Биохимические изменения в мембранах млекопитающих при зимней спячке и гипотермии

Биохимические изменения в мембранах млекопитающих при зимней спячке и гипотермии

Автор: Кличханов, Нисред Кадирович

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2005

Место защиты: Махачкала

Количество страниц: 254 с. ил.

Артикул: 2901662

Автор: Кличханов, Нисред Кадирович

Стоимость: 250 руб.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Метаболическая реакция тканей теплокровных животных на снижение температуры тела и е химическая коррекция.
1.2. Мембранные механизмы адаптации при зимней спячке.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Обоснование выбора объекта исследования
2.2. Постановка эксперимента
2.2.1. Искусственное снижение температуры тела млекопитающих
2.2.2. Условия гибернации.
2.2.3. Методы инъекции животным.
2.3. Методы исследования
2.3.1. Препаративные методы исследования
2.3.1.1. Приготовление гомогенатов мозга.
2.3.1.2. Выделение из коры головного мозга синаптосом и их плазматических мембран.
2.3.1.3. Получение плазмы, сыворотки крови, гемолизатов и эритроцитов
2.3.1.4. Выделение мембран эритроцитов.
2.3.1.5. Определение величины гематокрита и подсчт эритроцитов
2.3.2. Биохимические методы исследования
2.3.2.1. Определение активности Ыа, КАТФазы.
2.3.2.2. Определение активности ацетилхолинэстеразы
2.3.2.3. Определение содержания малонового диальдегида.
2.3.2.4. Определение интенсивности перекисного окисления липидов.
2.3.2.5. Определение содержания первичных продуктов ПОЛ
2.3.2.6. Определение окислительной модификации белков
2.3.2.7. Количественное определение БНгрупп в белках и низкомолскулярных тиолах
2.3.2.8. Определение содержания дисульфидных связей в белках и низкомолекулярных тиоловых соединениях
2.З.2.9. Определение антиокислительной активности гидрофильных
компонентов.
2.3.2 Определение общей антиокислительной активности.
2.3.2 Определение активности супероксиддисмутазы.
2.3.2 Определение активности каталазы
2.3.2 Исследование кинетики кислотного гемолиза
2.3.2 Определение перекисной резистентности эритроцитов
2.3.2 Анализ интенсивности внутрисосудистого гемолиза
2.3.2 Определение содержания холестерина, триглицеридов, белка, аль
бумина, мочевины, кальция и железа
2.3.2 Количественное определение неэстерифицированных жирных
кислот
Ч 2.3.2 Определение содержания среднемолекулярных пептидов.
2.3.2 Определение содержания ионов натрия и калия в плазме крови и
эритроцитах.
2.3.3. Биофизические методы исследования.
2.3.3.1. Определение поверхностного заряда мембран эритроцитов
2.3.3.2. Определение структурных параметров мембран эритроцитов
2.4. Статистический анализ данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Метаболические изменения в крови и головном мозге сусликов
при зимней спячке и искусственной гипотермии
3.1.1. Влияние зимней спячки и искусственной гипотермии на процессы перекисного окисления липидов и активность компонентов антиоксидантной защиты крови и коры головного мозга сусликов.
3.1.1.1. Интенсивность перекисного окисления липидов и активность компонентов антиоксидантной защиты крови сусликов в динамике гибернации и искусственной гипотермии
3.1.1.2. Интенсивность перекисного окисления липидов коры головного мозга сусликов в динамике гибернации и искусственной гипо
термин.
3.1.2. Интенсивность окислительной модификации белков и содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови сусликов в динамике зимней спячки
3.1.3. Интенсивность кислотного и внутрисосудистого гемолиза эритроцитов сусликов в динамике зимней спячки и при искусственной гипотермии.
3.1.4. Тиолдисульфидная редокссистема мембран эритроцитов и синаптосом сусликов при зимней спячке и искусственной гипотермии
3.1.4.1. Содержание сульфгидрильных групп и дисульфидных связей в белках мембран эритроцитов сусликов при зимней спячке и гипотермии
3.1.4.2. Содержание сульфгидрильных групп и дисульфидных связей в белках мембран синаптосом коры головного мозга сусликов при зимней спячке и гипотермии.
3.1.5. Влияние зимней спячки и искусственной гипотермии на ацетилхолинэстеразу мембран эритроцитов и синаптосом коры головного мозга сусликов.
3.1.5.1. Температурная зависимость активности ацетилхолинэстеразы мембран эритроцитов в динамике зимней спячки.
3.1.5.2. Температурная зависимость активности ацетилхолинэстеразы синаптических мембран коры головного мозга сусликов в динамике зимней спячки и искусственной гипотермии
3.2. Метаболические изменения в крови и коре головного мозга крыс при
гипотермии и введении даларгина
3.2.1 Содержание белковых и липидных компонентов в сыворотке крови
при гипотермии и введении даларгина.
3.2.2. Интенсивность процессов перекисного окисления липидов крови и
коры головного мозга при гипотермии и введении даларгина
3.2.2.1. Влияние гипотермии и введения даларгина на интенсивность процессов перекисного окисления липидов и активность компонентов антиоксидантной защиты крови.
З.2.2.2. Влияние гипотермии и введения даларгина на интенсивность процессов перекисного окисления липидов и активность компонентов антиоксидантной защиты коры головного мозга.
3.2.3. Влияние гипотермии и даларгина на интенсивность окислительной модификации белков и содержание среднсмолскулярных пептидов в плазме крови крыс.
3.2.4. Динамика кислотного и внутрнсосудистого гемолиза эритроцитов крыс при гипотермии и введении даларгина
3.2.5. Тиолдисульфидная редокссистема мембран эритроцитов и синаптосом головного мозга крыс при гипотермии.
3.2.5.1. Содержание сульфгидрильных групп и дисульфидных связей в белках мембран эритроцитов крыс при гипотермии.
3.2.5.2. Содержание сульфгидрильных групп и дисульфидных связей в белках мембран синаптосом коры головного мозга крыс при гипотермии.
3.2.6. Влияние гипотермии на Иа, КАТФазу мембран эритроцитов и синаптосом головного мозга крыс
3.2.6.1. Влияние гипотермии наЫа, КАТФазу мембран эритроцитов крыс.
3.2.6.2. Влияние гипотермии на КАТФазу мембран синаптосом коры головного мозга крыс
3.2.7. Влияние гипотермии на ацетилхолинэстеразу мембран эритроцитов и синаптосом коры головного мозга крыс
3.2.7.1. Температурная зависимость активности ацетилхолинэстеразы мембран эритроцитов крыс при гипотермии
3.2.7.2. Температурная зависимость активности ацетилхолинэстеразы мембран синаптосом коры головного мозга крыс при гипотермии
3.2.8. Влияние гипотермии и введения даларгина на поверхностный заряд и структурнодинамические характеристики мембран эритроцитов крыс
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ЛИТЕРАТУРА
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ АОА антиокислительная активность АНС 1 анилинонафталин8сульфонат АТФ аденозинтрифосфат АТХ ацетилтиохолин АФК активные формы кислорода АХЭ ацетил холи иэстераза 2,4ДНФГ 2,4динитрофенилгидразин Кт константа Михаэлиса
ЛПОНП липопротеины очень низкой плотности ЛПНГ1 липопротеины низкой плотности ЛПВП липопротеины высокой плотности МАО моноаминоксидаза МДА малоновый диальдсгид
НАДН никотинамидадениндинуклеотид восстановленный
НАДФН никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный
НЭЖК неэстерифицированные жирные кислоты
ПОЛ перекисное окисление липидов
Рн неорганический фосфат
СМП среднемолекулярные пептиды
СОД супероксидцисмутаза
ТБК тиобарбитуровая кислота
ТХтиохолин
ТХУ трихлоруксусная кислота
ЦНС центральная нервная система
ЭДТА этилендиаминтетрацетат
ЭПР электронный парамагнитный резонанс
ЯМР ядерный магнитный резонанс
V максимальная скорость
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Позже в этой лаборатории было установлено существенное возрастание содержания МДА, содержание атокоферола и снижение активности супероксиддисмутазы СОД в миокарде и митохондриях миокарда при пролонгированной мин глубокой С гипотермии Утно, Шкестерс и др. Таким образом, нет единого мнения о том, как меняется интенсивность ПОЛ в тканях при глубокой С гипотермии и е пролонгировании. Для выяснения причин снижения интенсивности ПОЛ в печени при глубокой С гипотермии была исследована активность основных антиоксидантных ферментов Шепелев, Костромина, . Оказалось, что в печени крыс, подвергнутых острому охлаждению, существенно возрастала активность глутатионпероксидазы и катапазы, активность глутатионредуктазы увеличивалась в меньшей степени. Активность СОД крови при этом практически не отличалась от показателей у контрольных животных. С этими данными в основном согласуются результаты, полученные при исследовании активности цитохромРопероксидазы, глутатионБтрасферазы, глутатионредуктазы и глутатионпероксидазы Никитченко и др. С за очень короткое время 6 мин. Обращает на себя внимание тот факт, что, несмотря на низкий исходный уровень продуктов ПОЛ в тканях при глубокой гипотермии, в инкубируемых пробах обнаруживается существенное усиление способности к образованию МДА Эмирбеков и др. Это подтверждают исследования Ю. В. Никитченко и сотр. Они обнаружили, что снижение температуры тела крыс до С приводит к интенсификации как спонтанного в 1,9 раза, так и индуци
рованного аскорбатом в 1,3 раза и НАДФН в 2,7 раза ПОЛ в гомогенатах печени. Эти данные свидетельствуют о том, что гипотермия способствует модификации структуры мембран, в результате чего жирные кислоты фосфолипидов становятся доступны прооксидантам. Достаточно большое влияние было уделено исследованию процессов ПОЛ в крови при гипотермии. Т.У. Василькова Василькова, Василькова, Кухта, а, б Василькова и др. С, резко увеличивается в 2,9 раза при дальнейшем снижении температуры тела С и возвращается к исходному уровню при глубокой С гипотермии. При этом содержание МДА в эритроцитах на всех этапах гипотермии оставалось без изменения. Анализ компонентов антиокислительной системы показал, что содержание восстановленного глутатиона в эритроцитах достоверно снижается при гипотермии. Были изучены активность таких ключевых антиоксидантных ферментов, как СОД, каталазы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы, глюкозо6фосфатдегидрогеназы в эритроцитах. С гипотермии. Исследование интенсивности ПОЛ на уровне мембран эритроцитов крыс показало, что при гипотермии содержание диеновых конъюгатов возрастает в среднем на Линчевская, Кондратьева, . При этом увеличивалась также интенсивность накопления МДА в мембранах эритроцитов как при спонтанном , так и при индуцированном ПОЛ. По данным авторов показатели интенсификации ПОЛ в мембранах эритроцитов четко коррелировали с перекисной резистентностью эритроцитов. У животных, подвергнутых воздействию гипотермии, отмечалось значительное почти в 2 раза увеличение гемолиза эритроцитов по сравнению с контролем, что, видимо, отражает изменение липидного состава мембран и их перекисную модификацию. Пероксидация ненасыщенных жирных кислот сопровождается образованием высокотоксических промежуточных соединений, оказывающих разрушительные действия на окружающие ткани. В результате пероксидации липидов образуется группа токсических альдегидов типа 4,5дигидроксидесиналя и 4гидроксинонеаля, которые ингибируют синтез белков, активность многих ферментов, способствуют повышению свертываемости крови, вызывают окислительную деструкцию белков. ПОЛ вместе с окисленными белками изменяет текучесть и проницаемость мембран Меньшикова, Зенков, . В связи с этим были предприняты попытки коррекции процессов ПОЛ при гипотермии путм предварительного введения протекторных веществ. Среди веществ, обладающих высокой адаптационной функцией при действии холода, особо выделяется атокоферол. Биологическая активность атокоферола проявляется во встраивании в биомембраны и в антиоксидантном свойстве, ингибирующем процесс ПОЛ в гидрофобном слое мембраны . I, , .

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.207, запросов: 145