Рекомбинантная L-аспарагиназа Erwinia carotovora: оптимизация экспрессии, выделение и свойства

Рекомбинантная L-аспарагиназа Erwinia carotovora: оптимизация экспрессии, выделение и свойства

Автор: Борисова, Анна Аркадьевна

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2003

Место защиты: Москва

Количество страниц: 127 с.

Артикул: 2615611

Автор: Борисова, Анна Аркадьевна

Стоимость: 250 руб.

Рекомбинантная L-аспарагиназа Erwinia carotovora: оптимизация экспрессии, выделение и свойства  Рекомбинантная L-аспарагиназа Erwinia carotovora: оптимизация экспрессии, выделение и свойства 



Целью работы являлось выделение и характеристика рекомбинантной аспарагиназы vii v, обладающей высокой противоопухолевой активностью и низкой цитотоксичностью. Выборе наиболее активного в плане синтеза аспарагиназы v. Е. i и оптимизации экспрессии целевого белка. Разработке лабораторного способа выделения высокоочищенного препарата рекомбинантной аспарагиназы v. Исследовании некоторых физикохимических, каталитических и структурных свойств аспарагиназы v. Выделении рекомбинантной аспарагиназы в препаративных количествах, достаточных для доклинических испытаний фермента и оценке противоопухолевой активности и цитотоксического действия в опытах на лабораторных животных. Все используемые в онкологической практике аспарагиназы в настоящее время выделяют из природных диких штаммов v. Е. i. Несомненной научной новизной данного исследования является то, что объектом изучения явилась рекомбинантная аспарагиназа v. Е. i. Синтез рекомбинантной аспарагиназы v. Центром Биоинженерия РАН плазмидами и , содержащими новый, ранее не описанный, ген аспарагиназы . Следует отмстить, что наше исследование по получению рекомбинантной аспарагиназы . В последнее время аналогичные работы начали проводиться и за рубежом. Так др и сотр. Германия работают над созданием рекомбинантной аспарагиназы . Ii ivi ii, США разрабатывают проект по созданию рекомбинантной аспарагиназы i i. В рамках исследования было проведено доклиническое изучение рекомбинантной аспарагиназы на лабораторных животных на базе Научноисследовательского центра токсикологии биопрепаратов М3 РФ НИЦ ТБП М3 РФ. Оказалось, что выделенный нами препарат рекомбинантной аспарагиназы . ЛИО1 и лимфоаденоза и оказывает слабое общетоксическое, иммунотоксическое и сенсибилизирующее действие. На сегодняшний день количество нуждающихся в аспарагиназе больных в нашей стране составляет не менее 4 0 5 0 человек. В то же время потребность в этом препарате покрывается всего на за счет его закупки по импорту. Принимая во внимание вышесказанное, а также высокую стоимость коммерческих препаратов фермента 0 0 тыс. США очевидно, что большинство больных не в состоянии приобрести аспарагиназу. Учитывая высокие уровни продукции рекомбинантной аспарагиназы . Благодаря низкому сродству рекомбинантной аспарагиназы к глутамину, аналогу аспарагина, снизится токсический эффект. Все это позволит с одной стороны значительно упростить его промышленное производство и тем самым снизить стоимость полученного препарата аспарагиназы, а с другой уменьшить его токсическое действие на организм. Адаптация к условиям производства изложенного в настоящей работе способа очистки рекомбинантной аспарагиназы и его внедрение позволят выпускать коммерческий препарат этого фермента в количествах, необходимых для лечения большого контингента больных различными формами лейкозов. Материалы работы легли в основу заявок на патенты см. Диссертационная работа изложена на 7 листах машинописи и состоит из введения, глав обзора литературы, главы Материалы и методы исследования, глав раздела Результаты исследования и их обсуждение, общего заключения, выводов и списка литературы, включающего 9 источника. Диссертация иллюстрирована рисунком и таблицами. Результаты исследований доложены на конференциях Биотехнология , г. Пущино, Россия, , Всероссийской конференции Проблемы медицинской энзимологии г. Москва, Россия, 2ом Московском международном Конгрессе БИОТЕХНОЛОГИЯ состояние и перспективы развития г. Москва, Россия, . Рекомбинантная плазмида ДНК для переноса и экспрессии в клетках ii i гена аспарагиназы vii v и способ получения рекомбинантной из биомассы штамма Е. Находится на рассмотрении заявка Рекомбинантная аспарагиназа vii v заявка 5, приоритет от . Работа выполнена на базе ГУ НИИ БМХ РАМН совместно с Центром Биоинженерия РАН конструирование штаммовсуперпродуцентов аспарагиназы и НИЦ ТБП М3 РФ г. Серпухов, Московская область доклиническое изучение рекомбинантной аспарагиназы при финансовой поддержке Международного НаучноТехнического Центра МНТЦ грант и РФФИ грант 2а. Апробация диссертации состоялась на межлабораторном семинаре ГУ НИИ БМХ РАМН сентября года.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.269, запросов: 145