Внеклеточные лектины Lentinus edodes: характеристика, свойства и предполагаемые функции

Внеклеточные лектины Lentinus edodes: характеристика, свойства и предполагаемые функции

Автор: Цивилева, Ольга Михайловна

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2008

Место защиты: Саратов

Количество страниц: 358 с. ил.

Артикул: 4057293

Автор: Цивилева, Ольга Михайловна

Стоимость: 250 руб.

ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. СВОЙСТВА И ФУНКЦИИ ЛЕКТИНОВ ГРИБОВ
1.1.1. Общее понятие о лектинах.
1.1.2. Предполагаемая роль лектинов грибов
1.1.3. Биологические свойства грибных лектинов
1.1.4. Применение грибных лектинов
1.2. МОРФОЛОГОКУЛЬТУРАЛЬНЫЕ И ФИЗИОЛОГОБИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ I . I
I .
1.2.1. Краткая характеристика i
1.2.2. i гриб белой гнили.
1.2.3. Питательные свойства и медицинское значение i
1.3. ЗНАЧЕНИЕ ЭКЗОГЕННЫХ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРИЫХ СОЕДИНЕНИЙ В ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ КУЛЬТУР
1.3.1. Соединения селена в процессах жизнедеятельности биотехнологически значимых грибных культур.
1.3.1.1. Селен составляющая часть минерального
питания грибов.
1.3.1.2. Химия селена в живой клетке
1.3.1.3. Влияние искусственных добавок селенсодержащих веществ на развитие грибных культур.
1.3.2. Соединения меди в биохимии микроорганизмов.
1.3.3. Фитогормон риидолилЗуксусиая кислота в искусственной культуре базидиомицетов
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. ОБЪЕК ТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, УСЛОВИЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.2.1. Получение чистой мицелиальной культуры
и плодовых тел .
2.2.2. Пробоотбор грибных изолятов с плотных и жидких сред
2.2.3. Определение ростовых характеристик грибной культуры
2.2.4.0пределение гемагглютинирующей активности.
2.2.5. Установление зависимости активности лектинов
от условий культивирования
2.2.6. Определение углеводной специфичности агглютининов
2.2.7. Определение молекулярной массы белков
2.2.8. Анализ аминокислотного состава.
2.2.9. Хроматографический анализ углеводов
2.2 Дериватизация углеводных фракций
2.2 Анализ жирнокислотного состава
2.2 Получение антител к лектинам
2.2 Иммуноферментный анализ.
2.2 Определение индольных и фенольных
соединений.
2.2 Рентгенофазовый анализ
2.2 Спектральный анализ ЯМР Н
2.2 ИК спектральный анализ
2.2 Расчетные методы квантовой химии и .
2.2 Статистическая обработка экспериментальных данных.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. ОБНАРУЖЕНИЕ, ВЫДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКА, ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧНОСТИ ГЕМАГГЛ ЮТИНИЮВ I
3.1.1. Обнаружение внеклеточных лектинов,.
3.1.2. Выделение и очистка, определение углеводной специфичности лектинов
3.2. ЗАВИСИМОСТЬ ЛЕКТИНОВОЙ АКТИВНОСТИ ОТ УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ .
3.2.1. Влияние температуры, дозы посевного мицелия,
возраста культуры на лектиновую активность, .
3.2.2. Активность внеклеточных лектинов . в зависимости
от источников углерода и азота
3.2.3. Эффект некоторых низкомолекулярных компонентов среды эксперимент и кваитовохимическое рассмотрение
3.2.3.1. Катионы двухвалентных металлов.
3.2.3.2. Катионы металлов триады железа.
3.2.3.3. Селен в органической форме
3.2.4. Воздействие неблагоприятных факторов на лектиновую активность .
3.3. ФИЗИКОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛЕКТИНОВ I
3.3.1. Внеклеточный гликопротеин . лектин 1 .
3.3.2. Внеклеточный протеогликан . лектин
3.4. ЛЕКТИНЫ ШИИТАКЕ В ПРОЦЕССАХ МОРФОГЕНЕЗА
3.4.1. Лектиновая активность . на разных стадиях .
формирования плодовых тел.
3.4.2. Формирование пигментированной мицелиальной пленки
в глубинной культуре шиитаке
в зависимости от активности внеклеточных лектинов
3.4.3. Взаимосвязь углеводной специфичности лектинов и углеводного состава мицелия,
на разных стадиях морфогенеза
3.4.4. Изменение жирнокислотного состава общих липидов
и лектиновой активности . в процессе морфогенеза
3.5. ЛЕКТИНЫ ШИИТАКЕ ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С ЭКЗОГЕННЫМИ СОЕДИНЕНИЯМИ
3.5.1. Взаимодействие лектинов с органическими
ссленсодержащими веществами.
3.5.1.1. Влияние селенсодержащих соединений
на активность внеклеточных лектинов . .
3.5.1.2. Изменение характеристик взаимодействия лектинов с селенорганическими соединениями в зависимости
от стадии очистки препарата лектина.
3.5.1.3. Изменение характеристик взаимодействия лектинов с селенорганическими соединениями в зависимости
от концентрации селенсодержащих соединений .
3.5.1.4. Квантовохимические и свойства селенсодержащих соединений ряда
1,5ди4Кфенил3селенпентандионов1,5
3.5.1.5. Сравнительный анализ реакционной способности цистеина и метионина некоторые теоретические предпосылки замещения атома серы на селен.
3.5.2. Взаимодействие лектинов с катионами меди II
3.5.3. Взаимодействие экзолектинов шиитаке
с фитогормоном ИУК
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА
ПРИЛОЖЕНИЕ
Определения, обозначения и сокращения
АОЗ антиоксидантная защита
АФК активные формы кислорода
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
ГА гемагглютинация
ГА активность гемагглютинирующая активность
ДАФС 1,5дифенил3селенпентандион1,
ЖК жирная кислота, жирнокислотный
ИУК ЗиндолилЗуксусная кислота
ИФА иммуноферментный анализ
КЖ культуральная жидкость
МП коричневая мицелиальная пленка
РК ростовой коэффициент
РКдлфс ростовой коэффициент в присутствии ДАФС как компонента питательной среды Т титр
ТГ А ти гр гемагглютинации
ТГАддфс титр гемагглютинации в присутствии ДАФС как компонента питательной среды
титр гемагглютинации в присутствии добавок к жидкой среде
аланин
Ага арабиноза
аспарагин
аспарагиновая кислота
СОХ циклооксигеназа
цистеин
фруктоза
галактоза
глюкоза
i глутамин
глутаминовая кислота глицин глутатион
окисленная форма глутатиона I интерлейкин, где 1, 2, 4, 6, , Не изолейцин 1 интерферон
липид А моносахаридной природы из i
X липид X
лактоза
лейцин
липополисахарид
М2 двухзарядный катион металла
мальтоза
манноза
МапОН маннит
метионин
марганецпероксидаза
МР2 теория возмущений Меллера Плессс второго порядка электрофорез в полиакриламидном геле фосфатносолевой буфер фенилаланин
количественные соотношения структурасвойство iiv ivi ii
рамноза
ограниченный метод Харгри Фока серин
додецилсульфат натрия сахароза треонин
фактор некроза опухоли
триптофан Туг тирозин
неограниченный метод Хартри Фока V валин
3, валентнорасщепленный атомный базис, включающий поляризационные и рфункции
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В работе , 1 лекгины разделены на две группы в соответствии с типом реакции с углеводами экзолектины и эндолектины. Реакционная способность экзолектинов проявляется в отношении определенного моносахарида, который, следовательно, характеризуется сильным ингибирующим эффектом даже при низкой концентрации. Если углевод узнается только в составе гликоконыогата, где он локализован на конце цепи, этот лектин является облигатным экзолектином если положение углевода в цепи безразлично для узнавания, лектин факультативный экзолектин. Эндолектины реагируют с определенными углеводными последовательностями, в которых звенья равноценны в данном отношении термин эндолекгин не совсем удачен, поскольку он используется также для обозначения животных мембранных лектинов , . Любое заметное ингибирование их агглютинирующих свойств требует олигосахарида с довольно сложной структурой, близкой или идентичной структуре на клеточной мембране. Если узнаваемая последовательность гомологична, лектин называется гомотипическим если нет гетеротипическим. Так можно обнаружить и комплексную специфичность для лектинов, не ингибируемых ни одним из простых сахаров, благодаря присутствию объемных гликоцспсй и различных типов связей между мономерами. Если гликопротеины сиалилированы, десиалилирование обычно усиливает их ингибирующую способность путем демаскирования активных сайтов. Однако известные к настоящему времени специфичности трудно осмысленно сравнивать изза значительного несовпадения условий проведения экспериментов. Кроме агглютинации, связывание лектина на мембранном рецепторе может запускать некоторые специфические клеточные реакции или иметь цитотоксичсский эффект. Кроме возможной агглютинирующей активности по отношению к лимфоцитам, небольшое число лектинов из семян покрытосеменных может индуцировать их конверсию в лимфобластные формы, иногда с митотической индукцией. Эта активность, открытая при исследовании ФГА бобов и найденная в других растениях, в том числе других бобовых, убедительно продемонстрирована лишь для немногих грибов. Лектин из плодового тела i проявляет митогенную активность к лимфоцитам . Позже i было показано, что лектин из характеризуется митогенной активностью относительно человеческих Тлимфоцитов с секрецией интерлейкинов моноядерными клетками в культуре. Лектин ААА из i i обладает митогенной активностью на Тлимфоциты мыши 1 спленоциты и кортизонустойчивые тимоциты, будучи одним из немногочисленных мигогенных лектинов с фукозной специфичностью . РНАА, выделенный из i i, и из i i неактивен могут стимулировать продукцию инсулина панкреатическими клетками крысы и увеличивать потребление глюкозы адипоцитами , , . Ингибирующее действие на рост i vi опухолевых клеток наблюдали с определенными грибными лектинами, в том числе лектином из Vvi vv, обладающим умеренным эффектом в отношении саркомы0 i , , а также лектином из i i, который обратимо ингибирует пролиферацию различных линий злокачественных эпителиальных клеток, не оказывая специфического токсического эффекта , . Кроме того, обнаружила, что лектиновьте экстракты ii i оказывают агглютинирующее действие на клетки саркомы Эрлиха. Некоторые лектины, такие как i i, имеют селективное токсическое действие на определенные модифицированные линии клеток . Использование грибных лектинов традиционно для лектинов вообще. Углеводная специфичность грибных лектинов делает их полезными при биохимическом исследовании гликоконъюгатов мембраны и клеточной стенки. Характеристика гликоконъюгатов, помимо фундаментального значения, может широко использоваться в таксономии, в частности, одноклеточных организмов, как животных, так и растительных. Лектины могут также применяться для исследования глико конъюгатов поверхности в ходе физиологических или патологических процессов, таких как эмбриогенез и образование раковых опухолей, для классификации клеток, для выделения мембранных гликоконъюгатов аффинной хроматофафией. Вызывающие агглютинацию экстракты из различных грибов использованы для таксономических исследований простейших родов iii, iii, ii и v .

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.268, запросов: 145