Изменения спектров экспрессии генов при гепатоканцерогенезе и прогрессии опухолей печени

Изменения спектров экспрессии генов при гепатоканцерогенезе и прогрессии опухолей печени

Автор: Лазаревич, Наталия Леонидовна

Шифр специальности: 03.00.03

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2003

Место защиты: Москва

Количество страниц: 245 с. ил

Артикул: 2609916

Автор: Лазаревич, Наталия Леонидовна

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
2.1. Структура и свойства нормальной печени
2.2. Эпидемиология и патологические свойства ГК
2.3. Стадии гепатоканцерогенеза
2.4. Патогенез ГК
2.4.1. Хронический вирусный гепатит
2.4.2. Вирус гепатита В
2.4.3. Вирус гепатита С
2.4.4. Химические канцерогены
2.4.5. Наследственные генепшческие нарушения.
2.5. Свойства опухолевой клетки
2.5.1. Независимость от ростовых сигналов
2.5.2. Нечувствительность к сигналам, запрещающим рост.
2.5.3. Уклонение от программы апоппюза.
2.5.4. Неограниченный репликативный потенциал
2.5.5. Способность к ангиогенезу.
2.5.6. Генетическая нестабильность.
2.5.7. Способность к инвазии и метастазированию
2.5.8. Снижение уровня дифференцировки.
2.6. Генетические механизмы гепатоканцерогенеза
2.6.1. Ранние изменения при гепатоканцерогенезе
2.6.2. Поздние события гепатоканцерогенеза.
2.7. Гепатоцитарные ядерные факторы и их роль в регуляции генов печени
2.7.1. Семейство НХП.
2.7.2. Семейство СЕВР.
2.7.3. Семейство АГЗ.
2.7.4. Семейство НХГ
2.7.5. Семейство НЬТб
2.7.6.
2.7.7. Семейство С А ТА
2.7.8. Семейство СОИРТГ.
2.7.9. Основныеэпшпы формирования печени.
2.7 Спектры экспрессии ГЯФ в печени и других органах.
2.7 Регуляционная иерархия ГЯФ.
2.7 ГЯФ в генетических заболеваниях человека.
2.7 ГЯФ при вирусных инфекциях.
2.7 ГЯФ при канцерогенезе
2.8. Регуляция экспрессии гена АФII
2.8.1. Структура гена АФП и продукты его транскрипции
2.8.2. Синтез АФП в норме и при папюлогии
2.8.3. Механизмы регуляции экспрессии гена АФП.
2.8.4. Регуляторные цисэлененты гена АФП
2.8.5. Транскрипционные факторы, участвующие
в регуляции экспрессии гена АФП
2.8.6. Возможная модель регуляции гена АФП
3. МАТЕРИАЛЫ II МЕТОДЫ м.н.нм
3.1. Список использованных растворов и сред.
ф 3.2. Линии ПЕРЕВИВАЕМЫХ ГЕПАТОКАРЦИНОМ.
3.3. Клеточные линии
3.4. Трансформ ация клеток Е. i
3.5. Выделение нуклеиновых кислот.
3.6. Электрофорез нуклеиновых кислот
в неденатурирующих агарозных гелях.
3.7. Метод Обратная Транскрипция Полимеразная Цепная Реакция
ОТПЦР.
3.8. Нозерлблот гибридизация
3.9. Определение активности теломеразы методом
iii .
3 Авторадиография
3 Иммунохимическое выявление белков
3 Получение гистологических препаратов ГК мышей
3 Гибридизация с кДНК микрочипами
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ ОДНОСТУПЕНЧАТОЙ ПРОГРЕССИИ ПЕРЕВИВАЕМЫХ ГК МЫШЕЙ мамммаиммвммааммммнамммаиаа1маиааииа1м
4.1.1. Сравнение биологических свойств 6ГК и мГК ааааааааааааиамааааааааамаанааааааааиааааааааиаа
4.1.2. Утрата эпителиальной морфологии при прогрессии ГК ааааааамаааааааааааааааамаиаааа 7 Ф 4.1.3. Активация теломеразы при прогрессии ГК аааиаааааааааааиаааааааааааааааааамамаааааааааамааааа
4.1.4. Экспрессия гепатоспецифических генов при прогрессии ГК. амааааааиааааааааааааамаа
4.1.5. Прогрессия ГК сопровождается подавлением экспрессии
всех изоформ 4 аааааааааанааааааааааааааамааааааамааиааааааааааамаамаааааамааамааамаааиаамааааиамааааааааа
4.1.6. Гепатоципшрные ядерные факторы в прогрессии ГК аамаимаааиааамамааааанааамамаа
4.1.7. Восстановление экспрессии 4 в культуре клеток б ГК ведет
к восстановлению транскрипции некоторых гепатоспецифических генов и установлению эпителиальной морфологии.
4.1.8. Регуляторный район ,4 в клетках 6ГК неактивен ааааааиааана1ааааиааамаа
4.2. ЗАКОНОМЕРНОСТИ ЭКСПРЕССИИ ГЕПАТОСИЕЦИФИЧЕСКИХ ГЕНОВ
В ГК МЫШИ РАЗЛИЧНОГО УРОВНЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ .
4.3. ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ РЕГУЛЯЦИИ ГЕНА АФП В КЛОПАХ КРЫСИНОЙ ГЕПАТОМЫ . .
4.3.1. Различия в уровне синтеза АФП определяются
на транскрипционном уровнем.н
4.3.2. Разработка нового метода трансфекции эукариотических клеток.
4.3.3. Анализ экспрессии репортерных генов под контролем регуляпюрных элементов гена А ФП в А ФП и АФП клонах. ааааааааиааааааиааааааааамааааааамаааааааааааааааа
4.3.4. Экспрессия гепатоспецифических белков в АФП и АФП клонах. аааааааааааааааа
4.3.5. Сравнение спектров экспрессии транскрипционных факторов
в А ФГ1 и А ФП клонах. аааааамаамааиааааамаааааааааиааааааааиааааамаааиааамамааама1м1аанааа
4.3.6. Получение соматических гибридов АФП и АФП клонов. аааамааааааааааааммаааааааааа
4.3.7. Синтеза АФП в полученных гибридах не наблюдается.
4.3.8. Экспрессия генов семейства альбумина в сомапшческих гибридах.
4.3.9. Закономерности экспрессии транскрипционных факторов
в сомапшческих гибридах. аааамааааааааааамамваамаааааиаааааиа1аааиаааааааамаамаааамамаваа1ааа
4.3 Экзогенная экспрессия II4 и II1 в АФП клонах крысиной гепатомы
4.4. АНАЛИЗ СПЕКТРОВ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ В ГК МЫШЕЙ II КРЫС МЕТОДОМ ГИБРИДИЗАЦИИ С кДНКМИКРОЧИПАМИ.
4.4.1. Гены, дифференциально экспрессирующиеся при прогрессии ГК.
4.4.2.1НЧГ4х1респонсивные гены
4.4.3. Возможные маркеры гепатоканцерогенеза
4.4.4. Гены, дифференциально экспрессирующиеся в ГК мышей разного уровня дифференцировки и клонах крысиной гепатомы,
различающихся по 1ФЯ.
4.5. Экспрессия Н4а1 в образцах ГК человека подавлена. .
5. ОБСУЖДЕНИЕ НИНМНМ1ММИМ1МИ1МИ1ИИНМНМ1ИМММИ1ИМММ1ММНИМ1М1ММ1М1
5.1. Изменения тканеспецифической экспрессии генов при прогрессии ГК
5.1.1. Одноступенчатая прогрессия перевиваемых ГК мыши
5.1.2. Экспрессия транскрипционных факторов, определяющих гепатоцитарный фенотип, при прогрессии ГК
5.1.3. Экспрессия Н1Г4а при гепатоканцерогенезе и прогрессии опухолей.
5.1.4. НГ4а1 важный регулятор дифференцировки гепатоцитов
5.1.5. Чпю стало причиной репрессии Н,Г4а.
5.2. Регуляция экспрессии гена АФП
5.3. Изменения профилей экспрессии генов при прогрессии ГК
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Этот эффект, вероятно, непрямой, так как укороченные формы локализуются исключительно в цитоплазме, на мембране эндоплазматичсского ретикулума, предполагается, что они могут быть вовлечены в образование свободных радикалов . Укороченные формы среднего белка оболочки кооперативно с могут вызывать клеточную трансформацию , . V одноцепочечный позитивный РНК вирус размером примерно нуклеотидов, принадлежащий к семейству флавиавирусов и не имеющий обратнотранскриптазной активности. Пока не получено данных об интеграции этого вируса в геном пациентов с гепатитом типа С или ПС. Хронический гепатит, сам по себе являющийся основным фактором риска образования ПС, наблюдается в случаев инфекции V и менее чем в случаев инфекции V. ГК развиваются примерно у носителей V и 5 носителей V , Рис. V представляется существенно более опасным фактором риска для возникновения ГК. Механизмы возможного участия V в процессе гепатоканцерогенеза пока исследованы недостаточно полно. Как отмечено выше, воспаление при вирусном гепатите часто приводит к повреждениям ДНК и может стать причиной гепатоканцерогенеза. Этот эффект является непрямым и нсспсцифическим. Прямое влияние на развитие ГК могут оказывать вирусные белки, регулирующие пролиферацию и клеточную смерть. Единственная открытая рамка считывания V кодирует полипротсин размером а. Этот предшественник расщепляется вирусными и хозяйскими протеазами на ряд структурных и неструктурных белков. В процессе гепатоканцерогенеза могут участвовать коровый белок V и неструктурные белки 5 и 3. Вирусные белки могут взаимодействовать с целым рядом клеточных белков , аполипопротеином А2, рецепторами и лимфотоксина, доменом РПКхеликазы, ядерным рибонукпеопротеином К коровый белок, интерферониндуцибельной протеин киназой белок оболочки Е2 и фосфобелок 5, р протеаза и хеликаза 3, 5 и, возможно, коровый белок, подобным белком 5 i , . Коровый белок размером 1 а. Диспластические гепатоциты. Рисунок 1. Хронологическая последовательность событий, приводящих к развитию ГК человека. В i . Алоптоз при хроническом гепатите индуцируется цитотоксически ми Т клетками, экспрессирующими лиганд, которые связывают на поверхности гепатоцитов и индуцируют клеточную смерть. Гспатоциты, инфицированные V, i избежать зависимого апоптоза. Это наблюдение подтверждается опытами по трансфекции белков V клетки различного происхождения, экспрессирующие коровый белок, характеризуются повышением устойчивости к индуцированому апоптозу. Коровый белок способен также оказывать проапоптотичсское действие за счет связывания рецепторов и рлимфотоксина , i . Он может регулировать активность генов или белков, контролирующих клеточный цикл, пролиферацию, дифференцировку и апоптоз стус, циклима Е, р, , , , I II, и ряда других . Есть данные, что этот белок способен супрессировать активность промотора р . Трансформирующая способность корового белка невысока, однако кооперативно с v он способен трансформировать клетки АЗ 1, устойчивые к зависимой трансформации, и первичные эмбриональные фибробласты крысы . По крайней мере в одной линии трансгенных мышей, экспрессирующих коровый белок, развиваются ГК, при этом наблюдается жировое перерождение печени, но отсутствуют признаки воспаления i . Есть данные о том, что и другие белки V могут участвовать в гепатоканцерогенезе, скорее всего, за счет связывания с клеточными белками иили трансактивационных свойств. Неструктурные белки 5, 4 и 3 способны вызывать трансформацию 3 клеток . Этот белок способен также инактивировать возможный опухолевый супрессор . Таким образом, за счет экспрессии вирусных белков иили индукции хромосомных нарушений V и V могут влиять на процессы пролиферации, дифференцировки и выживания клеток печени. Нарушение этих процессов может привести к инициации процесса трансформации некоторых гепатоцитов и их клональной экспансии. Необходимо отметить, что хроническая инфекция не обязательно ведет к развитию ГК, более того, среднее время возникновения опухолей у носителей вируса составляет лет. Дальнейшее развитие ГК в таком случае определяется действием кофакторов, способных вызвать дальнейшее развитие опухолевого фенотипа.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.188, запросов: 145