценкой микоплазм в инфицированных клетках.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.200, запросов: 145