Роль цитоскелета в механизмах действия активных форм кислорода на сократительные свойств гладких мышц

• Автор: Мельник, Оксана Сергеевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 100 с. : 6 ил.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АФК - активные формы кислорода
ГМ - гладкие мышцы
ГМК - гладкомышечная клетка
ГТФ - гуанозинтрифосфат
ГЦ - гуанилатциклаза
ГП - глутатионпероксидаза
ИТФ - инозитолтрифосфат
КЛЦМ — киназа легких цепей миозина
КМ - кальмодулин
МН - механическое напряжение
НАДФН - никотинамидадениндинуклеотидфосфат оксидаза
НП — нитропруссид натрия
ПК-G - цГМФ-активируемая протеинкиназа
IIK-C - протеинкиназа-С
Са2+-КМ — кальций-кальмодулиновый комплекс
СГМК - сосудистая гладкомышечная клетка
СОД — супероксиддисмутаза
СПР - саркоплазматический ретикулум
ТЭА - тетраэтиламмония хлорид
ФДЭ - фосфодиэстераза
ФЛЦМ - фосфатаза легких цепей миозина
ФЛ-С - фосфолипаза С
ФЭ - фенилэфрин
цАМФ - циклический 3:5-аденозинмонофосфат
цГМФ — циклический 3:5-гуанозинмонофосфат
Н2О2 — перекись водорода
N0 — оксид азота
NOS -NO-синтаза
eNOS -эндотелиальная NO-синтаза
iNOS — индуцибельная NO-синтаза
Rh о А — малые G-белки семейства Rho
ROCK -протеинкиназа, ассоциированная с малыми G-белками семейства Rho
СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Структурно-функциональная характеристика гладких мышц
1.2 Функгщональная организагщя внутриклеточных сигнальных систем
1.3 Активные формы кислорода в регуляции сократительной активности гладких мышц
1.4 Роль цитоскелета в регуляции сократительной активности сосудистых
гладких мышц
ГЛАВА II
МАТЕРИАЛ И МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Методика исследования
2.3. Растворы и реактивы
2.4. Статистическая обработка
ГЛАВА III
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Исследование роли цитоскелета в регуляции оксидом азота сокращений сосудистых гладких мышц при действии гиперкалиевого раствора
3.1.1 Влияние нитропруссида натрия на сокращения гладкомышечных
сегментов аорты крысы, вызванные гиперкалиевым раствором
3.1.2. Влияние метиленового синего на эффекты нитропруссида натрия в гладкой мышце аорты крысы, предсокращенной гиперкалиевым
раствором
3.1.3 Влияние дестабилизации элементов цитоскелета колхицином на эффекты оксида азота в предсокращенных гиперкалиевым раствором гладких мышцах аорты крысы

3.1.4 Влияние дестабилизации микрофшаментов и микротубул цитоскелета на эффекты оксида азота в предсокращенных гиперкалиевым раствором гладких мышцах аорты крысы
3.1.5 Изучение роли цитоскелета в цГМФ — независимом действии нитропруссида натрия на сократительную активность гладкой мышцы аорты крысы
3.1.6 Влияние колхицина на эффекты дибутирил-цГМФ в предсокращенной
гиперкалиевым раствором гладкой мышце аорты крысы
3.2 Исследование роли цитоскелета в регуляции оксидом азота сокращений гладкой мышцы при действии фенилэфрина
3.2.1 Влияние нитропруссида натрия на амплитуду фенилэфрин-индуцированного сокращения гладкомышечных сегментов аорты крысы
3.2.2 Влияние дестабилизации цитоскелета колхицином на эффекты оксида
азота в предсокращенных фенилэфрином гладких мышцах аорты крысы
3.2.3. Влияние деполимеризации микрофшаментов и микротубул цитоскелета на эффекты оксида азота в предсокращенных фенилэфрином гладких
мышцах аорты крысы
3.3 Исследование влияния перекиси водорода на сократительную активность гладких мышц аорты крысы
3.3.1 Влияние перекиси водорода на сокращения гладких мышц аорты крысы, вызванные деполяризацией мембраны гиперкалиевымирастворами
3.3.2 Влияние перекиси водорода на фенилэфрин-индуцированные сокращения гладких мышц аорты крысы
3.3.3 Исследование роли калиевой проводимости мембраны в реализации эффектов перекиси водорода на сокращения гладкомышечных сегментов аорты крысы, индуцированные гиперкалиевым растворов или
фенилэфрином
3.4 Исследование влияния перекиси водорода на цитоскелет-зависимую регуляцию сократительной активности гладких мышц аорты крысы

актиновых филаментов, но не вовлекает ROCK, в то время как сокращение, индуцированное ангиотензином II, задействует как ROCK, так и интактную сеть актиновых филаментов [123].
Обнаружено, что пассивное напряжение ГМК аорты крыс линий Wistar-Kyoto и линий со спонтанной, генетически обусловленной гипертонией, обусловленное степенью полимеризации актина, но не микротрубочек, существенно модулирует сократительное действие форболового эфира [134].
Существование нового киназного пути, запускаемого при деполимеризации актиновых филаментов, продемонстрировано в экспериментах, где применение цитохалазина D вызывало фосфорилирование тирозина в молекуле протеина, связывающего F-актин, р80/85 контрактина [28].
Все больше появляется сведений, что диссоциация белков цитоскелета, активно участвующая в сократительной активности гладкомышечных клеток, является начальным этапом повреждения клеток, вызванного оксидативным стрессом [182]. Было показано на астроцитах крысы, что перекись водорода, хорошо проходящая через мембрану, усиливает полимеризацию актина и вызывает перестройку F-актина [197]. Обнаружено на культурах СГМК, что необходимым условием при индуцированной ангиотензином II активации p47phox компонента НАДН-оксидазы и дальнейшей продукции супероксид аниона является интактная сеть актиновых филаментов цитоскелета [181].
Взаимодействие СГМК и внеклеточного матрикса играет важную роль в перестройках сосудистой стенки. Микротрубочки цитоскелета принимают участие в механизмах, модулирующих сократительную активность СГМК в ответ на структурные изменения внеклеточного матрикса [144].
Деполимеризация микротрубочек в артериолах обусловливает вазоконстрикцию артериол, не связанную с повышением внутриклеточной концентрации кальция и не зависимую от эндотелия. Было предложено, что микротрубочки могут участвовать в кальциевой сенситизации СГМК, при развитии этого сократительного ответа. Разрушение микротрубочек