Влияние антиретровирусной терапии на динамику CD4-лимфоцитов и экспрессию Т-клетками иммунологических маркеров у пациентов, инфицированных ВИЧ

• Автор: Ситдыкова, Юлия Равильевна
• Шифр специальности: 14.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 100 с. : 11 ил.

Оглавление
Список сокращений
Введение
Актуальность проблемы
Цель и задачи работы
Научная новизна исследования
Практическое значение работы
Апробация диссертации
Структура и объем диссертации
Обзор литературы
1.1 Методы определения количества С&4 лимфоцитов
1.2 Патогенез иммунологических нарушений при ВИЧ-инфекции
Механизмы уменьшения количества С&4 лимфоцитов
Роль активации иммунной системы
в патогенезе иммунологических нарушений
Изменение соотношения «наивных» СЭ4 лимфоцитов
и СЭ4 Т-клеток памяти
Изменение экспрессии ко-стимулирующих молекул
Нарушение ВИЧ-специфичного Т-клеточного ответа
1.3 Влияние антиретровирусной терапии на динамику СБ4-лимфоцитов и экспрессию Т-клетками
иммунологических маркеров
1.4 Влияние ко-инфекции вируса гепатита С
на иммунологический статус и эффективность
ВААРТ у пациентов с ВИЧ-инфекцией
Собственные исследования
Глава 1. Материалы и методы исследования
1.1 Характеристика пациентов
1.2 Подбор образцов для сравнительного исследования
методик подсчета количества СБ4 лимфоцитов
1.3 Методы исследования

1.4 Определение количества CD4 на проточном цитометре
1.5 Методы статистической обработки данных
Глава 2. Результаты исследования
2.1 Оценка и сравнительная характеристика методов
подсчета CD4 Т-лимфоцитов на проточном цитометре
2.2 Характеристика аномалий фенотипа CD4 и CD8
лимфоцитов у больных ВИЧ-инфекцией
2.3 Динамика клинической симптоматики, количества CD4
и CD8 лимфоцитов, вирусной нагрузки под влиянием нтиретровирусной терапии
2.4 Динамика экспрессии Т-клетками иммунологических
маркеров под влиянием ВААРТ
2.5 Пациенты, не ответившие на терапию
2.6 Влияние ко-инфекции гепатита С
на восстановление иммунной системы
Обсуждение результатов и заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

Список сокращений
АПК антигенпрезентирующая клетка
ВААРТ высокоактивная антиретровирусная терапия
ВГС вирусный гепатит С
ВИЧ вирус иммунодефицита человека
ДП двух-платформенный (метод)
ИЛ интерлейкин
ОП одно-платформенный (метод)
СПИД синдром приобретенного иммунодефицита
ТКР Т-клеточный рецептор
ЦТЛ цитотоксические Т-лимфоциты
ЦМВИ цитомегаловирусная инфекция
МНС главный комплекс гистосовместимости
CDC центры по контролю заболеваемости (США, Атланта)
MPD средняя процентная разница (при определении
процентного сходства)
PLG методика гейтирования всех лейкоцитов (Panleukogating)
TREC T-cell receptor excision circles - продукт перестройки T-
клеточного рецептора
• CD2 8 -FIT C/CD4-PE
• CD28-FITC/CD8-PE
• CD8-FITC/CD38-PE
• CD8-FITC/CD5 7-PE/CD3 -PE-Су
К 100 мкл цельной, предварительно аккуратно перемешанной крови добавляли 20 мкл МаТ. Кровь тщательно перемешивали с МаТ и инкубировали в течение 20 минут в темноте при комнатной температуре.
Лизис и фиксация образцов для сравнительного исследования методик определения количества CD4 лимфоцитов осуществлялись при помощи автоматизированной системы для подготовки пробы TQ-Prep, Beckman Coulter или ручным методом. В случае использования ручного метода к образцу добавляли 500 мкл визирующего раствора Optilyze и инкубировали в течение 20-30минут в темноте при комнатной температуре до просветления образца. После этого к образцу добавляли 500 мкл раствора PBS и выдерживали в темноте при комнатной температуре в течение 20 минут. При использовании ОП к готовым образцам непосредственно перед анализом на проточном цитометре добавляли частицы для абсолютного счета FlowCount, Backman Coulter. Образцы анализировали на проточном цитометре Epics XL, Beckman Coulter.
1.4 Определение количества CD4 на проточном цитометре
Для определения относительного и абсолютного содержания CD4 лимфоцитов использовали трехцветный анализ с гейтированием по CD45 и методику PLG (CD45/CD4). Подсчет абсолютного содержания CD4 лимфоцитов осуществлялся одно-платформенным и двух-платформенным методом. На первом этапе производилось сравнительное исследование следующих методик:
• Трехцветный анализ, двух-платформенный метод подсчета абсолютного содержания CD4