О пространственной структуре вируса гриппа : Исследование методом тритиевой планиграфии

О пространственной структуре вируса гриппа : Исследование методом тритиевой планиграфии

Автор: Федорова, Наталия Викторовна

Шифр специальности: 03.00.06

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 1999

Место защиты: Москва

Количество страниц: 154 с. ил.

Артикул: 231352

Автор: Федорова, Наталия Викторовна

Стоимость: 250 руб.

О пространственной структуре вируса гриппа : Исследование методом тритиевой планиграфии  О пространственной структуре вируса гриппа : Исследование методом тритиевой планиграфии 

Введение тритиевой метки в исследуемые
объекты.
5. Контроль за сохранением нативности меченых
препаратов вируса.
5.1 Анализ меченных тритием вирусных белков.
5.2 Анализ включения метки в структурные
компоненты липосом.
6. Ковалентное связывание М1 белка с
тиопропилсефарозой 6В.
7. Расщепление иммобилизованного М1 белка и разделение пептидов.
8. Определение удельного мечения пептидов.
Глава III. Результаты и обсуждение.
1. Оптимизация методов выделения основных
структурных белков вируса гриппа.
2. Модель для изучения молекулярных
механизмов мембранбелковых
взаимодействий.
3. Получение меченных тритием вирионов
вируса гриппа и анализ включения метки в основные структурные белки.
4. О локализации М1 белка в вирионе вируса
гриппа.
5. Определение внутримолекулярного
распределения метки в М1 белке.
6. Моделирование укладки М1 белка в вирусе
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


РНК, а также данные о его структурных и неструктурных белках . Локализация каждого компонента в вирусной частице изучалось многими биофизическими и биохимическими методами. В частности, важный вклад в понимание структуры компонентов и их организацию в вирусной частице внесли методы электронной микроскопии. Работы с их использованием широко представлены в обзоре . Так, в частности, структуры низкого разрешения поверхностных гликобелков НА и , внутренних РНКбелковых комлексов и нуклеобелка , а также некоторые черты матриксного М1 белка все они были изучены различными методами электронной микроскопии. Существенный вклад в общее представление о молекулярной организации поверхности вириона внесли также работы по i i иодированию , дансилированию , химическим сшивкам белков в вирионе ,, по протеолитическим обработкам , исследования с использованием фотореактивируемых и флуоресцентно меченых проб . Как результат интенсивных исследований, уже в начале х годов была общепринята модель организации вириона вируса гриппа, по которой М1 белок располагался в слое под липидным бислоем . Рис. Схематическое представление структурной организации вириона вируса гриппа из обзора Т. Стэгман и Р. Хелениус . Показаны небольшая часть вириона изнутри нижняя часть рисунка и снаружи верхняя часть рисунка. Однако, ряд экспериментов по связыванию с вирионами вируса гриппа моноклональных антител к М1 белку, свидетельствовали о специфическом экспонировании ряда участков М1 белка на поверхности вириона подобно данным, полученным в работе . И эти результаты, вплоть до последних работ по криоэлектронной микроскопии вируса гриппа А, поддерживали иную модель вириона, по которой М1 белок рассматривался как трансмембранный с частичной экспонированностью на внешнюю сторону липидного бислоя . , кристаллической структуры НА в комплексе с высокоаффинными аналогами рецептора , кристаллической структуры мембрандистального фрагмента субъединицы НА в его мембрансливающем активном состоянии , кристаллической структуры 1 фрагмента РНК связывающего домена неструктурного белка 1 и, наконец, кристаллической структуры фрагмента матриксного М 1 белка . Возникновение и развитие нового метода, криоэлектронной микроскопии, дало мощный толчок в изучении архитектуры интактных биологических образцов. Быстрое замораживание в форме стекла тонкой пленки вирусной суспензии и использование специального устройства для переноса и поддержания образца в ходе исследования при температуре жидкого азота а в более поздних модификациях при температуре жидкого гелия во избежание расстекловывания изменения фазового состояния образца дало возможность изучать нативные негидратированные вирусные частицы. Первые криомикроскопические изображения вируса гриппа А были получены в г . В работе была представлена фотография неочищенного препарата вируса гриппа А штамм Х, где хорошо были видны мембраны больших вирусных частиц, представляющие липидные бислои. К сожалению, тогда авторы не заметили на своих снимках еще один тип вирусных частиц, малых вирусных частиц с небислойными оболочками, что было обнаружено в более поздних работах другими исследователями . А, Фьюуоши и др. Оболочки наиболее больших вирусных частиц были фосфолипидными бислоями. При этом, хроматографическая фракция, содержащая зти частицы была в значительной степени лишена вирусной активности. Оболочки большинства вытянутых и малых сферических вирусных частиц были принципиально иными. Они представляли собой комбинацию тонкого внешнего липидного монослоя толщиной 3. Эти последние частицы содержали основную часть вирусной активности в препаратах. Полученные данные в сочетании с компьютерным моделированием позволили авторам предложить структурную модель мембраны интактных биологически активных частиц . Структура М 1 белка. Его основные функциональные и антигенные характеристики. Матриксный М1 вируса гриппа многофункциональный белок, вовлеченный в различные стадии жизненного цикла вируса ,.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.268, запросов: 145