Каталитические антитела - протеазы

Каталитические антитела - протеазы

Автор: Пономаренко, Наталья Александровна

Шифр специальности: 03.00.03

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2008

Место защиты: Москва

Количество страниц: 295 с. ил.

Артикул: 4256744

Автор: Пономаренко, Наталья Александровна

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. ИСКУССТВЕННЫЕ ФЕРМЕНТЫ.
I. I. Ш ЖГ. Е.РИЯ ФЕРМЕГГОВ .
1.2. ЦЕЛЕНАПРАВЛЕННОЕ ИЗМЕНЕНИЕ.ФЕРМЕНТОВ I
1.3. МЕТОД ФАГОВОГО ДИС ПЛЕЯ КАК ИНСТРУМЕНТ ДЛЯ ЦЕЛЕНАПРАВЛЕННО О
ИЗМЕЕНИЯ ФЕРМЕ 0В.
2. ИСКУССТВЕННЫЕ КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА
2.1. АНТИТЕЛА НА АНАЛОГИ ПЕРЕХОДНЫХ СОСТОЯНИЙ РЕАКЦИИ
2.2. ВВЕДЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТНЫХ ОСТАТКОВ В СВЯЗЫВАЮЩИЙ ЦЕНТР АНТИТЕЛА ПУТЕМ ХИМИЧЕСКОЙ МОДИФИКАЦИИ ИЛИ САЙ ГНА ПРАВ ЛЕННОГО МУТАГЕНЕЗА .
2.3. СОЗДАНИЕ АНТИТЕЛ ДЛЯ КАТАЛИЗА 1 ЕРГЕТИЧР.СКН I .ВЫГОД 1ЫХ РГНРДЦЕИШ. .
2.4 ЛНГИИДИОТИИИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА . .
2.4.1. Антицютилические антитела к рецепторам
2.4.2. Антимдиотчлические вакцины .
2.4.3. Структурные исследования антиидиотипических антител.
2.4.4. Каталитические антиидиотилнчесние антитела
2.5 ПОЛУЧЕНИЕ АЬЗИМОВ ПУТЕМ РЕАКЦИОННОЙ ИММУНИЗАЦИИ.
2.6. АБЗММЫ, СОДЕРЖАЩИЕ КОФАКТОРЫ .
2.7. ГРАНИЦЫ ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ИНДУЦИРОВАННЫХ ДЮЙМОВ
3. ПРИРОДНЫЕ КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛАЬ
3.1. КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА К ВЛЗОДКГИВНОМУ ИНТЕСТИНАЛЬНОМУ ПЕПТИДУ .
3.2. КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АКТ 1ВНЫГ ФРАМЕНТЫ АНТИТЕЛ. .
3.3. КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА К ТИРОГЛОБУЛтУ
3.4. ИРОТГОЛИТИЧГ.СКИЕ АНТИТЕЛА К ФАКТОРУ VII СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ.
3.5. ДНКГИДРОЛШУЮЩИЕ АНТИТЕЛА
3.6. КАТАЛИТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА НЕОБЫЧНОЙСПЕЦИФИЧКХ.ТИ
3.7.РИРОДНЫЕ КАТДЛТТИЧЕСКИЕ АГШПДА КАК ЧАСТЬ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ .
3.8. МЕТОДИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИРОДНЫХ КАТАЛШИЧИСКИХ АНТИТЕЛ I ГОТМ I
3.9. ОКСИДАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ.
4. РАССЕЯННЫЙ СКЛЕРОЗ.
4.1. ОБ ЦА Я X АРА КТЕРИС ТИКА. . .
1.2. ТКЛЕТОЧНЫЙ ОТВЕТ В ПАТОГЕНЕЗЕ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА .
4.3. РОЛЬ В КЛЕТОЧКМ С ЗВЕНА. . .
4.4. РОЛЬ НАТИВНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА. ЗНАЧЕНИЕ Т1 .К.
4.5. КРОССРЕАКТИВНОСТЬ БАКТЕРИАЛЬНЫХ АНТИГЕНОВ КАК ВОЗМОЖН АЯ ПРИЧИНА ВОЗ ИКНОВЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ. .
4.6. ПОДХОДЫ К ДНАИОСШКЕ И ЛЕЧЕИЮ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА.
5.0СН0ВН0Й БЕЛОК МИЕЛИНА. СТРОЕНИЕ, СВОЙСТВА, ФУНКЦИИ.
5.1 . МОЛЕКУЛЯРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ МИЕЛИНА
5.2. X НОВНОЙ ЬЕЛОК МИЕЛИНА.СТРОЕНИЕ, ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВ А .
6. ПОВЕРХЖХЛНЫЙ АНТИГЕН ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА СР
6 I. СОЗРЕВАНИЕ И РОЦЕССИНГ ЕМУ ГЛИКОПРОТЕИНА .
6.2. СГРУКТУРА СР
6 3 ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СР С РЕЦЕПТОРАМИ
6.3.1. Сдр0взаимодействие. .
6.3.2. Взаимодействие схемокиновым рецепторомI
6.4. КОМПЛЕКС С СР4 .
6.5 УКЛОНЕНИЕ ВИРУСА ОТ ИММУННОГО ОТВЕТА
6.6. СИСТЕМЫ ЭКСПРЕССИИ I
6.7. ОГРАНИЧЕННЫЙ ПРОТЕОЛИЗ 0.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСГЬ.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
1. ПОЛУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ МЕТОДОМ РЕАКЦИОННОЙ СЕЛЕКЦИИ
1.1. РЕ.АК1 и ОННАЯ СЕЛЕК1ИЯ АНТИТЕ. I ИЗ С ИНТЕТИЧЕСКОЙ БИБЛИОТЕКИ ГЕНОВ
ИММУ НОГ ЛОБУ ЛИЛОВ ЧЕЛОВЕКА.
1.2. С ТРУКТУРНОФУНК1ИОН А ЛЬНЫЙ АНАЛИ З РЕКОМБИ 1М ГГ1ЫХ ОД ЮЕПОЧЕЧ1ЫХ АНТИТЕЛ. . . .
1.2.1 Структурные особенности одноцепочечных антител. .
1.2.2 Каталитические свойства одноцепочечнихантител.
1.2.3 Определение нуклеофильного остатка, участвующего в ковалентном катализе
1.2.4 Сайтиаправленный мутагенез одна.епочечных антител. i
2. АНТИИДИОТИПИЧЕСКОЕ АНТИТЕЛО С ПРОТЕОЛИТМЧЕСКОЙ ФУНКЦИЕЙ
2.1. ИССЛЕДОВАНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТ ЯВНОСТИ АНТМИДИОТИПИЧЕСКОГО АНТИТЕЛА I . I
2.2. СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИ З ВАРИАБЕЛЬНЫХ ДОМЕНОВ МО ЮКЛОНАЛЬНЫХ АНПТКЛ И 6В8Е.
2.3. ЭКС1РЕССИЯ РЕКОМБИН АНТНОГО АНТИТЕЛА 6В8Е В ВИДЕ ОД 1 ЕПОЧЕЧ ОГО
АНТИТЕЛА.
. ИССЛЕДОВАНИЕ К АТАЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПОЛУЧЕННОГО ОД ЮЦГЛЮЧЕЧНОГО АНТИТЕЛА.
3. КАТАЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ АНТИТЕЛ ПРИ АУТОИММУННЫХ ПАТОЛОГИЯХ
3.1. КАТАЛИТИЧЕСКАЯ АК ТИВНОСТЬ НАТИВНЫХ АНТИТЕЛ У МЫШЕЙ С АУТОИММУННЫМИ
АРУШЕ ИЯ.МН .
. КАТАЛИТИЧЕСКИЕ. Л УГОЛ IГТИТЕЛ А ПРИ РАССЕЯННОМ СКЛЕРОЗЕ.
3.2.1 Определение сайтспецифичности гидролиза основного белка миелина аутоантителами. ПО
3.2.2 Исследование субстратной специфичности ангиОБМ аугоантител на модельных пептидах
4. ПОЛУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ, РАСЩЕПЛЯЮЩИХ ПОВЕРХНОСТНЫЙ ГЛИКОПРОТЕИН ВИЧ1 0.
4.1. ИНДУКЦИЯ ЭПИТОП.СЕЩ1ФИЧЕСКСН О КА ГАЛИГИЧЕСКОГО ОТВЕТА МЕТОДОМ РЕАКЦИОННОЙ ИММУНИЗАЦИИ. .
4.2. ПОЛУЧЕ И КАТАЛИТИЧЕСКИХ АНТ ШЕЛ. СПЕЦИФИЧНЫХ К I. НА ФОНЕ ИНДУЦИРОВАННОГО АУТОИММУННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ
4.2.1 Получение слитных бегкселя иммунижи и юучения свойств антител .
4.2.2 Экспрессия слитных белков в прокариотической системе.
4.2.3 Экспрессия др0 в бакуловирусной системе.
4.2.4 Индукция зксперименгаТьнско аутоиммунного зкфалоититд у мышей.
4.2.5 Каталитические свойства полученных антител.
4.2.6 Установление сайтспецифичности протеолитических антител к др0.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ПАЦИЕНТЫ И ЗДОРОВЫЕ ДОНОРЫ.
ЭКСПЕРИМЕШАЛЬНЫЕ ЖИВОТНЫЕ.
ХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ И СОПУТСТВУЮЩИЕ МАТЕРИАЛЫ.
РАБОТА С НУКЛЕИНОВЫМИ КИСЮТАМИ.
АМПЛИФИКАЦИЯ ФРАГМЕНТОВ ДНК МЕТОДОР1 ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ.
РЕСТРИКЦИЯ.
ЛИГИРОВАНИЕ.
ВЫДЕЛЕНИЕ ПЛАЗМИДНОЙ ДНК. .
ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ДНК В АГАРОЗНОМ ГЕЛЕ.
ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ДНК В ПОЛИАКРИЛАМИДНОМ ГЕЛЕ. .
2 I
ЭЛЕКТРОЭЛЮЦИЯ. .
СЕКВЕНИРОВАНИЕ ПЛАЗМИДНОЙ ДНК.
ВЫДЕЛЕНИЕ МА ТРИЧНОЙ РНК, СИНТЕЗ кДНК И КЛОНИРОВАНИЕ ВАРИАБЕЛЬНЫХ
ФРАГМЕНТОВ АНТИТЕЛ И Е
СОЗДАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ КОНСТРУКЦИЙ ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ
ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫХ АНТИТЕЛ И Е6.
САЙТНАПРАВЛЕННЫЙ МУТАГЕНЕЗ ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫХ АНТИТЕЛ 3 И А. 1. .
ВЫДЕЛЕНИЕ МА ТРИЧНОЙ РНК, СИНТЕЗ хДНК И КЛОНИРОВАНИЕ ВАРИАБЕЛЬНЫХ
ФРАГМЕНТОВ АНТИТЕЛ 6В8Е И 5Н4
СОЗДАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ РЕКОМБИНАНТНОГО
ОДНОЦЕПОЧЕЧНОГО АНТИТЕЛА 6
СОЗДАНИЕ КОНСТРУКЦИЙ ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ 0 В
ПРОКАРИОТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЕ.
СОЗДАНИЕ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ 0 В БАКУЛИРУСН0Й СИСТЕМЕ.
СОЗДАНИЕ КОНСТРУКЦИЙ ЭЛИТОПНОЙ БИБЛИОТЕКИ ОБМ
СОЗДАНИЕ КОНСТРУКЦИИ ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ЕРеГЙЕТ
МЕТОДЫ РАБОТЫ С БАКТЕРИЯМИ II СО
ПОЛУЧЕНИЕ ЭЛЕКТРОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК
ТРАНСФОРМАЦИЯ КЛЕТОК Е СОИ МЕТОДОМ ЭЛЕКТРОПОРАЦИИ.
ПЦР С КОЛОНИЙ.
НОЧНАЯ КУЛЬТУРА
ПРИГОТОВЛЕНИЕ МУЗЕЙНОГО ШТАММА
РАБОТА С ФАГАМИ
ЭКСПРЕССИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ 0 В КЛЕТКАХ Е I.
РАБОТА С БЕЛКАМИ
ДЕНАТУРИРУЮЩИЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ В ПОЛИАКРИЛАМИДНОМ ГЕЛЕ.
ОКРАШИВАНИЕ ПААТ
ИММУНОБЛОПИНГ.
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ .
ТРИПТИЧЕСКИЙ ГИДРОЛИЗ ДЛЯ МАСССПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОГО АНАЛИЗА.
МАССПЕКТРОМЕТРИЯ I
МАСССПЕКТРОМЕТРИЙ I
ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ ОСНОВНОГО БЕЛКА МИЕЛИНА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТЕОЛИЗА ЭПИТОПНОЙ БИБЛИОТЕКИ ОБМ АНТИТЕЛАМИ И МОДЕЛЬНЫМИ
ПРОТЕАЗАМИ.
КИНЕТИКА ГИДРОЛИЗА АНТИТЕЛАМИ И МОДЕЛЬНЫМИ ПРОТЕАЗАМИ. .
АНАЛИЗ ВЗАИМ0ДЕЙСИЯ ИДИОТИПАНШИДИОТИЛ МЕТОДОМ ПОВЕРХНОСТНОГО
ПЛАЗМОННОГО РЕЗОНАНСА
ДЕТЕКЦИЯ ПРО ТЕОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АНТИТЕЛ МЕТОДОМ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЮ
МЕТОДА .
ДЕТЕКЦИЯ ПРОТГОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРА ТА АНТИТЕЛ МЕТОДОМ
ЗИМОГРАММЫ .
АНАЛИЗ ПРОДУКТОВ ГИДРОЛИЗА 0 ПРИ ПОМОЩИ ДСНПААГ И ИММУНОБЛОПИНГА ДЕТЕКЦИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРА ТА АНТИТЕЛ МЕТОДОМ
ЭНЗИМАТИЧЕСКОГО ТЕСТА.
ДЕТЕКЦИЯ ГИДРОЛИЗА РИБОНУКЛЕАЗЫ А АНТИТЕЛОМ 6В8Е.
ИЗМЕРЕНИЕ ЭСТЕРОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ.
КА ТАЛИЗ ГИДРОЛИЗА АМИДНОЙ СВЯЗИ.
ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕЦИФИЧНОСТИ МОНОКЛОНАЛЬНОГО АНТИТЕЛА 8Е
ИНГИБИРОВАНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МОНОКЛОНАЛЬНОГО АНТИТЕЛА 6.
КОНЬЮГИРОВАНИЕ ПЕПТИДОФОСФОНА ТА С БЕЛКОМНОСИТЕЛЕМ.К
ПОЛУЧЕНИЕ БИО ТИНИЛИРОВАННОЮ АНАЛОГА ПЕТТТИДИЛФОСФОНА ТА.
СИНТЕТИЧЕСКИЙ АНТИГЕН. .
АНАЛИЗ АНТИГЕНСПЕЦИФИЧНОСТИ В ПРЕПАРАТАХ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ.
СПЕЦИФИЧЕСКОЕ МЕЧЕНИЕ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНПТТЕЛ БИОТИНИЛИРОВАННЫМ
ПЕППДИЛФОСФОНА ТОМ
РЕАКЦИИ МОДИФИКАЦИИ РЕКОМБИНАТНЫХАНТИТЕЛ ФОСФОНАТОМX
МАСССПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРОДУКТОВ РАСПАДА X0IIII ПО МЕТОДУ
1.
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ПРОЦЕДУРЫ.
ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА АНТИТЕЛ.
ОЧИСТКА РЕКОМБИНАНТНЫХ АНТИТЕЛ V. .
ВЫДЕЛЕНИЕ СЛИТНЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ 6Р0М8Р
ВЫДЕЛЕНИЕ ОБМ СПЕЦИФИЧЕСКИХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ С ИЗ СЫВОРОТОК КРОВИ. 3 ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА РЕКОМБИНАНТНЫХ ФЬЮЖНБЕЛКОВ xi i.
ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА 0М
ОБРАЩЕННОФАЗОВАЯ ХРОТА ТОГРАФИЯ.
ПОЛУЧЕНИЕ I2I I ЬАКУЛОВИРУСНОЙ СИСТЕМЕ ЭКСПРЕССИИ .
ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ КЛОНОВ ВИРУСА V.
АНАЛИТИЧЕСКАЯ ЭКСПРЕССИЯ ГЛИКОПРОТЕИНА
ПРЕПАРА ТИВНАЯ ЭКСПРЕССИЯ, ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА ГЛИКОПРОТЕИНА СР0.
МОЛЕКУЛЯРНОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ .
ПРОТОЧНАЯ ИТОФЛУОРИМЕТРИЯ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Метод селекции антител с пероксидазнон активностью был основан на окислении биотинилированного тирамина, который, в результате окисления, ковалентно взаимодействовал со связывающим центром антитела. Активные антитела отбирали по способности связываться со стрептавидином. Прямые методы отбора. Принцип прямых методов отбора заключается в том, что и фермент, и субстрат закрепляются на поверхности фаговых частиц. Способность активных фаговых частиц превращать субстраты на собственной поверхности позволяет проводить отбор по адсорбции на продуктсвязывающих или субстратсвязывающих подложках за счет элюцниадсорбцнн активных фатов после превращения субстрата в продукт реакции. В оригинальной работе, проведенной под руководством Питера Шульца , была разработана стратегия для сайтспсиифической иммобилизации биотинилированного субстрата в данном случае олигонуклеотида на поверхности фаговых частиц. Субстрат иммобилизовали специфично па белке i фагов помощников. При этом, в последовательности обоих пептидов было введено по одному цистеину таким образом, чтобы при димеризации они были способны образовать дисульфидную связь. Ннотинилированный олигонуклеотид конъюгировали с синтетическим основным пептидом, свободный цистен которого был заблокирован фотолабильной защитной группой. После инкубации фагов. Таким образом, субстрат оказывался специфически, ковалентно иммобилизован на i белке. Фермент стафилококковая иуклеаза был клонирован в фагемиду в виде белка, слитного с белком оболочки i. В результате инфекции клеток . Перед иммобилизацией олнгонуклеотидного субстрата на поверхности таких фаговых частиц нуклеазу инактивировали удалением ионов Са. После иммобилизации субстрата на поверхности фагов проводили адсорбцию фаговых частиц на стрсптавиднновой подложке. Фермент активировали добавлением Са ионов, что приводило к расщеплению ДИК и элюции активных фаговых частиц. Было показано, что элюция активных фаговых частиц, несущих нуклеазу, происходит в 0 раз лучше, чем конгрольных фагов, несущих фрагменты. В работе использовали более простои подход для иммобилизации субстрата на поверхности фаговых частиц. Анализируемые ферменты были представлены в виде ферменткальмодулинрII слитных белков. Субстрат представлял собой пет ид. Са2 с фаговыми частицами Кд. М, несущими комплекс ферменткальмодулин на своей поверхности. В случае эндопептндазы образующийся в результате внутримолекулярного протсолнза Ыконцсвой пептид аффинно адсорбировали на специфических моноклональных антителах нерасщеплснный пептид не связывался с антителами. Глутатионтрансферазныс фаговые частицы отбирали по связыванию со стрептавидином, которое следовало за конъюгацией глутатионсодсржащсго пептида с биотинилированным косубстратом. Биотин лигазу отбирали по связыванию со стрептавидином после внутримолекулярного мечення кальмодулин связывающего пептида биотином. Такой метод отбора прекрасно работал на модельных фаговых ферментах активных, не мутированных и демонстрировал хорошие факторы обогащения относительно контрольных неактивных фагов, однако оказался непригодным для отбора активной эндопептидазы из фаговой библиотеки мутантов с вырождснностью порядка 5 . Авторы использовали способность субтилигазы лигировать пептиды для отбора улучшенных вариантов этого фермента. ГМконец субтилигазы был удлинен на аминокислотных остатков таким образом, чтобы оказаться в непосредственной близости от активного центра. Такой удлиненный вариант фермента способен катализировать внутримолекулярное лигирование пептидов на собственный Ыконец. Селекция фагдисплейной библиотеки представительность составляла 9 проводилась по способности внутримолекулярного лигирования биотинилированного пептида. Фаговые частицы, несущие активные варианты субтилигазы аффинно адсорбировали на подложке, покрытой нейтравиднном. В результате такого прямого метода отбора были получены двойные мутанты субтилигазы. ДНКполимераза также была использована как модельный фермент для разработки еще одного подхода для прямого отбора на каталитическую активность , .

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.216, запросов: 145