Структурная организация хвостового чехла бактериофагов Т4 и φ KZ

Структурная организация хвостового чехла бактериофагов Т4 и φ KZ

Автор: Ефимов, Андрей Викторович

Шифр специальности: 03.00.02

Научная степень: Кандидатская

Год защиты: 2002

Место защиты: Москва

Количество страниц: 111 с. ил

Артикул: 2326997

Автор: Ефимов, Андрей Викторович

Стоимость: 250 руб.

Структурная организация хвостового чехла бактериофагов Т4 и φ KZ  Структурная организация хвостового чехла бактериофагов Т4 и φ KZ 



Свойство к полимеризации существенно затрудняет изучение стру ктуры данного белка, что необходимо для понимания деталей молекулярного механизма сокращения чехла. Ранее была проведена серия физикохимических исследований пг, выделенного из чехлов частицы Т4, а также из поличехлов 8. Мономерная и различные полимерные формы пт были изучены методами химической модификации и юрментативного гидролиза . Установлено, что субъединицы пг8 в составе различных форм мономер, ноличехлы, несокращенный и сокращенный чехлы имеют ряд структурных отличий. При изучении структуры хвоста фага были применены методы электронной микроскопии, оптической дифракции и трехмерной реконструкции. В растянутом состоянии сократительный чехол бактериофага Т4 имеет длину 0 . А. внутренний диаметр А и состоит из 4 субъединиц пг, уложенных в диска. Толщина дисков составляет А. Одинаково ориентированные субъединицы повторяются через 7 дисков, г. В сокращенном состоянии длина чехла уменьшается до 0 А, внешний диаметр становится 0 А, а внутренний диаметр не изменяется. Толщина диска уменьшается до А, а угол смещения субъединиц увеличивается до . Период идентичности становится равен . В сокращенном состоянии контакты между субъединицами одною диска разрываются, расстояние между ними увеличивается. При этом образуется свободное пространство, в котором располагаются субъединицы вышележащего диска. В результате сокращения симметрия хвостового чехла становится псевдо ти кратной . Выявление областей молекулы, участвующих во взаимодействиях между субъединицами пг8, а также выяснение деталей пространственной структуры белка в различных состояниях важны для понимания механизмов конформационных перестроек белка, происходящих при его сборке и в процессе сокращения чехла. Детальное изучение молекулярного механизма сокращения хвостовою чехла Т4 и родственных бактериофагов необходимо для понимания функционирования других сложноорганизованных двигательных систем. Поэтому, наряду с изучением белка хвостовою чехла бактериофага Т4, мы также начали изучение хвостового чехла гигантского бактериофага i. Несмотря на то, что оба фага и Т4 являются представителями семейства vii, гомологии на уровне ДНК и аминокислотных последовательностей между этими вирусами не наблюдается . Целью настоящей работы явилась идентификация функциональных областей ш с помощью генетической и белковой инженерии, а также конструирование мутантов пг, пршодных для кристашшзации н определения его структуры. Помимо данных задач, мы с помощью вьгсокоразрешакмцей крноэлекгронной микроскопии и пространственной реконструкции изучили также структуру хвостового чехла гигантского бактериофага , инфицирующею патогенные штаммы i. На основе данных криоэлектронной микроскопии выполнить трехмерную реконструкцию хвостового чехла бактериофага рК в растянутом и в сокращенном состояниях. Впервые исследования хвостового чехла бактериофага Т4 проведены на рекомбинантном белке. Для исследования был применен подход, основанный на получении генноинженерным методом полноразмерною пг, сто делеционкых фрагментов, а также мутантов с делениями внутри молекулы белка. Впервые показано, что нскошрые делеционные варианты формируют в растворе новый тип полимерных структур несокращенные иоличехлы НСП. Были идентифицированы участки молекулы пг. Впервые получены мутанты пг, не формирующие поличехлов, подобраны условия для их кристаллизации, что. Показана возхюжность создания гибридных молекул на бате делеционных фрагментов пт и участка белка 1 i i. Выполнена трехмерная реконструкция хвостового чехла гигантского бактериофага о К7. Данная экспериментальная работа нежит фундаментальный характер, выполнена по открытому плану научноисследовательских работ Института Биоорганической химии им. ММ. ШсмякинаЮ. А. Овчинникова РАН и поддержана грантами РФФИ и Медицинского института Говарда Хьюза. Идентификация областей пг Т4, важных для фолдинга и полимеризации, получение мутантов, способных образовывать различные типы структур, позволила получить болос полное представление о взаимодействии субьсднниц чехла бактериофага Т4 и механизмах сю сокращения.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.199, запросов: 145