Разработка и исследование метода идентификации и количественного определения сложных органических соединений на основе использования комплекса веществ с унифицированными хроматографическими и спектральными параметрами

• Автор: Кулябина, Елена Валериевна
• Шифр специальности: 05.11.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 140 с. : ил.

Содержание

Введение
Глава 1. Литературный обзор и анализ современных методов 11 идентификации, состояния метрологического обеспечения количественного определения содержания сложных органических соединений с помощью ВЭЖХ и хроматографических баз данных
Глава 2. Определение параметров хроматографа, вносящих 32 доминирующие вклады в погрешность определения содержания анализируемого вещества в пробе
Глава 3. Результаты теоретических и экспериментальных исследований 41 веществ - кандидатов в компоненты тестовой смеси
З Л. Выбор вещества-маркера свободного объема
хроматографической колонки
3.2. Выбор вещества-маркера качества упаковки колонки
3.3. Выбор вещества для контроля инжектора
3.4. Выбор вещества-маркера точности установки длин волн УФ 47 детектора
3.5. Выбор маркера линейного диапазона детектора
3.6. Выбор вещества-маркера работы насосов
3.7. Контроль значения pH элюента и обоснование выбора вещества 59 маркера
3.8. Выбор вещества для контроля работы смесителя
Глава 4. Исследование тестовой смеси веществ «БД-2012»

Глава 5. Разработка и аттестация методики идентификации и 77 количественного определения УФ поглощающих веществ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
5.1. Методика идентификации и количественного определения УФ 77 поглощающих веществ
5.2. Источники ошибок идентификации и минимизация их влияния 82 путем применения тестовой смеси
Глава 6. Оценка достоверности идентификации
6.1. Теоретические аспекты идентификации
6.2. Определение вероятностей ошибок первого и второго рода
6.3. Определение достоверности идентификации по эксперимен- 97 тальным данным
6.4. Применение критерия Стьюдента для определения 101 статистических оценок интегральной характеристики набора спектральных отношений
Глава 7. Процедура корректировки базы данных
Заключение
Литература
Приложение. Методика приготовления аттестованной смеси «БД- 129 2012» и установления спектральных и хроматографических параметров, воспроизводимых компонентами смеси

ВВЕДЕНИЕ
В настоящее время метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) широко применяется для идентификации и определения содержания сложных органических соединений
- в биотехнологиях для исследования биологических объектов;
- в пищевой промышленности для определения состава и содержания пищевых добавок, консервантов, красителей, вводимых в детское питание, напитки, в молочные продукты;
- в фармацевтике для подтверждения соответствия действительного количества вещества регламентированному в нормативных документах;
- в медицине - для определения в биологических жидкостях допингов (актуально для спортсменов), наркотических веществ, алкоголя (при освидетельствовании водителей);
- в судебно-медицинской экспертизе для идентификации токсинов при определении причины отравления;
- в области охраны окружающей среды для мониторинга содержания загрязняющих веществ в выбросах промышленных предприятий, водоемах, почвах и других объектах, прогнозирования состояния окружающей среды, предотвращения её загрязнения.
Для решения перечисленных задач существует большое количество хроматографических методик измерений содержания веществ с использованием жидкостных хроматографов с различными детекторами, колонками, сорбентами. Самым распространенным вариантом ВЭЖХ в последние 15-20 лет является обращено-фазовая жидкостная хроматография с детектированием по поглощению ультрафиолетового излучения.
Разработкой метрологического обеспечения высокоэффективной жидкостной хроматографии занимались отечественные ученые, такие как

одного типа, но произведенных в разные годы [22]. Таким образом, задача контроля параметров детектора должна учитываться при разработке процедуры контроля основных параметров хроматографа.
Формирование и применение баз данных "ВЭЖХ-УФ" для сотен и тысяч веществ невозможно без использования компьютеров и соответствующего программного обеспечения, которые уже давно являются неотъемлемой частью хроматографа, и поэтому могут вносить свой вклад в погрешность результатов анализа.
Если в первых работах, посвященных применению компьютеров для работы с БД "ВЭЖХ-УФ" эта задача решалась весьма упрощенно [35, 64], то в настоящее время оценка влияния программного обеспечения является важным условием аттестации методики измерений методом ВЭЖХ. Так, например, по правилам Управления по качеству пищевых продуктов и лекарств США (FDA US) программное обеспечение должно соответствовать требованиям GLP (Good Laboratory Practice) и GMP (Good Manufacturing Practice). Детально обсуждаются все важнейшие аспекты проверки соответствия ПО в фундаментальной монографии [65]. В свою очередь у нас в стране руководствуются недавно принятыми нормативными документами, регламентирующими требования к программному обеспечению средств измерений - МИ 2955-2010, Р 50.2.077-2011.
Как видно из приведенных данных, характеристикой, стабильность которой исследуют во многих работах, является время удерживания вещества [17, 18, 29].
Стабильность таких параметров, как постоянство состава подвижной фазы, мертвый объем колонки, бесперебойная работа насоса, инжектора, детектора, несмотря на их влияние на результаты количественного определения, исследовали редко.
Ниже рассмотрены основные узлы хроматографа и проанализированы факторы, влияющие на показатели точности результатов измерений.