Интерлейкин-1 в молекулярных механизмах нейроиммунных взаимодействий

Интерлейкин-1 в молекулярных механизмах нейроиммунных взаимодействий

Автор: Рыбакина, Елена Георгиевна

Шифр специальности: 03.00.04

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2001

Место защиты: Санкт-Петербург

Количество страниц: 246 с. ил

Артикул: 344863

Автор: Рыбакина, Елена Георгиевна

Стоимость: 250 руб.

Интерлейкин-1 в молекулярных механизмах нейроиммунных взаимодействий  Интерлейкин-1 в молекулярных механизмах нейроиммунных взаимодействий 

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Интерлейкин1 структура, механизмы образования и
сигнальной трансдукции
1.1.1. История развития проблемы и номенклатура
1.1.2. Клеточные источники и стимуляторы образования интерлейкина
1.1.3. Структура молекул семейства интерлейкина
1.1.4. Механизмы внутри и внеклеточного процессинга интерлейкина1 .
1.1.5. Рецепторы интерлейкина1 как одно из звеньев регуляции его
активности
1.1.6. Трансдукция сигнала интерлейкина
1.1.6.1. Классические пути трансдукции сигнала интерлейкина
1.1.6.2. Сфингомиелиновый пугь сигнальной трансдукции интерлейкина1
1.2. Интерлейкин1 как эндогенный регулятор защитных функций
организма и медиатор нейроиммунных взаимодействий.
1.2.1. Биологические эффекты интерлейкина1.
1.2.2. Роль интерлейкина в активации гипоталамогипофизарно
адренокортикальной системы
1.2.3. Интерлейкин1 при стрессе и патологии
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Общие условия работы.
2.2. Экспериментальные животные.
2.3. Модели экспериментального стресса
2.4. Получение макрофагов из перитонеальной полости крыс и мышей и
условия инкубации клеток
2.5. Определение активности лимфоцитактивирующего фактора в
инкубатах перитонсатьных макрофагов
2.6. Выделение лимфоцитов из периферической крови крыс по методу
А. Воуиш
2.7. Постановка реакции бласттрансформации лимфоцитов периферической
крови крыс и тимоцитов мышей.
2.8. Определение величины гуморального иммунного ответа.
2.8.1. Определение общих титров антител и титров в сыворотке крови
2.8.2. Определение антитслообразующих клеток в селезенке
2.9. Определение концентрации интерлейкина1а в крови мышей методами
радиоиммунологического и иммуноферментного анализа
2.9.1. Определение концентрации интерлейкина1 а в плазме крови мышей
радиоиммунологическим методом.
2.9.2. Определение концентрации интерлейкина1а в сыворотке крови мышей
иммуноферментным методом
2 Определение концентрации кортикостерона в крови мышей и крыс.
2 Определение концентрации трииодтиронина и тироксина в сыворотке
крови мышей.
2 Модели экспериментального повышения и понижения уровня
кортикостерона в сыворотке крови мышей
2 Методы оценки иммунопротективного действия препаратов
интерлейкина1 р
2 Определение аффинности связывания препаратов рекомбинантног о
интерлейкина1 5 и Д8 с рецепторами I и II типа к интерлейкину1.
. Клеткимишени для связывания рекомбинантного интерлейкина1р и
. Присоединение метки к рекомбинантному интерлейкину1 р
. Оценка аффинности связывания цитокиновлигандов с рецепторами
2 Методы сравнительного исследования биологической активности
препаратов рекомбинантного интерлейкина1р и Д8ЫО.
2 Определение влияния рекомбинантного интерлейкина1 р на
активность нейтральной сфингомиелиназы в мембранах клеток коры головного мозга мышей.
. Получение мембранной фракции Р2 из коры г оловного мозга мышей и
синаптосом мозга крыс.
. Определение удельной активности нейтральной сфингомиелиназы
. Оценка влияния рекомбинантного интерлейкина1 р и рецепторного антагониста интерлейкина1 на активность нейтральной
сфингомиелиназы.
. Определение комитогенного действия препаратов нейтральной
сфингомиелиназы, сфингомиелина и церамида на пролиферацию тимоцитов мышей.
2 Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Физиологическая роль интерлейкина1 в реализации стресс
индуцированных изменений защитных функций организма.
3.1.1. Исследование продукции и биологического действия интерлейкина1 при стрессорных воздействиях различной длительности и
интенсивности.
3.1.1.1. Клеточномолекулярные механизмы развития стрессорной реакции у
мышей при ротационном и комбинированном воздействиях
3.1.1.2. Клеточномолекулярные механизмы развития стрессиндуцированной
иммуносупрсссин у крыс, вызванной острым охлаждением
3.1.2. Интсрлейкин1 и глюкокортикоидне гормоны, как взаимодействующие звенья в нейроиммунорегуляторной цепи
3.1.3. Иммунопротективные эффекты интерлейкина1 Р при стрессе и введении
гшококортикоидных гормонов в высоких дозах
3.2. Взаимосвязь структуры и функции интерлейкина1. Влияние
модификации структуры интерлейкина1 на аффинность его связывания с рецепторами и проявление биологической активности.
3.2.1. Особенности связывания рекомбинантного интерлейкина1 р, рецепторного антагониста интерлейкина1 и с рецепторами I и II
типа на иммунокомпетентных клетках
3.2.2. Влияние структурных изменений в молекуле интерлейкина1 р на его
физиологическую активность
3.3. Анализ сфингомиелинового пути трансдукции сигнала интерлейкина1 р
в нервных клетках и его роли в механизмах развития стрессорной реакции.
3.3.1. Влияние интерлейкина1 на активность нейтральной сфингомиелиназы
в клетках коры головного мозга мышей и роль рецептора I типа в инициации сфингомиелинового каскада.
3.3.2. Нейтральная сфингомиелиназа, как ключевой энзим сфингомислинового
пути трансдукции сигнала интерлейкина.
3.3.3. Изменение активности нейтральной сфингомиелиназы в мембранах коры головного мозга мышей при ротационном и комбинированном сгрессорных воздействиях
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
АКТ адренокортикотропный гормон
АР1 активирующий белок
АОК антитслообразующис клетки
АТ антитела
белок теплового шока
БСА бычий сывороточный альбумин
ГК гидрокортизон
ГГАКС гипоталамогипофизарноадренокортикальная система
ДАГ диацилглицерол
I иммуноглобулин
I ингибиторные белки ядерного фактора
ИЛ1 интерлейкин
нИЛ1 нативный ИЛ
рИЛ1 рекомбинантный ИЛ
ИЛ1 ра рецепторный антагонист ИЛ
проИЛ1 предшественник ИЛ
ИГИФ интерферонуиндуцирующий фактор
I киназа, ассоциированная с рецептором ИЛ1 типа
киназа
КСМаза кислая сфингомиелиназа
Кон А конканавалин А
КРФ кортикотропинреализующий фактор
Кс кортикостерон
КСФ колониестимулирующий фактор
ГГАКС гипоталамогипофизарноадренокортикальная система
ГКСФ гранулоцитарный КСФ
ГМКСФ гранулоцитарномакрофагальный КСФ
ЛАФ лимфоцигактивирующий фактор
лпс липополисахарид
лэм лейкоцитарный эндогенный медиатор
мпд минимальная пирогенная доза
мпо медиальная преоитическая область переднего гипоталамуса
МАП митогенактивированная протеинкиназа
НСМаза нейтральная сфингомиелиназ
V v i ii
пге2 простагландин
пкс протеинкиназа С
ПКА цАМФзависимая протеинкиназа
РБТЛ реакция бласттрансформации лимфоцитов
сигнальный трансдуктор и активатор транскрипции
СМФ система мононуклеарных фагоцитов
ТРФр трансформирующий ростовый факторр
Т3 трииодтиронин
т4 . тироксин
фактор, ассоциированный с активацией НСМазы
ФИО фактор некроза опухолей
ФРФ фактор роста фибробластов
ФГА фитогемагглютинин
цис центральная нервная система
ЦАПК церамидактивированная протеинкиназа
ЦАПФ церамидактивированная протеинфосфатаза
цАМФ циклический аденозинмонофосфат
Сох 2 циклооксигеназа
ЭБ эритроциты барана
ЭП эндогенный пироген
ВВЕДЕНИЕ
АКТУАЛЬНОСТЬ


После очистки лейкоцитарного пирогена до гомогенного состояния были подтверждены его белковая природа, термолабильность, молекулярная масса оценена в кДа были охарактеризованы 2 вида лейкоцитарного пирогена из моноцитов крови человека с изоэлектричсскими точками и . В этот же период группой авторов, возглавляемых Я. Р. КатрясИгтсИ, был обнаружен и подвергнут всестороннему изучению фактор лейкоцитарного происхождения, вызывающий у крыс и кроликов синтез белков острой фазы воспаления фибриногена, гаптоглобина, церулоплазмина, Среактивного белка, приводящий к снижению уровня железа и цинка, повышению содержания меди в крови и развитию гранулоцитоза Я. Р. КатрзсЬпнсН е а. Для характеристики его свойств авторами был предложен термин лейкоцитарный эндогенный медиатор ЛЭМ, подчеркивающий множественность биологических эффектов этого фактора, индуцирующего острофазовый ответ. Препарат ЛЭМа обладал нирогенностью, неотделимой от него при очистке на последнем этапе фракционирования обе активности фокусировались в одной и той же полосе полиакриламидного геля ИР. КатрвсЬпшк, . Полученные данные позволили заключить, что ЭП и ЛЭМ представлены одной и той же или родственными молекулами, являющимися медиаторами врожденных реакций защиты организма ответа на инфекцию и воспаление. В г. I. вегу е1 а. Первые же попытки сравнительного изучения ЭП и лимфоцитактивирующего фактора ЛАФ, включающие исследование их клеточных источников, кинетики образования и физикохимических характеристик, позволили высказать предположение об их идентичности. Подтверждением этого послужили результаты экспериментов, в которых высокоочищенный моноцитарный пироген человека был использован для замены мышиного ЛАФ в системе антигензависимой Тклеточной пролиферации Ь. З. Козспизсг а1. ЛАФ не только регулировал функции тимоцитов и Тлимфоцитов, но и усиливал пролиферацию Влимфоцитов и стимулировал процессы антителообразования, т. ВАФ. К концу х годов было установлено, что некоторые из свойств этих лимфоцитактивирующих факторов, выделяемых мононуклеарными фагоцитами монокинов обусловлены их способностью вызывать освобождение хелперными Тклетками лимфокина, ранее известного в литературе под названием фактор роста Тклеток, основным отличительным свойством которого является поддержание длительной пролиферации клонов Тлимфоцитов, а также стимуляция пролиферации цитотоксических Тклеток и биосинтез иммунного интерферона К. А. i . Исходя из идентичности физикохимических и биохимических характеристик ЭП, ЛЭМ, ЛАФ, ВАФ и некоторых других медиаторов макрофагального происхождения, а также учитывая функционачъные взаимосвязи между ними и образующимися под их влиянием лимфоцитарными факторами, в г. Международном совещании по лимфокинам в Швейцарии ведущими иммунологами мира было принято решение ввести термин интерлейкин, объединив лимфоцитактивирующие монокины общим названием интерлейкин1, а лимфокины, являющиеся продуктами активированных при участии ИЛ1 лимфоцитов, интсрлсйкин2 . Таким образом, термин интерлейкин был первоначально предложен для обозначения медиаторов монокинов и лимфокинов, вырабатываемых лейкоцитами и проявляющих свою активность при воздействии на эти клетки. Термин закрепился в литературе и в научной практике и в настоящее время объединяет группу из интерлейкинов с последовательно нрисваемыми порядковыми номерами, число которых продолжает увеличиваться , . ИЛ1 дистантные периферические и центральные эффекты. С позиций сегодняшнего дня ИЛ1 рассматривается, как первый из открытых и важнейший для жизнедеятельности организма интерлейкин и, что особенно существенно, как представитель супсрсемсйства цитокинов, которые в соответствии с современной номенклатурой, закрепленной в Настольной книге о цитокинах . Vi, . Это определение было бы неполным без добавления к нему таких неотделимых от понятия цитокин характеристик, как полифункциональность, для обозначения которой обычно используют термин плсйотропность, с одной стороны, и проявление разными цитокинами одних и x же физиологических свойств в международной литературе для этого используют термин с другой С i, ,, , М. С. Ломакин, Н. Г. Арцимович, , а .

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.569, запросов: 145