Изучение структурно-функциональных закономерностей в парамагнитных металлобелках методом ЯМР

Изучение структурно-функциональных закономерностей в парамагнитных металлобелках методом ЯМР

Автор: Дикий, Александр Игоревич

Количество страниц: 53 с. ил. 20х15 см

Артикул: 2800225

Автор: Дикий, Александр Игоревич

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2000

Место защиты: Москва

Стоимость: 250 руб.



Наличие многомерных спектров существенно облегчает анализ н интерпретацию спектральных данных. Изотопное . ИчТ. ЯМР импутъесы ПОЗВОЛИЛО увеличить пределы молекулярного веса белков. ЯМР. Да до ьДа. Кроме того, наличие обогащенных белков лозн. Приведенные выше основные положения позволяют отнести ЯМР спектроскопию к важнейшим инструментам современной структурной биохимии. Как упоминалось выше, методы ЯМР предоставляют уникальную возможность получения структур макромолекул в условиях близких к физиологическим. Большое количество белков содержит в своем активном центре ионы металла. Во многих случаях парамагнитное состояние данного иона является биологически важным. В то время как процедура получения трехмерных структур для диамагнитных белков хорошо разработана и находит широкое применение, методы получения трехмерных структур парамагнитных металлобелков, содержащих в активном центре ионы металлов с неспаренными электронами, находятся в стадии интенсивного развития. На сегодняшний день подавляющее большинство структур, полученных с помощью ЯМР, и зарегистрированных в РЭВ банке, представляют собой структуры диамагнитных белков. Причиной этому являются сложности в детектировании как самих ЯМР сигналов, соответствующих ядрам, расположенным в непосредственной близости к ионам металла, так и их скалярных и диполярных взаимодействий с другими ядрами. Данные сложности обусловлены наличием в молекуле неспаренных электронов. Взаимодействие последних с ядерными спинами приводит как к значительному изменению химического сдвига данного ядра, так и к увеличению скоростей релаксации ядра как спинматричного, Ть так и спинспинового, Тг. Увеличение сиикматричной скорости релаксации усложняет обнаружение диполярных взаимодействий между ядрами, что затрудняет получение структурных данных. Увеличение спинспиновой скорости релаксации приводит к уширению ЯМР сигналов, таким образом препятствуя их детектированию, что в свою очередь, также ведет к потере структурной информации. Приведем пример изменения характеристик сигналов ЯМР ионом парамагнитного металла. В парамагнитной молекуле цитохрома с, содержащего в своем активном центре низкоспиновый ион Ре3 2, время релаксации Т протонов порфиринового кольца и близлежащих аминокислот варьируются от мс до 0 мс. Ширина сигналов, V, обратно пропорциональная Тг, от до 0 Гц. Химический сдвиг, 5, от до м. Т несколько сотен миллисекунд V от 2 до Гц 5 от до 0 м. Следовательно, наличие неспаренных электронов значительно затрудняет получение структурной информации об активном центре парамагнитных белков методами ЯМР. С другой стороны, присутствие в молекуле парамагнитной метки приводит к тому, что ядра, находящиеся в непосредственной близости от парамагнитного центра и взаимодействующие с ним. ЯМР свойства 6, Т и Тг, значительно отличающиеся от соответствующих характеристик ядер, не чувствующих влияние парамагнетизма. Это позволяет из всего ПМР спектра, содержащего несколько сотен тысяч сигналов, выделить лишь несколько десятков сигналов и селективно проводить изучение активных центров парамагнитных белков, извлекая важную информаиию относительно структуры, электронных, . Вышесказанное подтверждает, что разработка методологии, приемлемой для структурного и функционального изучения парамагнитных белков с помощью ЯМР спектроскопии, является чрезвычайно актуальной задачей. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРНО ГИКА РАБОТЫ 2. Целью работы является разработка, усовершенствование и оптимизация методологических аспектов применения ядерного магнитного резонанса для изучения структурных, электронных и функциональных характеристик парамагнитных металлобелков и ферментов, вовлеченных в различные биологические процессы. Работа условно может быть разделена на лва взаимосвязанных направления. Первое структурные исследования, направленные на получение полных трехмерных структур изучаемых белков в растворе. Второе направление исследование структурнофункциональных зависимостей в исследуемых классах белков, изучение с помощью ЯМР активных центров белков. Ц7 . Номера, указанные в квадратных скобках, соответствуют номерам публикаций.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.208, запросов: 145