Инактивация репортерных генов клонированными гетерохроматиновыми повторами в геноме D. melanogaster

Инактивация репортерных генов клонированными гетерохроматиновыми повторами в геноме D. melanogaster

Автор: Наумова, Наталия Михайловна

Шифр специальности: 03.00.03

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2003

Место защиты: Москва

Количество страниц: 151 с. ил

Артикул: 2345484

Автор: Наумова, Наталия Михайловна

Стоимость: 250 руб.

Инактивация репортерных генов клонированными гетерохроматиновыми повторами в геноме D. melanogaster  Инактивация репортерных генов клонированными гетерохроматиновыми повторами в геноме D. melanogaster 



Ххромосомные гены , представляющие собой редкий случай кодирующих белок последовательностей, расположенных в гетерохроматине, обладают открытой рамкой считывания с гомологией с регуляторной субъединицей протеинкиназы II iv, iv, . Кроме области гомологии с генами , каждый повтор несет также ииссрцию мобильного элемента iv . Повидимому, оба типа повторов возникли благодаря амплификации на половых хромосомах уникального аутосомного гена II, кодирующего семенникспецифическую регуляторную субъединицу протеинкиназы II, который в свою очередь, видимо возник из гена повсеместно экспрсссирующеся субъединицы путем ретропозиции v . На фоне полной или частичной делении повторов возникает гиперэкспрсссия генов , которая приводит к многочисленным нарушениям мейоза и стерильности самцов i . В отличие от многих последовательностей гетерохроматина, для повторов и известна функция некодирующие повторы подавляют в норме экспрессию белоккодирующих генов но механизму сходному с искусственной РНКинтерференцией , , . РНК далее дцРНК vi . В результате транскрипции обеих цепей повторов образуются смысловые и ангисмысловые транскрипты, по крайней мере часть из которых формирует дцРНК. Местом формирования, а также возможно и дальнейшего процессинга дцРНК на нт. РЫК является, повидимому, ядро. В то время как смысловые транскрипты и , а также дцРНК или же короткие РНК могут выходить из ядра в цитоплазм, антисмысловые траискрипты остаются в ядре и избегают деградации. В цитоплазме короткие РНК узнают и направляют деградацию гомологичных мРНК и смысловых транскриптов . Полученные А. Аравиным данные не отвергают механизм, согласно которому короткие РНК могут направлять изменение структуры хроматина и последующее транскрипционное подавление гомологичных последовательностей в ядре. Рис. Предполагаемый механизм регуляции экспрессии генов . РНК или же короткими РНК модификация структуры хроматина локуса в ядре. По всей видимости, гены являются активными сайтами сборки гетерохроматина, поскольку, как было показано ранее i . В настоящей работе исследования в этом направлении были продолжены. Показано, что оба типа повторов и , вызывают инактивацию прилежащих репортерных генов, что, однако, происходит без привлечения наиболее известных структурных белков гетерохроматина. Использование трансгенных конструкций также позволило показать, что организация генов в виде тандема несущественна для подавления их экспрессии повторами . РНК . Целями настоящей работы являлись 1. Изучить способность клонированных повторов и вызывать инактивацию репортерных генов в различных соматических и герминальных тканях 2. Охарактеризовать состояние хроматина в сайтах инсерции клонированых тандемов 3. Выяснить, принимают ли участие наиболее важные белкимодификаторы классического эффекта положения в инактивации гена iii клонированными гетерохроматиновыми повторами и в эктопических сай гах в эухроматине 4. Выяснить, определяется ли подавление экспрессии генов повторами в семенниках самцов тандемной организацией генов . Исследовать изменение состояния хроматина в промоторной области генов , молчащих в норме и активных на фоне делеции повторов . В работе впервые исследовано влияние клонированных фраг ментов гетерохроматина известной последовательности на экспрессию рспортсрных генов в соматических и герминальных тканях дрозофилы. Показано, что белоккодирующие повторы и некодирующие повторы с одинаковой эффективностью вызывают инактивацию реиоргерных генов в соматических тканях у взрослых мух и личинок III возраста, причем сила инактивации связана с общей длиной фрагмента гетерохроматина. Продемонстрировано, что инактивация эухроматиновых реиоргерных генов сопровождается незначительной конденсацией хроматина в сайге инсерции элемента без нарушения нуклеосомной укладки. Обнаружено, что наиболее известные структурные белки гетерохроматина не принимают участия в инактивации репортсрных генов повторами и . Продемонстрирована сильная инактивация репортерных генов, находящихся под чужеродными промоторами, клонированными повторами в герминальных тканях самцов на всех стадиях сперматогенеза.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.327, запросов: 145