Дезамидирование и протеолиз запасного белка пшеницы при прорастании

Дезамидирование и протеолиз запасного белка пшеницы при прорастании

Автор: Белтей, Наталья Константиновна

Автор: Белтей, Наталья Константиновна

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 1985

Место защиты: Кишинев

Количество страниц: 142 c. ил

Артикул: 3429593

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Запасные белки зерна пшеницы и их изменения при прорастании
2.1.1. Запасные белки пшеницы
2.1.1.1. Глиадин .
2.1.1.2. Глютенин .
2.1.1.3. Белковый комплекс клейковины .
2.2. Изменения клейковины при прорастании
2.3. Дезамидирование запасных белков при прорастании
2.4. Протеолитические ферменты в зерне злаков
2.4.1. Протеолитические ферменты в покоящемся зерне.
2.4.2. Протеолитические ферменты в прорастающем зерне.
2.4.3. Очистка протеаз злаков.
2.4.4. Экзопептидазы.
2.4.4.1. Карбоксипептидазы
2.4.4.2. Амино и дипептидазы .
2.5. Распад запасных белков двудольных растений при прорастании.
2.6. Сходство раопада запасных белков в семенах двудольных и злаков.
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Материалы
3.1.1. Растительный материал .
3.1.2. Субстраты
3.1.3. Хроматографические материалы
3.2. Методы исследования
3.2.1. Определение протеолитической активности
3.2.2. Гидролиз белков клейковины .
3.2.3. Определение амидного азота .
3.2.4. Определение белка .
3.2.5. Электрофорез .
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
4.1. Протеиназа А прорастающего зерна пшеницы .
4.1.1. Исследование возможностей очистки лротеиназы А
4.1.2. Очистка протеиназы А .
4.1.3. Некоторые свойства протеиназы А
4.1.3.1. Оптимум активности
4.1.3.2. Молекулярная масса .
4.1.3.3. Действие некоторых эффекторов
4.1.4. Изменение активности протеиназы А при прорастании зерна пшеницы
4.1.5. Гидролиз клейковины пшеницы протеиназой А
4.1.6. Итоги исследования протеиназы А пшеницы
4.2. Дезамидирование белков клейковины в прорастающем
зерне пшеницы.
4.2.1. Дезамидирование запасных белков пшеницы .
4.2.2. Дезамидирование белков i vi ферментными препаратами из прорастающих семян пшеницы
4.2.3. О существовании фермента, дезамидирующего белки.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Несмотря на то, что кошоненты глиадина несколько отличаются между собой по аминокислотному составу, для них всех характерно высокое содержание остатков глутаминовой кислоты свыше и пролина . Дикарбоновые кислоты в глиадиновых белках почти полностью амидированы. Содержание цистина составляет 2,5, метионина 1 в СО глиадинах он отсутствует, содержание лизина крайне низко 0,50,7. Методом пептидных карт было показано наличие у компонентов А. Исследование Лглиадина , 3 свидетельствует о наличии в нем компонентов с высоким содержанием цистина. Методами ионообменной хроматографии и гельфильтрации были выделены А. 2 и Дрглиадины. Содержание цистина в А глиадине составило 6,4, или 9,5 ,5 5 связей на молекулу, а А и глиадине 2,9 и 2,5 соответственно. Высокое содержание дисульфидных связей обуславливает компактность и прочность молекулы. Некоторые авторы предполагают, что кошоненты сС глиадина с необычно высоким содержанием цистина ответственны за высокое качество клейковины 3. Из А глиадина некоторых сортов пшеницы был выделен так называемый Аглиадин, который обладает высокой способностью к агрегации при повышении и увеличении ионной силы раствора , 8, 7. Вследствие этого третичная структура молекул со глиадина неустойчива и может приобретать развернутую конфигурацию, способствующую межмолекулярным взаимодействиям за счет водородных и гидрофобных связей. Шарбонье обнаружил в составе СО глиадина 8 различных компонентов, которые были разделены им на три группы. Это разделение было проведено на основе отличий по аминокислотному составу и молекулярной массе. Компоненты I группы обладают молекулярной массой по данным язгельфильтрации 0 и содержат глутаминовой кислоты и глутамина, около пролина и 9 фенилаланина. Компоненты П группы имеют молекулярную массу около 0. Они содержат глутаминовой кислоты и глутамина, пролина и фенилаланина. И, наконец, молекулярная масса компонентов Ш группы оказалась равной 0. Содержание глутаминовой кислоты и фенилаланина в ней несколько ниже, чем во Пой группе, и составляет и 8,5 соответственно. Низкая электрофоретическая подвижность соглиадинов может быть объяснена не только их высокой молекулярной массой, но также и слабым зарядом молекул. Это связано с тем, что в них мало свободных основных и карбоксильных групп. Результаты определения молекулярной массы л глиадинов, полученные разными методами, часто не совпадают. В отличие от результатов, полученных Шарбонье , Ейтц и Волл при помощи метода пээлектрофореза нашли, что молекулярная масса двух главных фракций со глиадина равна соответственно 0 и 0. Методом равновесного ультрацентрифугирования была определена молекулярная масса этих фракций, равная 0 и 0 . ББэлектрофореза дает завышенные результаты изза особенностей состава и структуры их молекул. Кроме А , уЗ, у и аглиадинов в препаратах суммарного глиадина содержится около 8 белка, называемого высокомолекулярным глиадином, или низкомолекулярным глютенином с молекулярной массой от до . Восстановление дисульфидных связей меркаптэтанолом ведет к распаду молекулы на полипептиды с молекулярной массой 0 и 0 , сходной с молекулярной массой йС глиадинов. Кроме того, препараты глиадина содержат 5 низкомолекулярных одноцепочных белков, молекулярная масса которых равна 0. Они обладают высокой электрофоретической подвижностью, характерной для альбуминов и глобулинов. Определение молекулярного веса глиадина до и после расщепления дисулъфидных связей показало, что большая часть молекул глиадина состоит из одной полипептидной цепи с внутримолекулярными дисульфидными связями , 6, 2. Глютенин, относящийся к классу глютелинов зерновки злаков, является второй фракцией клейковинного белка. Глютениновый комплекс это сложное и неоднородное образование, представляющее собой высокоагрегированный белок, молекулярная масса которого зависит от способа выделения. В кислой среде молекулярная масса глютенинового комплекса составляет свыше 2 млн.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.197, запросов: 145