Митохондриальная пальмитат/Ca2+- активируемая циклоспорин A- нечувствительная пора: свойства и возможная физиологическая значимость

Митохондриальная пальмитат/Ca2+- активируемая циклоспорин A- нечувствительная пора: свойства и возможная физиологическая значимость

Автор: Белослудцева, Наталья Валерьевна

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2008

Место защиты: Пущино

Количество страниц: 114 с. ил.

Артикул: 4245961

Автор: Белослудцева, Наталья Валерьевна

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений.
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Са2транспортирующие системы митохондрий.
1.1 Л. Митохондриальные системы входа Са2.
1.1.2. Митохондриальные системы выхода Са
1.1.3. Физиологическая роль Са2Атранспортирующих систем митохондрий
1.2. Са2зависимая циклоспорин чувствительная митохондриальная пора
1.2.1. Общая характеристика МРТ
1.2.2. Предполагаемый механизм образования циклоспорин Дчувствительной митохондриальной поры.
1.2.3. Возможная роль МРТ при патофизиологических условиях.
1.3. Циклоспорин нечувствительная митохондриальная пора. Жирные кислоты
как индукторы Са зависимой ЦсАнечувствительной поры
1.3.1. Общая характеристика циклосорин Апечувствительиой поры,
индуцированной пальмитиновой кислотой и Са
1.3.2. Возможная физиологическая роль митохондриальной пальмитатСа2активируемой поры.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Подготовка животных.
2.2. Выделение митохондрий из печени животных
2.3. Выделение митохондрий из сердца крыс
2.4. Оценка функциональных параметров митохондрий
2.5. Встраивание холестерина в мембраны митохондрий
2.6. Электрофорез и иммуноблотгинг.
2.7. Приготовление однослойных липосом, загруженных сульфородамином Б
2.8. Измерение выхода сульфородамина Б из однослойных липосом
2.9. Определение фазовой сепарации в мембранах липосом.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Свойства поры, активируемой иальмитатом и Са
3.1.1. Влияние кардиолииина и кардиолипинсвязывающего агента, ЮМнонил акридинового оранжевого, на функционирование пальмитатСа активируемой поры в мембране.
3.1.2. Влияние холестерина на образование пальмитатСа активируемой поры в митохондриях печени крысы и лилосомах
3.1.3. Влияние БНатентов на процесс образования в митохондриях пальмитатСа2активируемой поры.
3.2. ПальмитатСа2активируемая пора как система выхода ионов Са7 из митохондрий возможная роль в митохондриальном кальциевом цикле
3.2.1. Активация рециклизации Са2 в митохондриях в условиях добавленной пальмитиновой кислоты
3.2.2. Возможная активация рсциклизации Са2 Бг2 в условиях образования эндогенных жирных кислот.
3.2.3. Предполагаемый механизм рециклизации С а2 в митохондриях с
участием пальмитатСа активируемой поры.
3.3 Возможная роль митохондриальной пальмитатСа2активируемой поры в механизме пальмитатиндуцированного апоп гоза
3.3.1. Открытие пальмитатСа активируемой поры приводит к выходу апоптозиндуцирующего фактора АИФ из митохондрий
3.3.2. Ненасыщенные жирные кислоты, предупреждающие пальмитатиндуцироваиный апоптоз, ингибируют образование нальмитатСаакгивируемой поры
3.4. Функционирование циклоспорин Анечувствительной пальмитатСа2активирусмой поры при различных физиологических условиях.
3.4.1. Сравнение параметров функционирования циклоспорин А нечувствительной пальмитатСа2активируемой поры в митохондриях печени и сердца крыс
3.4.2. Функционирование пальм итатСа2активируемой поры в зависимости от возраста животного
3.4.3. Функционирование пальмитатСа активируемой поры в
митохондриях печени крыс с различной устойчивостью к гипоксии.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Так, показано, что открытие этой поры в митохондриях может иметь непосредственное отношение к механизму пальмитатиндуцированного аиоитоза v . Предполагается также, что Са2тактивируемая пора может функционировать и при физиологических условиях, когда необходим быстрый выброс Са2 из митохондрий. В этом случае функционирование короткоживущей поры может приводить к колебанию ионных потоков через внутреннюю митохондриальную мембрану, которые наблюдают при добавлении к клеткам и суспензии митохондрий ионов Са2 или v , vi , . Следует подчеркнуть, что концентрация свободной ПК, необходимая для образования ЦсАнечувствитслыюй поры в митохондриальных мембранах, близка к таковой при физиологических условиях , iv , . Более того, уровень пальмитата в митохондриях может увеличиваться при изменении физиологического состояния организма и при некоторых патологиях, в частности при ишемическом повреждении тканей V . Это позволило предположить, что образование пальмитатСа2активируемой поры в митохондриях может усиливаться при изменении физиологических условий, а также при патологиях. Целью настоящей работы является изучение свойств митохондриальной
пальмитатСа активируемой циклоспорин нечувствительной поры и выяснение ее возможной физиологической значимости. Исследовать свойства пальмитатСа2активируемой поры, а именно влияние на процесс образования поры в мембране липидов холестерина и кардиолипина, а также модификации БНгрупп митохондриальных белков. Изучить возможность рециклизации ионов Са2 в митохондриях при образовании пальмитатСа7активируемой поры как в присутствии добавленной пальмитиновой кислоты, так при накоплении эндогенных жирных кислот в результате активации фосфолипазы А2. Определить возможность выхода из митохондрий апоптозидуцирующего фактора ЛИФ в условиях образования пальмитатСа2активируемой поры. Определить влияние ненасыщенных жирных кислот, предупреждающих вызываемый пальмитатом апоптоз в культуре клеток, на образование пальмитатСа2активируемой поры в митохондриях и липосомах. Исследовать параметры функционирования митохондриальной
пальмигатСа активируемой норы в зависимости от типа ткани, возраста животного, а также его устойчивости к условиям гипоксии. Научная новизна работы. В работе впервые показано, что формирование в мембране пальмитатСа2 активируемой поры усиливается в присутствии кардиолипина, а кардиолипинсвязывающий агент, ЮЛнонил акридиновый оранжевый, ингибирует открытие поры в митохондриях, не оказывая при этом существенного влияния на параметры дыхания и поглощение Са2 органеллами. Впервые установлено, что холестерин, встроенный в мембраны липосом и митохондрий, облегчает образование в них пальмитатСа7индуцируемой поры, в то время как модификация 8Ыгрупп митохондриальных белков дитиотреитолом и тимсросалом не влияет на ее открытие. Са . Рсциклизация ионов Са при открытии таких пор может происходить как в условиях добавленной жирной кислоты, гак и при ес вероятном образовании в случае активации фосфолипазы А2. Впервые показано, что в результате открытия поры происходит выход из митохондрий апоптозиндуцирующего фактора ЛИФ, что может быть индикатором участия пальмитатактивируемой поры в механизме каспазнсзависимой гибели клетки. ЦсАнечувствительному пальмитатСа индуцируемому набуханию, вызванному образованием поры, однако по сравнению с митохондриями печени, это набухание имеет мепыиую амплитуду и скорость. Научнопрактическое значение работы. Полученные данные расширяют и углубляют представления о механизмах функционирования митохондрий в норме и при патологиях, связанных с нарушением кальциевого гомеостаза клетки и накоплением свободных жирных кислот. Результаты диссертации могут быть использованы в фундаментальных исследованиях в области биоэнергетики, а также в дальнейшем найти применение в медицине при разработке фармакологических препаратов, так как в настоящее время показано, что повышение уровня насыщенных жирных кислот, в первую очередь пальмитиновой, и Са зависимая митохондриальная пора вовлечены в индукцию ряда патофизиологических явлений, таких как апоптоз, ишемия, нейродегенеративные заболевания, диабет и другие.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.206, запросов: 145