Структурные изменения гипокампа у белых мышей при стрессе и действии производного фосфорилуксусной кислоты

• Автор: Балашов, Алексей Владимирович
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Саранск
• Количество страниц: 92 с. : 26 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение
ГЛАВА 1. (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1. Современные представления о структурной организации
нервной ткани
1.2. Морфология гиппокампа
1.3. Стресс и его роль в этиопатогенезе повреждений головного 28 мозга
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика подопытных животных
2.2 Моделирование стресса и взятие материала
2.3 Метод световой микроскопии
2.4 Иммуногистохимические методы исследования
2.5 Метод электронной микроскопии
2.6 Исследование антигипоксической активности
2.7 Метод спектроскопии комбинационного рассеивания
2.8 Методы изучения калиевой проводимости на нейронах боль- 42 шого прудовика
2.9 Статистическая обработка
2.10 Характеристика исследуемых соединений
ГЛАВА 3. Количественный анализ повреждения нейроцитов зо
ны Са3 гиппокампа в условиях стресса и протекции ХС 3635 ГЛАВА 4. Ультраструктурные аспекты нейропротекторного дей
ствия ХС 3635 при стрессе

ГЛАВА 5. Исследование некоторых свойств производного фос-форилуксусной кислоты (ХС 3635)
5.1 Антигипоксические свойства вещества
5.2. Влияние ХС 3635 на калиевый ток задержанного выпрямле- 83 ния нейронов ганглиев окологлоточного кольца большого прудовика
6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЛИТЕРАТУРА

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования. Морфофункциональные закономерности стрессорного повреждения организма и его структур представляют значительный интерес для анатомов, гистологов, физиологов и клиницистов (Меерсон Ф.З., 1986; Пшенникова М.Г., 2000; Батышева Т.Т., 2007; Путилина М.В., 2011; Румянцева С.А., 2007). На сегодняшний день можно утверждать, что, не смотря на несомненные достижения в изучении данной проблемы, она все-таки очень далека от своего окончательного разрешения, особенно в плане изучения адаптации к стрессу нервной системы и её структурных компонентов.
В индустриально развитых странах человек постоянно подвергается воздействию различных стрессорных факторов разнообразной природы. В сочетании с другими этиопатогенетическими факторами это приводит к усугублению течения патологии центральной нервной системы (Бобровицкий И.П., Ушаков И.Б., 1998; Бурчинский С.Г., 2008; Гурович И.Я. с соавт., 2000; Гуро-вич И .Я., 2001; Дмитриева Т.Б., 2001; Акарачкова Е.С., 2006). В частности, по данным статистики, в течение последних десятилетий, среди ведущих медицинских и социальных проблем на первые позиции выходят цереброваскулярные заболевания (Батышева Т.Т 2007; Гусев Е.И с соавт 2010; Суслина З.В., 2008; Шахпаронова Н.В., 2008; Шальнова С.А. с соавт., 2011; Путилина М.В., 2011; Камчатнов П.Р., 2011; Kwon D.Y. et al. 2008; Chen C.F. et al., 2011), в том числе и в республике Мордовия (Блинов Д.С., с соавт., 2011).
В рамках анализа указанной проблемы, следует отметить, что патогенез цереброваскулярных заболеваний и стрессорных расстройств, несмотря на ряд особенностей, имеет многие общие звенья. В частности, сложный многокомпонентный характер повреждения, напряжение симпатоадреналовых механизмов ауторегуляции, чрезмерная активация процесса перекисного окисления липидов, что приводит к церебральной гипоксии, апоптозу и некрозу нейроци-

тов (Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г., 1988, 1989; Гельфанд Б.Р. с соавт., 2007).
Важная роль стресс-реализующих систем и гипоксии в патогенезе цереброваскулярных расстройств подтверждается многочисленными данными литературы об эффективности антигипоксантов и стресспротекторов в экспериментальных условиях и в комплексной терапии данной патологии (Зорькина
A.B., 1997; Блинов Д.С. с соавт., 2010; 2012). Перспективным направлением поиска эффективных нейропротекторов является изучение синтетических антиоксидантов из группы фосфорорганических неантихолинэстеразных средств. Ранее рядом авторов (Хафизьянова Р.Х., 1991; Цыбулькина В.Н., 1999) продемонстрирован нейропротекторный эффект димефосфона в эксперименте и у больных с цереброваскулярной патологией. Особое внимание привлекают к себе производные фосфорилуксусной кислоты, обладающие ан-ксиолитическим, антидепрессивным и ноотропным эффектами (Семина И.И., 1988; 1999; 2002; Хафизьянова Р.Х., 1991; Ржевская Г.Ф. и соавт., 1996). Анализ литературы, посвященной данной группе веществ, свидетельствует, что механизмы их фармакологических эффектов основаны на антигипоксических (Курмышева Т.В., 2005), антиоксидантных (Семина И.И. с соавт., 2002; Кур-мышева Т.В., 2005), мембраностабилизирующих (Семина И.Г. с соавт., 2001) и стресспротекторных свойствах (Балашова Г.В., 2009).
Среди ряда изученных соединений наибольшую стресспротекторную и кардиопротекторную активность (Кулькова Н.П., 2007; Альмяшева М.И. с соавт., 2006; Балашов В.П. с соавт., 2007; 2008) проявила трифторуксуснокислая соль 4 - диметиламинофенил - 2 - хлорэтоксифосфорилацетилгидразида (лабораторный шифр соединения - ХС-3635). Однако, влияние данного вещества на структурные изменения нейронов в отделах центральной нервной системы, ответственных за поведенческие и двигательные реакции млекопитающих животных, при стрессе ранее не изучались, что и предопределило цель нашего исследования.
Цель работы: изучить морфологические изменения зоны СА3 гиппокампа в условиях хронического стресса и действия трифторуксуснокислой соли 4 -диметиламинофенил — 2 - хлорэтоксифосфорилацетилгидразида (ХС 3635).
расстройств (Зозуля И.С 2005, Бурчинский С.Г 2008; Nutt D et al 2002).
Главенствующее в психиатрии представление о невротических расстройствах как чисто функциональных заболеваниях, в последние годы подверглись существенной критике и новые данные позволили пересмотреть эти взгляды. Сегодня не вызывает сомнения тот факт, при невротических расстройствах в структурах мозга наблюдаются различные морфологические изменения. Ультраструктурные исследования свидетельствуют о деструкции дендритного шипикового аппарата, уменьшение числа рибосом в цитоплазме нейронов, расширение цистерн эндоплазматического ретикулума (Манина
A.A., 1976; Хананашвили М.М., 1978; Андреев Б.В. и соавт., 1982; Краев И.В., 2005). При экспериментальных неврозах ряд авторов отмечают также нарушения метаболизма синаптосом в кортексе, описывают дегенерацию нейроцитов гиппокампа (Александровская H.H., Кольцова A.B., 1975). По данным Хананашвили М.М., (1978) развиваются характерные сосудистые и глионевральные нарушения, свидетельствующие о гипоксии. Отмечается нарушение морфологии синаптических контактов (Грицаенко О.С., 2009). Сохранившиеся в нервной ткани, характеризуются более высоким содержанием специфических ферментов и нуклеопротеидов, что позволяет определить их как клетки с высоким энергетическим потенциалом (Ярыгин Н.Е., 1973). Универсальными проявлениями адаптационных процессов в клетках различных структур мозга являются увеличение размеров ядера, гиперплазия митохондрий, изменение числа рибосом, гиперплазия различных мембранных структур, увеличение доли липофусцина в нейроплазме.
Согласно данным Кудиновой Е.В., (2004) под воздействием аудиоген-ного стресса наблюдается избирательность повреждения гиппокампа. Максимальное число поврежденных нейронов отмечается в поле СА3. Автор описывает диффузное и очаговое повреждение нейронов. Количественный анализ свидетельствует о деструктивных изменениях до 90% нейроцитов этой зоны, причем на 90 сутки эксперимента, значительная их часть составляет долю необратимо измененных гиперхромных сморщенных нейронов.