Некоторые молекулярно-биохимические плазмамембранные механизмы действия полипептидных факторов роста : Исследование в нормальных и опухолевых клетках-мишенях

Некоторые молекулярно-биохимические плазмамембранные механизмы действия полипептидных факторов роста : Исследование в нормальных и опухолевых клетках-мишенях

Автор: Демидова, Валентина Семёновна

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2003

Место защиты: Москва

Количество страниц: 473 с. ил.

Артикул: 2616366

Автор: Демидова, Валентина Семёновна

Стоимость: 250 руб.

Некоторые молекулярно-биохимические плазмамембранные механизмы действия полипептидных факторов роста : Исследование в нормальных и опухолевых клетках-мишенях  Некоторые молекулярно-биохимические плазмамембранные механизмы действия полипептидных факторов роста : Исследование в нормальных и опухолевых клетках-мишенях 

СОДЕРЖАНИЕ стр.
СОДЕРЖАНИЕ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.II
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Цель исследования
Задачи исследования
Научная новизна и теоретическая ценность диссертационной
работы.
Практическая значимость данной работы
Положения, выносимые на защиту.
Апробация диссертационной работы.
Объем и структура диссертации.
Часть I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
ГЛАВА I. ОСНОВНЫЕ ПУТИ ТРАНСМЕМБРАННОЙ ТРАНСДУКЦИИ
СИГНАЛОВ В ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ КЛЕТКАХ.
1.1. Основные общие рецепторопосредованные пути трансмембранной передачи внешнего сигнала в клетках эукариот 1.2. Фосфорилирование белков клеточной мембраны,
опосредованное лигандренепторным взаимодействием
1.3. Изменения мембранных фосфолипидов в рецепторзависимых
процессах
1.4. ИнозитолтрисфосфатI 1,4,5РЯ.
1 5.Диацилглицерин ДАГ активатор протсинкиназы С
1.6. белки плазматических мембран в передаче внешних
сигналов.
1.7. АТФ как трансмембранный посредник действия ростовых факторов.
1.8. Редоксферменты плазматических мембран, их связь
с клеточным ростом и транспортом
1.9. Трансплазмамембранная редокссистема в клеточном росте
связь с синтезом АТФ
ГЛАВА II. ПОЛИПЕПТИДНЫЕ ФАКТОРЫ РОСТА.
2.1. Введение
2.2. Мультифункциональная природа пол и пептидных
факторов роста
2.3. Пути действия ПФР на клеткимишени
2.3.1. Типы регулянии роста опухолевых клеток
2.4. Роль ПФР в опухолевом ангиогенезе.
2.5. ПФР и онкогены
2.6. Роль ПФР в гематопоэзе
2.6. 1 .Эритропоэтин ЕЮ как представитель гематопоэтических
факторов роста. Его структура и функция.
I ЛАВАШ.РЕЦЕПТОРЫ ПОЛИПЕПТИДНЫХ ФАКТОРОВ РОСТА
3.1. Структура и функции рецепторных тирозинкиназ
3.1. 1 .Внеклеточный домен.
3.1.2. Трансмембранная область.
3.1.3. Околомембранный домен.
3.1.4. Протеинтирозинкиназный домен.
3.1.5.Карбокситерминальный С концевой участок гирозинкназ.
3.2. Классификация РТК.
3.3. Рецепторы гематопоэтических факторов роста и цитокинов
3.4. Лутофосфорилированис тирозинкиназ факторов роста
3.5. Онкогенный потенциал рецепторных тирозиновых киназ
3.6. Активация рсцепторопосредуемого тирозинкиназного
сигнал грансдуцируюшего пути ведт к онког енезу
3.7. Активация с участием рецепторных тирозинкиназ.
3.8. белок контролирует сигнальные пути, ведущие к раку 3.9. Участие рецепторных тирозинкиназ факторов роста в
регуляции функции семейства тирозинкиназ
3 Фосфорилирование белков роль в трансмембранной передаче сигнала к пролиферации, дифференцировке и грансформации
клеток.
3 ЛТФ мембранный посредник и усилитель передачи
информации от факторов роста.
ЧАСТЬ II. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
ГЛАВА IV. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. Выделение обогащенных плазматическими мембранами частиц ОПМЧ из различных тканеймишеней для действия
факторов роста.
4.1.1. Выделение плазматических мембран из эритроцитов
человека.
4.1.2. Выделение ОПМЧ из эритроидных клеток селезенки
мышей линии С В.
4.1.2.1. Изоляция эритроидных клеток из селезенок мышей
4.1.2.2. Приготовление ОПМЧ из эритроидных клеток
селезенки мышей
4.1.3. Выделение ОПМЧ из ткани лгкого и лейомиосаркомы 0 4.1.4. Выделение ОПМЧ из тканей молочной железы,
кишечника, желудка .
4.1.5. Выделение ОПМЧ из невриномы человека.
4.1.6. Выделение ОГ1МЧ из гепатоцитов крысы и человека.
4.1.6.1. по методу . vi с некоторыми модификация
4.1.6.2. по методу . и соавт. с некоторыми модификациями.
4.1.7. Выделение ОПМЧ из жировой ткани крыс и липосаркомы
человека.
4.1.8. Выделение 1МЧ из клеток эндотелия, полученного из
гемангиоматозной ткани человека
4.1.9. Выделение ОПМЧ из ткани поджелудочной железы.
4.1 Культивирование клеток человека и мыши
4.1.1 1 Выделение 1МЧ из культивируемых клеток
линий 1, и
4. 2. Определение плазмамембранного биосинтеза АТФ
4. 3. Количественное определение АТФ биолюминесцентным
методом
4. 4. Полярографический метод определения кислорода.
4. 5. Определение супероксиданиона, производимого
плазматическими мембранами животных клеток.
4. 6. Определение экспрессии ядерного онкогена стус
4. 7.Связывание Чинсулина с рецепторами плазматических
мембран эритроцитов человека.
4. 8. Статистическая обработка результатов
4.9.Используемое оборудование.
4 Список использованных реактивов.
ГЛАВА V. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНЫХ УСЛОВИЙ
ПЛАЗМАМЕМБРАННОГО СИНТЕЗА АТФ5
5.1. Определение количества специфических рецепторов инсулина
на НМ эритроцитов
5.2. Схема проведения эксперимента по биосинтезу АТФ
5. 3. Состав инкубационной среды
5.3. 1. Описание предназначения основных веществ, входящих
в состав инкубационной среды.
5.3.2. Доказательство участия неорганического фосфата в процессе

плазмамембранного синтеза АТФ
5.3.3. Исследование влияния кислорода на плазмамембранный
синтез АТФ.
5.4. Определение оптимальной температуры и продолжительности
инкубации для протекания процесса плазмамембранного
синтеза АТФ
5.5. Выявление оптимальных концентраций факторов роста, в
которых они проявляют максимальный стимулирующий эффект
на плазмамембранный синтез АТФ при взаимодействии с
клеткам ими тенями
5.5.1. Исследование концентрационной зависимости стимуляции
плазмамембранного синтеза АТФ различными концентрациями
инсулина на плазмамембранного синтеза АТФ в эритроцитах и в ь
ку льтивируемых i vi опухолевых клетках линии .
5.5.2. Исследование концентрационной зависимости стимуляции плазмамембранного синтеза АТФ различными концентрациями в культивируемых i vi опухолевых клетках линии А1 и .
5.5.3. Исследование концентрационной зависимости стимуляции плазмамембранного синтеза АТФ различными концентрациями в культивируемых i vi опухолевых клетках линии
5.5.4. Исследование концентрационной зависимости стимуляции плазмамембранного синтеза АТФ различными копнен фациями
эрифомоэтина в эритроидных клетках из селезенки мышей
линииI 6.
5. 6. Значение целостности плазматической мембраны для плазмамембранного синтеза АТФ


ГЛАВА VI. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА Л АЗМАМЕМБРАННОГО СИНТЕЗА АТФ, СТИМУЛИРУЕМОГО ПОЛ И ПЕПТИДНЫ МИ ФАКТОРАМИ РОСТА, В НОРМАЛЬНЫХ И ОПУХОЛЕВЫХ
КЛЕТКАХ
6.1. Влияние ингибиторов трансмем бра мной ИАОНдегидрогеназы
на плазмамембранный синтез АТФ, стимулируемый ПФР в клетках
мишенях
6.1. 1. Исследование влияния адриамицина на плазмамембранный
синтез АТФ.
6.1.2. Исследование влияния мерсалиловой кислоты на
плазмамембранный синтез АТФ, стимулируемый полипептидными
факторами роста в клеткахмишенях
6.2. Исследование участия протона Н в плазмамембранном
синтезе АТФ
6.3. Исследование механизма сопряжения гшазмамембранного
синтеза АТФ и передачи электронов в редоксцепи плазматических
мембран клетокмишеней для ПФР.
6.3.1 Измерение потребления кислорода в процессе
плазмамембранного синтеза АТФ ИМ эритроцитов человека
6 3.2. Участие супероксиданион радикала в процессе
плазмамембранного синтеза АТФ
6.3.3. Исследование возможного участия переносчика электронов
кофермента о в процессе плазмамембранного синтеза АТФ,
стимулированного факторами роста
6.3.4. Использование различных акцепторов электронов в процессе
плазмамембранного синтеза АТФ для доказательства вовлечения в
этот процесс цианиднечувствительной ЫА1Нспецифичной
электронтранспортной цепи плазматических мембран
6.3.5. Влияние бензоилгидроксамовой кислоты на плазмамембран
ный синтез АТФ.
6.4. Изучение роли ионов Ыа и Ыа4 К АТФазы в плазмамембранном синтезе АТФ, стимулируемом полипептидными факторами роста
6.4.1 .Влияние различных концентраций ионов натрия на
инсулине гимулируемый плазмамембранный синтез АТФ в
эритроцитах человека.
6.4.2. Влияние амилорида на плазмамембранный синтез АТФ. стимулируемый факторами роста, в различных клетках
мишенях
6.4.3. Влияние оуабаина и моненсина на плазмамембранный синтез АТФ, стимулируемый факторами роста, в различных клеткахмишенях
6.5. Изучение биологической роли плазмамембранного синтеза
АТФ, стимулируемого ПФР в клегкахмишенях
6.5. I. Исследование возможных мест потребления АТФ, синтезированного в процессе взаимодействия факторов роста со своими специфическими рецепторами плазматических
мембран клетокмишеней.
6.5. 1.1. Использование структурных АТФаналогов для
ингибирования потребителей АГФ
6.5. 1.2. Использование генистеина и кверцетина для ингибирования тирозиновых киназ, как возможных
потребителей сигнального АГФ
6.5.1.3.Использование тирфостинов для селективного игибирова ния рецепторных тирозиновых киназ как возможных потребителей
сигнального АТФ.
6.5. 2. Исследование роли стимулируемого факторами роста плазмамембранного синтеза А ГФ в процессах регуляции клеточного цикла
6.5. 2. 1. Исследование возможной взаимосвязи между аэробным синтезом АТФ на плазматической мембране и экспрессией ядерного
онкогена стус в ответ на действие факторов роста.
6.5. 2. 2. Влияние циклогексимида и пуромицина на плазмамембран ный синтез АТФ, стимулированный факторами роста, в клетках печени крысы
ГЛАВА VII.ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПОЛИПЕПТИДНЫХ ФАКТОРОВ РОСТА НА ПЛАЗМАМЕМБРАННЫЙ СИНТЕЗ АТФ В КЛЕТКАХ
НОВООБРАЗОВАНИЙ ЧЕЛОВЕКА РАЗЛИЧНОЙ
ЛОКАЛИЗАЦИИ9
7.1. Введение.
7.2. Влияние инсулина на плазмамембранный синтез АГФ в
гистологически различных гканяхмишенях.
7.3. Влияние ВСЕ на плазмамембранный синтез АТФ в гистологи
чески различных тканяхмишенях.
7.4. Влияние ТвЕа на плазмамембранный синтез АТФ в
гистологически различных тканяхмишенях
7. 5. Влияние ЬГОЕ на плазмамембранный синтез АТФ в
гистологически различных тканяхмишенях
7.6. Влияние РООПЬ на плазмамембранный синтез АТФ в гистологически различных тканяхмишенях
7.7. Влияние УЕСЕ на плазмамембранный синтез АТФ в гистологически различных тканяхмишенях
7.8. Влияние ТМчх на плазмамембранный синтез АТФ в
т гистологически различных тканяхмишенях.
7.9. Влияние 1Ь2 на плазмамембранный синтез АТФ в
гистологически различных тканяхмишенях
7 Влияние ОНЬ на плазмамембранный синтез АТФ в гистологически различных тканяхмишенях
7 Влияние ЖЗИ на плазмамембраиный синтез АГФ в
гистологически различных тканяхмишенях.
ГЛАВА VIII. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
I ЛАВА IX. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Показана гиперполяризация ПМ посредством наружного . Транспорт электронов в этой ферментной системе сопровождается высвобождением протонов из клетки . Природа натурального акцептора электронов для трансплазматической дегидрогеназы i окончательно не установлена. Маловероятно, что цигохром с является окислителем, реагирующим с наружной стороны i не плазматической системы переноса элекчронов, поскольку цитохром с редукэазная активность локализуется исключительно на внутренней поверхности плазматических мембран. Возможно, что кислород может быть таким натуральным акцептором электронов, утилизирующимся на наружной поверхности ММ. Не исключено, что акцептором электронов для трансплазмамембранной Нспецифической редокс цепи может выступать также кислород, но утилизирующийся на внутренней цитоплазматической стороне Г1М. Протоны выталкиваются на наружную сторону ИМ, а электроны отводятся назад на кислород на внутреннюю сторону ПМ см. Трансплазма мембранная редокссистема в клеточном росте связь с синтезом АТФ. М. ещ в г. АТФ на внутренней стороне Г1М эритроцитов в течение мин, не уточняя места образования АТФ. Синтезируется ли АТФ на плазматической мембране эритроцита, т. Поскольку феррицианид имеет три отрицательных заряда и не проникает внутрь клеток,

авторы заключили, что этот окислительный агент влияет на синтез ЛТФ без прямого контакта с гликолитическими системами клетки. Впоследствии vv . М. , показал, что ферроцианид, в противоположность феррицианиду, ингибирует распад АТФ пит. Н. о том, что восстановление феррицианида осуществляется посредством грансмембранной трансдегидрогеназы, которая переносит электрон от вну феннего редокедонора на наружный феррицианид. М., i , , . АТФ в эритроцитах человека i , , . Однако, следует подчеркнуть, что ни в работе vi . М. , ни в работе и . Н. не сообщалось о возможности инсулинстимулируемого т. АТФ с внутренней стороны ПМ в связи е транспортом электронов и движением ионов через внешнюю мембрану клетки. Идея о сопряжении инсулинрецепторного комплекса с мембранными эффекторными системами через образование в ходе окислительного процесса, сцепленног о с фана юртом электронов и движением протонов на ПМ клетки короткоживущего АТФ, была впервые сформулирована Карелиным в Карелин А. Скелетных мыши крысы с Ндвижимой редокс функцией ПМ Карелин А. А.,а. Эта идея основывалась на открытии i Р. I ионов и синтезом АТФ. Поскольку эритроциты не имеют митохондрий, то наблюдавшийся синтез АТФ i . М. i . К. и . АТФсинтезирующего фермента, 2 стимуляции гликолиза или 3 ингибировании гидролиза АТФ. Е. и М. Исследования ИМ, изолированных из клеток различных тканей показывают, что феррицианидредуктаза присутствует в этих препаратах vv . Часть этой активности связывается с цитохром Ьчредуктазой . Рис. Модель опосредованной аскорбиновой кислотой АК трансмембранной окислительновосстановительной системы в эритроцитах человека через дегидроаскорбиновую кислоту ДГАК Отпег Е. Р.,Росг М. Е.Б. Применив эту корректную методику, авторы покатали, что в мембранах эритроцитов человека активность цитохром оредуктазы локализуется преимущественно на цитоплазматической стороне мембраны. Основываясь на этих данных, нет, повидимому, основания считать, что цитохром средуктаза может действовать в качестве трансмембранного переносчика электронов, функционирующего поперек мембраны клетки. Скорее эта система существует для того, чтобы привести в движение трансплазматическую электронотранспортную редоксцепь, которая реагируете искусственным непроникающим электронным акцептором феррицианидом или с природным акцептором кислородом . НГА 2 Восстановление феррицианида или кислорода в интактных эритроцитах сопровождается переносом протонов через ПМ и, возможно, синтезом АТФ . Находки i и П. Таким образом, трансмембранная феррицианидредуктазная электронтранспортная система действует в качестве редокс протонног о насоса плазматических мембран во всех клетках животных и растений. Но
АТФсинтетазы. IV i М. К. . ПМ чувствительны к действию гормонов и факторов роста . Показано.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.257, запросов: 145