Разработка иммуноферментной тест-системы для выявления антител к цирковирусу свиней второго типа

Разработка иммуноферментной тест-системы для выявления антител к цирковирусу свиней второго типа

Автор: Шкаева, Мария Александровна

Шифр специальности: 03.00.06

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2006

Место защиты: Москва

Количество страниц: 121 с. ил.

Артикул: 2937678

Автор: Шкаева, Мария Александровна

Стоимость: 250 руб.



Экономический ущерб, наносимый свинокомплексам болезнями, ассоциированными с ЦВС2, может быть значительным, что связано с потерями от недополучения продукции и высокой смертностью поросят послеотъемного периода . Сатина Т. А., . Распространение ЦВС2 в свиноводческих хозяйствах различных стран мира оценивают по обнаружению вирусспецифических антител в сыворотке крови свиней методами иммуноферментного анализа ИФА, непрямой иммунофлюоресценции РИФ и выявлению вируса, вирусного антигена или вирусной ДНК в тканях и органах поросят методами электронной микроскопии, гибридизации i i, полимеразной цепной реакции ПЦР, а также иммуногисто химически i . В нашей стране в ЗАО НПО НАРВАК и в ФГУ ВНИИЗЖ для обнаружения ЦВС2 разработан и используется метод ПЦР Кукушкин С. А. и др. В этой связи использование ИФА представляется наиболее эффективным методом мониторинга цирковирусной инфекции в популяции свиней на территории РФ. Известно, что одним из перспективных подходов к созданию иммуноферментных тест систем для серологических исследований является использо вание в качестве антигенов рекомбинантных белков. Д, который индуцирует синтез основной массы антител при инфицировании животных В. М. . Таким образом, данный белок является самым подходящим антигеном для использования в ИФА. В мире уже существуют аналогичные разработки иммуноферментных тестсистем I . ИФАнабора, выпускаемого на регулярной основе. Цель работы. Разработка иммуноферментной тестсистемы и технологии производства ИФАнабора для выявления антител к цирковирусу свиней второго типа в сыворотках крови животных. Разработать технологию, получить и охарактеризовать рекомбинантный нуклеокапсидный белок 2 цирковируса свиней второго типа. Разработать методику постановки, учета и интерпретации результатов непрямого твердофазного ИФА для выявления антител к ЦВС2 в сыворотках крови животных. Определить диагностическую ценность разработанной иммуноферментной тестсистемы для выявления антител к ЦВС2 в сравнении с методом аналогичной направленности. На основе иммуноферментной тестсистемы разработать технологию производства ИФАнабора. Для этого определить стабильность компонентов набора при хранении, разработать его оптимальную комплектацию и инструкцию по применению. Провести испытание ИФАнабора по выявлению антител к ЦВС2 в практических условиях с использованием сывороток крови свиней полученных от животных различных половозрастных групп. Провести эпизоотологический мониторинг ЦВС2 в отдельных свиноводческих хозяйствах РФ. Научная новизна работы. Разработана технология получения и очистки рекомбинантного белка 2 цирковируса свиней второго типа. ИФА для выявления антител к цирковирусу свиней второго типа в сыворотке крови свиней. Оптимизированы условия проведения ИФА при исследовании сывороток крови свиней, взятых в одном разведении. В сравнительных исследованиях показана высокая чувствительность и специц. ИФА и РИФ. На основе иммуноферментной тестсистемы разработана оптимальная комплектация и технология производства ИФАнабора. Установлена возможность длительного хранения компонентов ИФАнабора и его диагностическая эффективность в лабораторных исследованиях, направленных на выявление антител к ЦВС2. Практическая значимость исследований. ЦВС2. На изготовление и применение ИФАнабора ЦИРКОСЕРОТЕСТ разработана нормативнотехническая документация, утвержденная в установленном порядке ТУ 0. Впервые проведены серологические исследования и получены данные о распространении ЦВС2 в свиноводческих хозяйствах РФ. Основные положения, выносимые на защиту. ЦВС2 в популяции свиней на территории Российской Федерации. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на 1м Всероссийском совещании директоров ветеринарных лабораторий субъектов Российской Федерации г. Брянск, научнопроизводственных совещаниях сотрудников ЗАО НПО НАРВАК г. Москва, гг. Института вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН г. Публикации. По материалам диссертации опубликовано три научные работы и одна принята в печать. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 8 стр. Материалы диссертации иллюстрированы 7 таблицами и рисунками. Список литературы включает 5 источников отечественных и 4 зарубежных авторов.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.250, запросов: 145