Физико-химические закономерности изменчивости пероксидазы льна а динамике раннего развития

Физико-химические закономерности изменчивости пероксидазы льна а динамике раннего развития

Автор: Лапина, Галина Петровна

Шифр специальности: 02.00.04

Научная степень: Докторская

Год защиты: 1999

Место защиты: Тверь

Количество страниц: 270 с. ил.

Артикул: 259824

Автор: Лапина, Галина Петровна

Стоимость: 250 руб.

Физико-химические закономерности изменчивости пероксидазы льна а динамике раннего развития  Физико-химические закономерности изменчивости пероксидазы льна а динамике раннего развития 

ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.Ю
ГЛАВА 1. Пероксидазы растенийЮ
1.1. Исторические этапы1
1.2. Локализация в растениях. Особенности выделения и стабилизации.
1.3. Строение и физикохимические свойства пероксидазы.,
1.4. Особенности ферментативного катализа пероксидазы
1.5. Физиологобиохимические функции пероксидазы.
ГЛАВА 2. Изучение проблемы роста растений.
2.1. Участие пероксидазы в ростовых процессах.
ГЛАВА 3.уги и способы регуляции активности ферментов растений
ГЛАВА 4. Исследования в области биохимии и биотехнологии льна 4
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 5. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
5.1. Объекты исследовашя
5.1.1. Проращивание семян льна.
5.1.2. Экстракция фенольных соединений из семян и проростков льна
5.1.3. Экстракция пероксидазы из проростков льна.
5.1.4. Экстракция суммарных белков семядолей льна дтя проведения электрофореза в ПАЛГ
5.1.5. Экстракция суммарных белков проростков, гипокотилей и корней 1ьна для проведения электрофореза в Г1ААГ
5.1.6. Экстракция свободных аминокислот семядолей и гипокотилей льна
5.1.7. Регуляторы активности пероксидазы пророст ков льна
5.1.7.1. Комплексонат К4РеЗь
5.1.7.2. Хлорорганические гербициды глин и 2М4Х.
5.1.7.3. Четвертичные аммониевые соли
5.2. Методы исследования.
5.2.1. Количественное 1ределение фенольных соединений
5.2.2. Гельфильтрация экстракта пероксидазы проростков льна
5.2.3. Элекгрофоретический метод получения изоферментного спектра пероксидазы проростков льна в столбиках ПААТ
5.2.4. Метод тонкослойного электрофореза в ПААГ для получения электрофоретических спектров пероксидазы проростков, семядолей, гипокотилей и корней льна.
5.2.5. Определение молекулярной массы пероксидазы проростков льна.
5.2.6. Определение оптимума действия пероксидазы проростков льна
5.2.7. Определение температурного оптимума пероксидазы проростков льна.
5.2.8. Определение субстрагной специфичности пероксидазы проростков льна.
5.2.9. Определение параметров ферментативной активности пероксидазы проростков льна
5.2 Разделение свободных аминокислот семядолей и гипокотилей льна методом восходящей бумажной хроматографии
5.2 Количественное определение свободных аминокислот.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 6. ВЫДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКА И ФИЗИКОХИМЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПЕРОКСИДАЗЫ ПРОРОСТКОВ ЛЬНА.
6.1. Изучение динамики содержания фенольных соединений в проростках на ранних стадиях развития льна
6.2. Изучение динамики количественного содержания пероксидазы в проростках на ранних стадиях развитая льна.
6.3. Выделение и очистка суммарной пероксидазы 5дневных проростков льна.
6.4. Определение физикохимических свойств пероксидазы 5дневных проростков льна
6.4.1. Определение молекулярной массы пероксидазы проростков льна.
6.4.2. Электрофоретические свойства пероксидазы проростков льна
6.4.3. Влияние на активность пероксидазы проростков льна
6.4.4. Субстратная специфичность пероксидазы проростков льна
6.4.5. Оптимум температурного действия пероксидазы проростков льна
6.4.6. Кинетические характеристики ферментаптвной реакции, катализируемой пероксидазой проростков льна
6.4.6.1. Порядок реакции.
6.4.6.2. Константа скорости пероксидазной реакции
6.4.6.3. Этюргия активации пероксидазы проростков льна.
6.4.6.4. Стандаршые энтальпия и Э1прогшя пероксидазы проростков льна
6.4.7. Кинетические ферментативные параметры пероксидазы проростков льна.
ГЛАВА 7. ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ПОВЕДЕНИЯ ПЕРОКСИДАЗЫ ПРОРОСТКОВ, ГИПОКОТИЛЕЙ И КОРНЕЙ ЛЫ1А
7.1. Динамика ферментативтлх параметров пероксидазы проростков льна
на ранних этапах роста.
7.2. Влияние комплексоната К4Ке3 на ферментативные параметры пероксидазыпроростков льна в раннем онтогенезе
7.3. Изучение влияния хлорорганичсских гербицидов глин и 2М4Х на ферментативные характеристики пероксидазы проростков льна в раннем онтогенезе
7.4. Сравнительный анализ ферментативных параметров перокевдазы проростков льна, выращенных на средах, содеркащих дистиллированную воду, К
РеЗь, гербициды Ъшн и 2М4Х.
7.5. Сравнительное изучение влияния комллсксоната К4РеЗь, гербицидов глин и 2М4Х на ферментативные параметры пероксидазы хрена в модельных системах
7.6. Ферментатившле параметры пероксидазы гипоклилей и корней льна, выращенных на дистиллированной воде, в раннем онтогенезе
7.7. Сравнительная характеристика ферментативных параметров юроксидазы ипоктилей и корней льна, вьра енньх на дистиллировангюй воде.
7.8. Влияние четвертичных аммониевых солей на ферментативные параметры псроксидазы корней и гипокотилей льна в раннем
онтогенезе.
7.8.1. Влияние четвертичных аммониевых солей на динамик
ферментативных параметров пероксидазы гипокотилей в раннем развитии льна
7.8.1.1 .Влияние четвертичной аммониевой соли С на ферментативные параметры псроксидазы гипокотилей льна в раннем онтогенезе
7.8.1.2. Влияние четвертичной аммониевой соли С на ферментативные параметры пероксидазы гипокотилей льна в раннем онтогенезе
7.8.1.3. Влияние четвертичных аммониевых солей С1 и С7 на ферментативные параметры пероксидазы гипокотилей льна в раннем развитии
7.8.2. Влияние четвертичных аммониевых солей на ферментативные параметры пероксидазы корней льна на ранних стадиях роста
7.8.2.1. Влияние четвертичных аммониевых солей С и С на ферментативные параметры псроксидазы корней в раннем развитии льна
7.8.2.2. Влияние четвертичных аммониевых солей С1 и С7 на ферментативные параметры пероксидазы корней льна в раннем онтогенезе
7.9. Сравнительная характеристика влияния четвертичных аммониевых солей на ферментативные параметры пероксидазы корней и гипокотилей льна
7 Исследование ферментативных параметров модельных систем 6 ГЛАВА 8. ИССЛЕДОВАНИЕ ДИНАМИКИ
ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ СПЕКГРОВ ПЕРОКСИДАЗЫ РАЗЛИЧНЫХ ТКАНЕЙ СЕМЯДОЛЕЙ, ПРОРОСТКОВ, ППОКОТИЛЕЙ И КОРНЕЙ НА РАННИХ ЭТАПАХ РОСТА ЛЬНА
8.1. Динамика изоферментных спектров пероксидазы семядолей в условиях
рораста шя семян льна.
8.2. Динамика изофермешиых спектров пероксидазы проростков льна на ранних стадиях развития. В
8.3. Сравнительный анализ динамики изоэнзимных электрофоретических спектров пероксидазы семядолей и пророс ков льна.
8.4. Динамика изоферментных спектров пероксидазы гипокотилей в раннем развитии льна
8.5. Динамика изоферментных спектров пероксидазы корней в раннем
ггогенезе льна.
8.6. Сравнение изоэнзимных спекгров пероксидазы части проростков без семядоли корней и гипокотилей льна в условиях их i иi роста
8.7. Сравшггельный анализ динамики элекгроюретических спектров пероксидазы семядолей, гипокотилей и корней льна в i птем онтогенезе. 1 ВО
ГЛАВА 9. ИССЛЕДОВАНИЕ ДИНАМИКИ СВОБОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ СЕМЯДОЛЕЙ И ГИПОКОТИЛЕЙ ЛЬНА НА РАННИХ ЭТАПАХ ОНТОГЕНЕЗА.
9.1. Динамика свободных аминокислот семядолей в процессе прорастания семян льна
9.2. Динамика свободных аминокислот гипокотилей льна в условиях
1 тачального роста
9.3. Сравнительный анализ динамики свободных аминокислот семядолей и
гипокотилей льна
ОБСУЖДЕНИЕ IЮЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ГЛАВА . МЕХАНИЗМЫ РЕГУ ЛЯЦИИ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗЫ НА РАННИХ ЭТАПАХ РОСТА ЛЬНА.
.1. Изоферменгный состав пероксидазы льна
.2. Динамика количества пероксидазных молекул в гипокотилях, корнях
и проростках льна в его раннем развитии.
.3. Изменения ферментативных параметров пероксидазы льна
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
ПРИЛОЖЕНИЕ.
ВВЕДЕНИЕ


Это обычное состояние нативного фермента, отличающееся характерным спектром поглощения. Классические работы по изучению электронной структуры гемового железа в ПО начались с работ Теорелла и сотрудников по магнитной восприимчивости гемопротеидов Метелица, . В дальнейшем стали применять спектроскопию ЭГ1Р в замороженных растворах фермента. Комплекс I, 3 или I I. Образуется при реакции ПО с перекисями или органи сскими перекисями. Комплекс I зеленого цвета с максимумом поглощения при 7 и 8 нм. Он неустойчив и легко превращается в другие соединения. Выдвинута гипотеза о том, что при взаимодействии ПО с перекисью водорода железо гема из состояния 3 переходит в состояние 5 с очень высокой степенью окисления Метелица, . Н2 3 2Н. Метелица, . Комплекс П, РеО2 или Ре4ПО II. Комплекс II красного цвета с максимумами поглощения при 7, 0, 1 нм образуется при взаимодействии ПО с перекисью водорода в присутствии восстановителей ароматических аминов, фенолов, аскорбиновой кислоты, ферроцигохрома С, ферроцианида, йодида, нитрита. Существует предположение, что комплекс II имеет структуру феррил иона РеО 2 и содержит Ре4. РеО 2 АН2 Ре3 АН К4,з. Константы скорости К5,4 всегда больше констант скорости Кд. I более окисленный, чем комплекс II. Каталитический цикл пероксидазы включает последовательное февращение окисленного фермента 3, в комплекс I и в комплекс II, который юсстанавливается до исходного состояния. В настоящее время не доказана юзможность перехода комплекса III в комплекс I Метелица, . II. При действии избытка ПВ на ПО образуется комплекс III красного цвета с шксимумом поглощения при 7, 5, 3 нм. Считается, что комплекс III озникает при окислении ПО дигидроксифумарата или при взаимодействии осстановленной ПО с кислородом. Оксипероксидаза способна втоокисляться, образуя феррипероксидазу Ре3 и О2. Время гибели ксииероксидазы при комнатной температуре несколько минут. Одним из озможных путей образования комплекса III является реакция супероксидного пиона с феррипероксидазой. Это доказано ингибирующим действием упероксиддисмутазы, реагирующей с О2 Метелица, . Комплекс III бразуется при взаимодействии восстановленного фермента Рс2 с или окисленног о ермента Ре3 с О2. Ферропероксидаза, восстановленная ПО, Ре2 ПО Ре2. Образуется из Г од влиянием восстановителей. Эта форма легко восстанавливается в ферроорму дитионатом натрия, т. СО, так как этот лиганд реагирует только с восстановленными гемопротеидами. Состояние ПО . НАДВ, но не в результате взаимодействия этих молекул с ПО, а как следствие реакции с ферментом образующихся из них радикалов Метелица, . В окислении доноров водорода участвуют комплексы ПО I, ПО П и ПО П. АН2 Н2 А 2Н. Возможно также окисление доноров водорода молекулярным кислородом. АН2О2 АН2. Присутствующий в ПО единственный ион железа обладает способностью не олько активировать перекись водорода, но и сообщать ей способность вступать в акции окисления различных субстратов неорганических ионов, фенолов, бензолов, минов, тиолов и других соединений. Б. Чанс , высказал предположение, что субстраты ПО можно азделить на две группы. Субстраты I группы неорганические ионы ферроцианид, одид, нитрит и т. Субстраты II группы ромагические амины и фенолы непосредсвенно с гемом не реагируют. Следовательно, должна существовать некая электронтранспортная цепь, включающая ункциональные фуппы белковой части молекулы. Различия между субстратами роявляются в разной зависимости от при взаимодействии с промежуточными уединениями Е и Е2 и в чувсгвителыюсги субстратов к действию активаторов ебедева и др. Геометрию комплексов пероксидазы хрена ароматическими субсгратами обсуждают АКачурин, В. Фомичев . С, ароматические кислоты бензойная, салициловая, галловая и . Угарова, бедева, . Источником активного кислорода при каталитическом действии пероксидазы могут жить также и органические перекиси, в том числе и перекиси ненасыщенных рньх кислот и каротина. Установлено, что фермент обладает не только хжеидазными, но и оксидазными свойствами, катализируя окисление целого ряда единений за счет неакгивированного молекулярного кислорода.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.225, запросов: 121