Изучение молекулярных механизмов, определяющих различия уровня экспрессии гена АФП в клонах крысиной гепатомы

Изучение молекулярных механизмов, определяющих различия уровня экспрессии гена АФП в клонах крысиной гепатомы

Автор: Кустова, Инна Феликсовна

Шифр специальности: 03.00.06

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2002

Место защиты: Москва

Количество страниц: 138 с. ил

Артикул: 2318586

Автор: Кустова, Инна Феликсовна

Стоимость: 250 руб.

Изучение молекулярных механизмов, определяющих различия уровня экспрессии гена АФП в клонах крысиной гепатомы  Изучение молекулярных механизмов, определяющих различия уровня экспрессии гена АФП в клонах крысиной гепатомы 

СОДЕРЖАНИЕ
Список сокращений
Глава 1. Введение
Глава 2. Обзор литературы
2.1. Структура и функции АФП
2.2. Структура и эволюция гена АФП
2.3. Продукты транскрипции гена АФП
2.4. Синтез АФП в норме и при патологии
2.5.1. Механизмы регуляции экспрессии гена АФП
2.5.2 Транскрипционные факторы, определяющие экспрессию печеньспецифических генов
2.5.3. Взаимная регуляция ГЯФ
2.6. Структура регуляторного элемента гена АФП. исэлементы
2.7. Модель регуляции экспрессии гена АФП
2.7.1. Транскрипционные факторы, осуществляющие регуляцию экспрессии гена АФП
2.7.2. Возможная модель регуляции экспресиии гена АФП
2.8. Создание соматических гибридов, как метод изучения регуляции экспрессии генов
2.9. Линия крысиной гепатомы МсАЯН
2 Изучение профилей экспрессии генов в ГКК
2 Использование регуляторных элементов АФП в генной терапии
Заключение
Глава 3. Материалы и методы
3.1. Список использованных растворов и сред
3.2. Клеточные линии
3.3 Бактериальные штаммы и плазмидные векторы.
3.4. Трансформация клеток Е.СоИ
3.5 Получение и анализ культур клеток млекопитающих.
3.6. Получение гибридизационных зондов
3.7. Выделение суммарной клеточной РНК с помощью гуанидинтиоцианата
3.8. Нозернблог анализ
3.9. Метод Обратная Транскрипция Полимеразная Цепная Реакция
3 Сканирование и компьютерная обработка результатов
Глава 4 . Результаты исследования
4.1. Сравнение спекгров экспрессии печеньспецифических белков и
транскрипционных факторов в АФП и АФГГ клонах
4.2. Получение соматических гибридов
4.3. В соматических гибридах не синтезируется АФП
4.4. Экспрессия мРНК АФП в соматических гибридах подавлена
4.5. Экспрессия печеньспецифических генов в гибридах
4.6. Изучение экспрессии транскрипционных факторов в соматических гибридах
Глава 5. Обсуждение результатов
5.1. Подавление экспрессии гена А ФП в соматических гибридах
5.2. Синтез СА и других маркеров дифференцированного состояния гепатоцитов в соматических гибридах подавлен
5.3. Экспрессия транскрипционных факторов в соматических гибридах
Список литературы


Во многих эмбриональных тканях были обнаружены рецепторы к АФП, которые, возможно, участвуют в транспорте ненасыщенных жирных кислот внутрь клетки v . Мою, i, . Есть данные, что АФП способен также связывать и транспортировать такие лиганды, как биллирубин, стероиды, флавоноиды, диоксин, тяжелые металлы и различные лекарства ii, . В отличие от СА, АФП способен связывать эстрогены. Эта функция АФП считается второстепенной, так как связывание наблюдалось в основном у крыс и мышей . , . . Возможно, циркулирующий или локализованный на поверхности клетки АФП может нейтрализовать эстрогены в развивающемся плоде i , . Пока недостаточно изучена функция АФП как ингибитора иммунного ответа. Была описана способность АФП ингибировать Тлимфоциты i vi i i, . Позднее оказалось, что этот эффект зависит от происхождения АФП и методов его выделения . Вероятно, в этом процессе участвуют лиганды, возможно, жирные кислоты, связанные с АФП в конкретной фракции ii . Есть данные о том, что АФП блокирует экспрессию белков главного комплекса гистосовмесгимости II класса на поверхности макрофагов, тем самым ингибируя презентацию чужеродных антигенов и активацию Тхелперных клеток . . . Более того, в таких условиях может развиться толерантность к этим антигенам. Вероятно, высокий уровень синтеза АФП в эмбриональной печени и в начальный период жизни у крыс и мышей является причиной толерантности к собственным антигенам и неспособности к иммунному ответу в этот период развития. СТРУКТУРА И ЭВОЛЮЦИЯ ГЕНА АФП. В геноме млекопитающих содержится единственная копия гена АФП ii . ДСБ и геном аальбумина аАЛБ, который в геноме человека называют афамином ii . Эти белки и их гены обладают значительной степенью гомологии первичной структуры . Локализация в геноме. Все гены этого семейства локализованы на одной хромосоме. Для генома человека это длинное плечо 4 хромосомы i, i . ii i, . Расстояние между генами АФП и СА . СА . АФПЗ . Расстояние между генами ДСБ и СААФП составляет 1. . У мышей эти гены локализованы на 5 хромосоме 5СА . АФПЗ I . В геноме крыс также был обнаружено тандемное расположение родственных генов на хромосоме 5СА т. АФП т. АЛБЗ i . v . . Рис. Структура гена АФП. Ген АФП крысы имеет размер т. Все гены этого семейства, за исключением ДСБ, состоят из экзонов и интронов, причем 1й и й экзоны являются некодирующими. Ген ДО содержит экзонов, а белок обладает меньшей молекулярной массой . Структура гена А ФП консервативна для мышей ii . . , и человека i . i . Аналогичную структуру имеют альбуминовые гены шпорцевой лягушки X Ivi . Для всех представителей семейства альбумина показан полиморфизм как на уровне ДНК . . x . Эволюция генов семейства альбумина. При анализе нуклеотидных последовательностей генов семейства альбумина было обнаружено большое количество коротких повторов. Отсюда возникло предположение, что предшественником современных генов был первичный домен, образовавшийся путем амплификации и дивергенции коротких повторов x i. Около 0 млн. . i . Было замечено, что белок аАЛБ более гомологичен АФП чем С А или ДСБ гомологии . ii i, . По последовательностям ТАТАбоксов и сайтам связывания с транскрипционными факторами структура промоторов генов АФП и аАЛБ имеет больше сходства, чем с промотором СА. Ш1 6,15,8 ш 4,34 Н Рис. Тандемное расположение генов семейства альбумина человека. Структура регуляторного района генаФ7. Р промотор, 8 репрессор сайленсер, Е Е энхансеры гена АФП.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.194, запросов: 145