Факторы, влияющие на пролиферацию и апоптоз в мышиных гепатокарциномах различного уровня дифференцировки

Факторы, влияющие на пролиферацию и апоптоз в мышиных гепатокарциномах различного уровня дифференцировки

Автор: Овчинников, Дмитрий Александрович

Количество страниц: 139 с. ил.

Артикул: 2634159

Автор: Овчинников, Дмитрий Александрович

Шифр специальности: 03.00.06

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2004

Место защиты: Москва

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений Введение
ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР Гепатоцеллюлярные карциномы.
Факторы риска возникновения ГК.
Хронический вирусный гепатит.
Вирус гепатита В.
Вирус гепатита С.
Химические канцерогены.
Наследственные генетические изменения.
Этапы гепатоканцерогенеза.
Генетические основы трансформации гепатоцитов.
Гепатоцитарные ядерные факторы и их роль в развитии и функционировании печени.
Семейство ЕДОП.
Семейство СЕВР.
Семейство Н3.
Семейство ШЧБб.
Семейство ЧЕ4.
Регуляция ГЯФ.
ГЯФ при патологиях.
ГЯФ и гепатоканцерогенез.
Модель одноступенчатой прогрессии ГК мышей.
Трансформирующий фактор роста р.
ТСБр лиганд.
Рецептор к ТСРр.
Рецепторы к ТСБр 3 типа.
Рецепторы к ТвБР 1 и 2 типов.
Взаимодействие ТвГр лиганд рецептор.
БИАЛ белки.
ТвБр сигнальный путь.
ТвБр респонсивные гены.
Прекращение ТСЕрзависимой сигнализации.
Белки, взаимодействующие с рецепторами к ТСБр.
1.4.9. независимая сигнализация.
1.4 сигнальный путь и канцерогенез.
1 Антиопухолевая активность .
1 Нарушения сигнального пути 0 в опухолях.
1.4.3. Проопухолевые эффекты .
1.4 Эпителиальномезенхимальный переход и .
1 Эпителиальномезенхимальный переход.
1 Роль в эпителиальномезенхимальном переходе.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Список использованных растворов и сред.
2.2. Линии перевиваемых гепатокарцином.
. Клеточные линии.
2.4. Трансформация клеток Е.
2.5. Выделение нуклеиновых кислот.
2.6. Электрофорез нуклеиновых кислот в агарозных гелях.
Метод Обратная Транскрипция Полимеразная Цепная
Реакция ОТПЦР.
2.8. Тест на цитотоксичность с использованием тиазолила синего.
2.9. Измерение уровня активации белка р.
2 Измерение скорости роста ГК i vi и i viv.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Модель одноступенчатой прогрессии гепатокарцином мышей.
3.2. Экспрессия 4 влияет на ростовые характеристики ГК.
3 2 1 Сравнение уровня апоптоза в ГК с различным уровнем
длфференцировкн.
2 Влияние экспрессии 4 на уровень пролиферации и
скорость роста 6ГК i vi.
3 Реэкспрессия 4 снижает скорость роста 6ГК i viv.
Сравнение уровней экспрессии генов, вовлеченных в контроль пролиферации и апоптоза, в 6ГК и мГК.
Гиперэкспрессия респонсивных генов при одноступенчатой прогрессии ГК.
Исследование спектров экспрессии респонсивных генов
.2. и генов, участвующих, в зависимом сигнальном пути, методом ОТПЦР.
Изменения уровней экспрессии генов, участвующих в контроле пролиферации и апоптоза в гепатоцитах.
Кондиционированная среда НЗЗ обладает цитопротективным
эффектом.
2 КСЮЗ подавляет химически индуцированную активацию
белка р.
3.6. Подавление синтеза 2 в культуре клеток 6ГК.
3.6.1. Трансформация НЗЗ вектором, экспрессирующим ми
3.6.2. Определение количества в кондиционированной среде.
2 Подавление продукции 2 приводит к ухудшению
ростовых характеристик НЗЗ i vi и i viv.
4 Снижение синтеза 2 приводит к ослаблению
цитопротективного эффекта КСНЗЗ.
Введение 2 привело к подавлению экспрессию ряда
респонсивных генов в культуре 6ГК.
4. ОБСУЖДЕНИЕ.
4.1. 4 влияет на уровень пролиферации и скорость роста ГК.
4.2. сигнальный путь активирован в б ГК.
4 3 2, продуцируемый НЗЗ в среду, обладает
цитопротекгивным эффектом.
4 4 Инактивация синтеза 2 приводит к ухудшению ростовых
характеристик ГК.
4 5 Подавление синтеза 2 привело к снижению уровня
экспрессии геновмишеней .
5 ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
6 . ВЫВОДЫ
7 Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
iантитрипсин
5 5бромдезоксиуридин
5ФУ 5фторурацил
Ало алолипопротсин
СЕВР СААТэнхансер связывающий белок
V цитомегаловирус
корецепторные
фактор роста фибробластов
глицеральдегид 3фосфат дегидрогеназа
V вирус гепатита В
фактор роста гепатоцитов
гипоксантин фосфорибозилтрансфераза
V вирус гепатита С
I интерферон у
I инсулинподобный ростовой фактор
I рецептор инсулинподобного фактора 2рецептор маноза6фосфат
I интерлейкин
I ингибирующие
i i
белок, связывающий латентный
ММР матриксные металл о протеин азы
V вирус рака молочной железы мьппей
диабет молодых i ii
фосфатныйсолевой буфер рецепторные
связывающий белок ivi
связывающий элемент родственный
белок, ассоциированный с серинтреониновыми киназами
ТАК активируемая киназа
I4 индуцибсльный белок
I индуцибельный белок кДа
каталитическая субъединица теломеразы
трансформирующий фактор роста рецептор 1 типа к 2 рецептор 2 типа к 3 рецептор 3 типа к I фактор, взаимодействующий с фактор некроза опухоли
I белок, взаимодействующий с рецептором стимулированный клон V фактор роста эндотелия сосудов
XI связанный с Ххромосомой член семейства ингибиторов апоптоза
а.к. аминокислоты
АФП альфафетопротеин
6ГК быстрорастущая ГК
В КМ внеклеточный матрикс
фактор образования костей
ГК гепатоцеллюлярная карцинома
ГЯФ гепатоцитарные ядерные факторы
Доке доксирубицин
КС кондиционированная среда
мГК медленнорастущая ГК
НК нуклеиновая кислота
НМГ нормальные мышиные гепатоциты
ОТ обратная транскрипция
п.н. пара нуклеотидов
ПЦР полимеразная цепная реакция
С А сывороточный альбумин
т.н. тысяча нуклеотидов
т.п.н. тысяча пар нуклеотидов
ЭМП эпителиальномезенхимальный переход
ЭМС этиловый эфир метансульфониевой кислоты
Введение


Рак печени один из наиболее часто встречающихся видов опухолей в странах Азии и Африки ,7 случаев на человек , . В этих регионах он является основной причиной смерти от новообразований. В России, так же как в Европе и Америке, рак печени распространен значительно в меньшей степени, он составляет 3 от всех новообразований . В Якутии и ХантыМансийском автономном округе отмечены самые высокие в Европе и мире показатели заболеваемости ,7. Раки печени характеризуются скрытым течением и ранним метастазированием, поэтому уже в момент постановки диагноза ,3 больных неоперабельны . Чаще всего метастазы выявляются в перипортальных лимфоузлах, легких, реже в костях и головном мозге. Наиболее часто встречающейся формой рака печени являются ГК. Ежегодно в мире ГК выявляются у 0 0 1 0 0 новых больных 7, 8. К факторам риска для развития ГК следует отнести НВУ и НСУ, ряд химических канцерогенов, цирроз печени любого происхождения и некоторые другие факторы 7, . Изучение процессов лежащих в основе появления ГК привело к выявлению генов, участвующих в возникновении и развитии этой патологии. К ним можно отнести гены, кодирующие факторы роста ГОР а и 3, НвР, их рецепторы, опухолевые супрессоры р и рИЬ, молекулы межклеточных контактов и адгезии . Для ГК, как и для других новообразований, характерен процесс накопления генетических изменений, ведущих к приобретению опухолью все более злокачественного фенотипа, получивший название опухолевой прогрессии. Большое влияние на скорость и направление прогрессии имеют особенности исходной ткани, давшей начало опухоли. В ходе прогрессии эпителиальных опухолей наблюдается усиливающееся упрощение антигенного, цитологического и гистологического состава, являющееся следствием снижения уровня дифференцировки. Из других событий следует отметить увеличение скорости пролиферации, падение плоидности клеток, приобретение способности к инвазии и метастазированию. ГК, как и многие карциномы, сохраняют способность к редифференцировке и никогда не утрачивают все признаки исходной ткани . Изучение молекулярных основ прогрессии опухолей в целом и ГК в частности является важным и перспективным направлением исследований, в ходе которых могут быть найдены новые диагностические маркеры и мишени для терапии опухолей. Факторы риска возникновения ГК. К возникновению ГК могут приводить самые разные неблагоприятные воздействия внешней среды, питания, инфекции, наследственные заболевания и многое другое. Основные факторы риска перечислены в табл. Ниже мы рассмотрим более подробно важнейшие из них. Хронический вирусный гепатит. Одной из основных причин возникновения ГК является заражение вирусами НВУ или НСУ. Инфицирование этими вирусами увеличивает риск возникновения ГК приблизительно в 0 раз , с 5 до 3 случаев на 0 ООО. Именно эти вирусы ответственны за наблюдающийся рост числа ГК в странах Европы и Северной Америки. Хронический гепатит, вызванный НВУ или НСУ, приводит к развитию воспаления, повышению синтеза цитокинов, фиброзному перерождению печени и гибели гепатоцитов. В ходе борьбы иммунной системы с инфекцией гепатоциты подвергаются воздействию множества цитотоксических агентов перфорины, гранзим, активные формы кислорода, что приводит к их повреждению и гибели. Недостаток печеночных клеток приводит к индукции пролиферативных сигналов, сходных с теми, которые запускают регенерацию печени. Этому также могут способствовать некоторые цитокины, синтезируемые макрофагами 1Ь6, ТИРа . Увеличение количества сигналов к запуску клеточного цикла может подавлять процесс репарации ДНК, что, в свою очередь, приводит к возникновению мутаций. Другим следствием стимуляции пролиферации может быть подавление апоптоза. Фиброз, часто развивающийся на фоне вирусной инфекции, приводит к нарушению структуры печени, состава В КМ и взаимодействия клеток с ним. Эти два фактора в совокупности могут способствовать трансформации гепатоцитов
Наряду с неспецифическими механизмами гепатоканцерогенеза, для каждого из этих вирусов описаны специфические способы индукции ГК. Вирус гепатита В. НВУ это мелкий ДНКсодержащий вирус, относящийся к семейству гепаднавирусов.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.191, запросов: 145