Изучение белков и надмолекулярных комплексов методом дифференциальной сканирующей калориметрией

Изучение белков и надмолекулярных комплексов методом дифференциальной сканирующей калориметрией

Автор: Орлов, Виктор Николаевич

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2000

Место защиты: Москва

Количество страниц: 116 с. ил.

Артикул: 262407

Автор: Орлов, Виктор Николаевич

Стоимость: 250 руб.

Изучение белков и надмолекулярных комплексов методом дифференциальной сканирующей калориметрией  Изучение белков и надмолекулярных комплексов методом дифференциальной сканирующей калориметрией 



Разрушить нативную структуру можно изменением целого ряда параметров, таких как температура, давление, , концентрация денатурантов и т. Ясно, что именно варьирование температу ры предпочтительнее остальных денатурирующих воздействий, т. Функциональная зависимость этих двух сопряженных параметров содержит в себе всю термодинамическую информацию о макроскопических состояниях системы и позволяет проследить процесс разрушения нативной структуры белка или обратный ему процесс формирования данной структуры. Температурная функция энтальпии может быть определена путем прямых измерений тепловой энергии, поглощаемой при прогреве объекта. Это осуществляется с помощью техники сканирующей микрокалориметрии, созданной специально для этих целей. К с кинетическим анализом данных. Зфосфатдегидрогеназы из i i и нефосфорилирующей глицеральдегидЗфосфатдегидрогеназы из . ПЛФ и различных специфических лигандов как активаторов, так и ингибиторов, на характер тепловой денатурации гликогенфосфорилазы из скелетных мышц кролика. АТРазной реакции миозина. ГЛАВА 1. Внутримолекулярные процессы в белках могут быть исследованы лишь в достаточно разбавленных растворах, в которых взаимодействия между макромолекулами весьма малы. Понятно, что в таких растворах и тепловые эффекты, подлежащие измерению, также малы, особенно на фоне поглощения тепла растворителем. Поэтому применить калориметрию для исследования белков оказалось непросто. Первые сверхчувствительные калориметры специально для изучения подобных объектов были созданы в середине шестидесятых годов. Их чувствительность была на три порядка выше, чем у калориметров, существовавших в то время . Это было достигнуто благодаря совместному применению дифференциальной схемы измерений, непрерывному прогреву, компенсации мощности нагрева и полной адиабагизации ячеек. Наиболее важным шагом для увеличения чувствительности стало уменьшение калоримегрических ячеек, что позволило снять проблему температу рных градиентов в ячейках при непрерывном нагреве и исключить необходимость механического перемешивания. Следующим важным шагом стало применение неизвлекаемых ячеек с фиксированным объемом, что позволило повысить точность и воспроизводимость их заполнения, а следовательно, и получаемых результатов. Это позволило впервые определять абсолютные значения избыточной теплоемкости белков и нуклеиновых кислот в разбавленных растворах в широком диапазоне температур 7. Калориметры с неизвлекаемым калориметрическим блоком оказались компактны и технологичны, что позволило наладить их серийное производство. Первый серийный сканирующий микрокалориметр назывался ДАСМ1М. Следующим достижением стало применение капиллярных калориметрических ячеек. Это позволило, вопервых, снизить температу рный градиент внутри ячеек и устранить конвективные потоки в образце. Вовторых, стало возможным существенно увеличить избыточное давление, подводимое к ячейкам, что расширило температурный интервал измерений. Втретьих, упростилась процедура очистки ячеек и их заполнения, что снизило ошибку измерения. И, наконец, капиллярная конструкция позволила снизить влияние градиента вещества в ячейках в случае агрегации денатурированного образца. Представителем сканирующих калориметров с капиллярными платиновыми ячейками являегся ДАСМ4. Материалом для ячеек обычно служит платина. Однако платина является поглотителем водорода и катализатором многих реакций, что может приводить к нежелательным эффектам на поверхности ячейки и снижению воспроизводимости. Поэтому некоторые модели калориметров имеют ячейки не из платины, а из золота, тантала или стекла. Однако все модели прецизионных калориметров в настоящее время построены на одинаковых принципах они имеют неизвлекаемый калориметрический блок с капиллярными ячейками, непрерывный прогрев, один или несколько адиабатизирующих экранов и дифференциальную схему измерения. На рис. Для создания таких условий камеры помещены в оболочку, которая прогревается вместе с камерами, что исключает теплообмен камер с окружающей средой.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.213, запросов: 145