Структурно-функциональные свойства некоторых лигандных форм гемоглобина человека в условиях УФ-облучения и различного микроокружения

Структурно-функциональные свойства некоторых лигандных форм гемоглобина человека в условиях УФ-облучения и различного микроокружения

Автор: Путинцева, Ольга Васильевна

Шифр специальности: 03.00.02

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2007

Место защиты: Воронеж

Количество страниц: 385 с. ил.

Артикул: 3389927

Автор: Путинцева, Ольга Васильевна

Стоимость: 250 руб.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 .Эндогенные низкомолекулярные биорегуляторы роль в биосис
1.1.1. Малые неионные лиганды
1.1.1.1. Оксид азота
1.1.1.2. Оксид углерода
1Л .2. Низкомолекулярные серосодержащие тиолы
1.1.2.1. Восстановленный глутатион
1.1.2.2. Нитрозоглутатион
1.2. Структура, физикохимические и функциональные свойства раз личных лигандных форм гемоглобина
1.2.1. Оксигемоглобин
1.2.2. Нитрозогемоглобин
1.2.3. Карбоксигемоглобин
1.2.4. Метгемоглобин
1.3. Влияние УФизлучения на структуру и функциональные харак
теристики сложных белков ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Получение растворов оксигемоглобина человека
2.2. Получение растворов карбоксигемоглобина человека
2.3. Получение растворов метгемоглобина человека
2.4. Получение растворов нитрозогемоглобина человека
2.5. Модификация оксигемоглобина человека различными низкомо пекулярными биорегуляторами
2.5.1. Модифицирование оксигемоглобина человека растворами вое
становленного глутатиона
2.5.2. Получение 8нитрозоглутатиона и его инкубация с оксигемог лобином
2.5.3. Модификация оксигемоглобина нитроглицерином и МОНОЧИНКВЕ
2.6. Модификация оксигемоглобина человека препаратом природно
го полисахарида реополиглюкином
2.7. Химическая модификация оксигемоглобина диальдегиддекстра ном
2.7.1. Получение диальдегиддекстрана из реополиглюкина, очистка и определение степени его окисления
2.7.2. Синтез конъюгатов гемоглобиндиал ьдегидцекстран
2.7.3. Определение содержания полисахарида в конъюгатах гемогло биндиальдегиддекстран
2.7.4. Определение природы ионогенных групп, участвующих в об разование комплекса гемоглобиндиальдегиддекстран, методом протеолитического титрования
2.8. Облучение растворов гемоглобина
2.9. Термостатирование исследуемых растворов гемоглобина
2 Регистрация электронных спектров поглощения растворов на тивного и модифицированного гемоглобина
2 Г ельхроматография нативных и модифицированных растворов гемоглобина
2 Дискэлектрофорез различных лигандных форм гемоглобина в полиакриламидном геле
2 Регистрация кривых диссоциации оксигемоглобина и его сме сей с различным содержанием нитрозо и карбоксигемоглобина
2 Спектрофотометрическое определение количества 8Нгрупп в различных лигандных формах нативного и модифицированного гемоглобина
2 Определение соотношения основных лигандных форм в на тивных и модифицированных образцах гемоглобина
2 Определение интенсивности светорассеяния растворов гемо глобина
2 Расчет некоторых кинетикотермодинамических характеристик нативных и УФоблученных молекул гемоглобина
2 Создание компьютерных моделей гема, гемоглобина человека, 1 декстрана, диальдегиддекстрана, комплексов гемоглобиндиальдегиддекстран I и II типов
2 Статистическая обработка экспериментальных данных
ГЛАВА 3. ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАТИВНОГО И
УФОБЛУЧЕННОГО ОКСИГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА
3.1. Хроматографические и спектральные характеристики нативного 3 и УФоблученного оксигемоглобина человека
3.2. Электрофоретические характеристики нативного и УФ 8 облученного оксигемоглобина человека
ГЛАВА 4. ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАТИВНОГО И
УФОБЛУЧЕННОГО МЕТГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА
4.1. Спектральные и хроматографические характеристики нативного 7 и УФоблученного метгемоглобина человека
4.2. Электрофоретические характеристики нативного и УФ облу 2 ченного метгемоглобина человека
ГЛАВА 5. ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАТИВНОГО И
УФОБЛУЧЕННОГО КАРБОКСИГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА И
ЕГО ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ ФРАКЦИЙ
5.1. Спектральные характеристики растворов нативного и УФ 8 облученного карбоксигемоглобина человека
5.2. Хроматографические характеристики нативного и УФ облучен
ного карбоксигемоглобина человека
5.3. Электрофоретические характеристики нативного и УФоб 7 лученного карбоксигемоглобина человека
5.4. Исследование природы электрофоретических фракций нативного
и фотомодифицированного карбоксигемоглобина человека
5.4.1. Спектральные характеристики электрофоретических фракций 2 нативного и УФоблученного карбоксигемоглобина человека
5Ароматографические характеристики электрофоретических 2 фракций нативного и УФоблученного карбоксигемоглобина человека
ГЛАВА 6. СТРУКТУРНОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА 8 РАСТВОРОВ ГЕМОГЛОБИНА С РАЗЛИЧНЫМ СОДЕРЖАНИЕМ ОКСИ И КАРБОКСИФОРМ
6.1. Спектральные характеристики растворов гемоглобина с различ
ным содержанием окси и карбоксиформ
6.2. Хроматографические свойства растворов гемоглобина с различ
ным содержанием окси и карбоксиформ
6.3. Электрофоретические свойства растворов гемоглобина с раз
личным содержанием окси и карбоксиформ
6.3.1. Хроматографические характеристики электрофоретических 0 фракций растворов гемоглобина с различным содержанием окси и карбоксиформ
6.4. Функциональные характеристики нативных и УФоблученных
смесей окси и карбоксигемоглобина человека ГЛАВА 7. ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАТИВНОГО И
УФОБЛУЧЕННОГО НИТРОЗОГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА И ЕГО ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ ФРАКЦИЙ
7.1. Спектральные свойства нативных и УФоблученных растворов 6 нитрозогемоглобина человека
7.2. Хроматографические характеристики нативного и УФ
облученного нитрозогемоглобина человека
7.3. Электрофоретические свойства нативного и УФоблученного
нитрозогемоглобина человека
7.4. Исследование природы электрофоретических фракций нативного
и фотомодифицированного нитрозогемоглобина человека
7.4.1. Спектральные характеристики электрофоретических фракций 9 нативного и УФоблученного нитрозогемоглобина человека
7.4.2. Хроматографические свойства электрофоретических фракций 9 нативного и УФоблученного, нитрозогемоглобина человека
7.5. Функциональные характеристики нативных и УФоблученных
смесей окси и нитрозогемоглобина человека ГЛАВА 8. НЕКОТОРЫЕ ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА 3 ОКСИГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА В ПРИСУТСТВИИ ИСТОЧНИКОВ ОКСИДА АЗОТА НИТРОГЛИЦЕРИНА, МОНОЧИНКВЕ и 8НИТРОЗОГЛУТАТИОНА
8.1. Некоторые физикохимические свойства оксигемоглобина чело
века в присутствии различных концентраций нитроглицерина
8.1.1. Спектральные характеристики растворов нативного и модифи 6 цированного нитроглицерином оксигемоглобина человека
8.1.2. Электрофоретические свойства оксигемоглобина человека, мо 8 дифицированного нитроглицерином в различных концентрациях
8.2. Спектральные характеристики растворов оксигемоглобина в
присутствии лекарственного препарата МОНОЧИНКВЕ
8.3. Физикохимические свойства оксигемоглобина человека, моди
фицированного воздействием 8нитрозоглутатиона и УФизлучения
8.3.1 .Спектральные характеристики оксигемоглобина человека, мо 3 дифицированного различными концентрациями 8нитрозоглутатиона
8.3.2. Спектральные свойства оксигемоглобина человека, модифици 6 рованного сочетанным действием Бнитрозоглутатиона и УФизлучения
8.3.3. Хроматографические характеристики оксигемоглобина чело 0 века в присутствии Бнитрозоглутатиона различных концентраций
8.3.4. Хроматографические свойства оксигемоглобина человека, мо 2 дифицированного совместным воздействием Бнитрозоглутатиона и УФизлучения
8.3.5. Электрофоретические характеристики оксигемоглобина чело 5 века в присутствии Бнитрозоглутатиона различных концентраций
ГЛАВА 9. ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НАТИВНОГО И
УФОБЛУЧЕНЮГО ОКСИГЕМОГЛОБИНА ЧЕЛОВЕКА В
ПРИСУТСТВИИ ВОССТАНОВЛЕННОГО ГЛУТАТИОНА
9.1. Гельхроматографические свойства оксигемоглобина человека в 4 присутствии глутатиона в условиях различного микроокружения
9.2. Электронные спектры поглощения растворов нативного и УФ 6 облученного оксигемоглобина человека в присутствии глутатиона
9.3. Электрофоретические характеристики нативного и УФ облу 4 ченного оксигемоглобина человека, модифицированного восстановленным глутатионом
ГЛАВА . СТРУКТУРНОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ
ХАРАКТЕРИСТИКИ МОЛЕКУЛ ГЕМОГЛОБИНА ПРИ
ДЛИТЕЛЬНОМ ХРАНЕНИИ КОНСЕРВИРОВАННОЙ КРОВИ
ДОНОРОВ ПРИ ПОНИЖЕННОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ
.1. Хроматографические свойства гемоглобина, выделенного из
крови доноров с различными сроками хранения
.2. Электрофоретические характеристики гемоглобина, выделен 5 ного из крови доноров с различными сроками е хранения
.3. Функциональные свойства гемоглобина, выделенного из крови 0 доноров с различными сроками е хранения
ГЛАВА . ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И
ТЕРМОСТАБИЛЬНОСТЬ МОЛЕКУЛ ГЕМОГЛОБИНА
ЧЕЛОВЕКА, МОДИФИЦИРОВАННОГО РЕОПОЛИГЛЮКИНОМ
И ДИА ЛЬДЕГИДДЕКСТРАНОМ
.1. Физикохимические свойства и термостабильность гемоглобина 5 человека в присутствии реополиглюкина
.1.1. Спектральные характеристики молекул гемоглобина челове 5 ка в присутствии реополиглюкина
.1.2. Хроматографические свойства гемоглобина человека в при 7 сутствии реополиглюкина
.1.3. Электрофоретические характеристики гемоглобина человека 8 в присутствии реополиглюкина
.1.4. Определение природы ионогенных групп молекул гемогло 1 бина человека в присутствии реополиглюкина методом протеолитического титрования
.1.5. Термостабильность молекул гемоглобина человека в присут 3 ствии реополиглюкина
.2. Физикохимические свойства и термостабильность молекул ге 5 моглобина человека в комплексах с диальдегиддекстраном
.2.1. Исследование процессов образования комплексов гемогло 5 биндиальдегиддекстран с помощью метода гельфильтрации
на сефадексах
.2.2. Спектральные характеристики комплексов гемоглобин 0 д и ал ьдеги ддекстран
.2.3. Электрофоретические характеристики комплексов гемогло 3 биндиальдегиддекстран
.2.4. Определение природы ионогенных групп, участвующих в об 5 разовании комплекса гемоглобиндиальдегиддекстран, с помощью метода протеолитического титрования
.2.5. Термостабильность комплексов гемоглобин 9 диальдегиддекстран
.2.6. Создание и анализ компьютерных моделей комплексов гемо 4 глобин диальдегиддекстран
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМЫХ ИСТОЧНИКОВ
ПРИЛОЖЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Восстановленный глутатион содержит глутаминовую кислоту, цистеин, глицин рис. Причем, концевой глутамат и цистеин связаны не пептидной связью, то есть остаток цистеина присоединен к укарбоксильной группе глутаминовой кислоты. Рис. По агрегатному состоянию глутатион представляет собой почти бесцветные кристаллы. Температура плавления около 0 С. Он хорошо растворим в воде, не растворяется в этаноле и эфире Медицинская биохимия, . В твердом состоянии восстановленный глутатион длительное время устойчив на воздухе, но его водные растворы легко окисляются в воздушной среде в дисульфидную форму рис. Рис. Структурная формула окисленного глутатиона дисульфида глутатиона . Под действием мягких окислителей глутатион также легко окисляется в дисульфид. При кипячении в воде он образует пирролидонкарбоновую кислоту и цистинилглицин. В.И. Кулинский, Колесниченко, а , . Глутатион обычно отсутствует у анаэробных микроорганизмов прокариот и некоторых эукариот ii, но есть у всех аэробных видов, что свидетельствует в пользу гипотезы о появлении у эукариот в связи с возникновением аэробного метаболизма и митохондрий. В аэробных клетках всегда образуются реактивные метаболиты кислорода Ог НО, Н2Ог и др. Н2О2. Эти метаболиты вызывают образование органических пероксидов типа , прежде всего липидов и ДНК. Затем образуются вторичные токсические продукты, повреждающие мембраны, белки и клетку в целом А. Н. Осипов и др. Это дает основание заключить, что происходит чрезвычайно мощный метаболизм этих веществ, в котором глутатион играет немаловажную роль, как неэнзиматический компонент антиоксидантной защитной системы, контролирующей разрушающие процессы в клетках иод действием активных форм кислорода АФК. Механизм защитного действия глутатиона связан с инактивацией высокореакционных кислородных и органических свободных радикалов вследствие переноса на них атома водорода с молекулы тиола. Образующиеся тиильные радикалы обладают меньшим повреждающим эффектом в сравнении с радикалом, у которого неспаренный электрон локализован на атоме углерода. Кроме того, тиильные радикалы очень эффективно удаляются из реакционной среды вследствие образования дисульфидов глутатиона по следующим уравнениям И. И. Степуро и др. Н2 2 2НО
Н

Различают четыре линии защиты организма от активных кислородных соединений с помощью 1 супероксиддисмутазы 2 каталазы и глутатионпероксидазы ГПО 3 ГПО и глутатионтрансферазы ГГ, которые последовательно восстанавливают Н2 и органические гидропероксиды 4 обезвреживания вторичных продуктов пероксидации и других окисленных соединений с участием ГТ, глиоксалазы и формальдегиддегидрогеназы. Очевидно, что вБН участвует в трех линиях защиты из четырех, и, следовательно, вносит основной вклад в функционирование антипероксидной антиоксидантной системы организма человека В. И. Кулинский, Л. С. Колесниченко, . Глутатион, глутатионпероксидаза, глутатионтрансфераза, глутатионредуктаза СБН, ГПО, ГТ, ГР и ЫАОРН образуют глутатионовую антипероксидную систему, в которой ГР и КАЭРН необходимы для восстановления СББв и рециклирования вБН. Система глутатиона особенно важна при пероксидном стрессе, то есть накоплении активных форм кислорода и других пероксидан гов. Развитие оксидативного стресса возможно при действии ионизирующей радиации, многих ксенобиотиковпероксидантов, аутоокислении оксигемоглобина. Выраженный пероксидный стресс повреждает мембраны и клетку в целом, утяжеляет протекание многих наиболее распространенных заболеваний и состояний, участвует в их патогенезе Н. К. Зенков и др. Глутатионовая антиоксидантная система эффективно защищает клетки от пероксидного стресса Н. Ь. Ни, А. Ь. Тарре1, , и только при ее недостаточности или истощении возникают серьезные поражения. Вышеуказанная система защищает хрусталик глаза от развития катаракты, гепатоциты печени от различных пероксидантов, клетки эндотелия и эпителия легкого от экзо и эндогенного Н2 Н. К. Зенков и др. Было обнаружено, что пониженный уровень важнейших антиоксидантов в кровотоке связан с повышенным риском возникновения рака.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.200, запросов: 145