Внутривидовой полиморфизм грибов секции Sporotrichiella рода Fusarium и характер взаимоотношений их с серыми хлебами

• Автор: Гаврилова, Ольга Павловна
• Шифр специальности: 03.02.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 196 с.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Возбудители фузариоза зерна и их биоэкологические особенности
1.1.1. Таксономическое состоянии секции Sporotrichiella
1.1.2 Концепция вида грибов секции Sporotrichiella
1.1.3 Распространение и биологические особенности грибов секции
Sporotrichiella
1.2 Фузариоз зерновых культур
1.2.1 Распространение и вредоносность заболевания
1.2.2. Особенности проявления заболевания на зерновых культурах
'(" 1.3. Методы борьбы с возбудителями фузариоза зерна
1.3.1. Приемы, используемые для ограничения численности возбудителей заболевания
1.3.2. Устойчивость растений к заболеванию
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Мониторинг распространённости грибов рода Fusarium на зерновых
культурах
2.1.1 Оценка заражённости образцов зерна и определение видового состава грибов рода Fusarium
2.1.2 Анализ микотоксинов в зерне
2.2 Биоразнообразие грибов секции Sporotrichiella
2.2.1 Создание и поддержание коллекции штаммов грибов
2.2.2 Оценка влияния условий культивирования
2.2.3 Оценка способности к токсинообразованию
2.2.4 Оценка патогенности
2.2.5. Молекулярно-генетическая характеристика
2.2.5.1 Экстракция ДНК грибов
2.2.5.2 Метод ПЦР со специфичными праймерами
2.2.5.3 Электрофоретическое разделение амплифицированных фрагментов
2.3.1.2 Объекты исследования - сорта овса и ячменя
2.3.1.3 Характеристика образцов овса по параметрам устойчивости
к фузариозу
2.3.2 Оценка устойчивости к фузариозу образцов овса из коллекции
ВИР им. ИИ.Вавилова на искусственном инфекционном фоне
2.3.2.1 Условия проведения эксперимента
2.3.2.2 Объекты исследования - образцы овса из коллекции ВИР
2.3.2.3 Создание инфекционного фузариозного фона
2.3.2.4 Характеристика образцов овса по скороспелости и высоте
2.3.2.5 Характеристика образцов овса по параметрам устойчивости
к фузариозу
2.4. Статистическая обработка данных ■
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава 3. МОНИТОРИНГ ЗАРАЖЁННОСТИ И КОЛИЧЕСТВ МИКОТОКСИНОВ В ЗЕРНЕ ОВСА И ЯЧМЕНЯ, ВЫРАЩЕННЫХ НА ТЕРРИТОРИИ СЕВЕРО-ЗАПАДА РФ УРОЖАЯ 2007-2008 ГГ
3.1. Заражённость грибами рода Fusarium и содержание микотоксинов в зерне
3.2. Видовой состав грибов рода Fusarium и их влияние на загрязненность микотоксинами зерна овса и ячменя
Глава 4. БИОРАЗНООБРАЗИЕ ТРИХОТЕЦЕНПРОДУЦИРУЮЩИХ ГРИБОВ СЕКЦИИ SPOROTRICHIELLA
4.1. Коллекция штаммов секции Sporotrichiella рода Fusarium
4.2 Морфологическая характеристика штаммов видов секции Sporotrichiella
4.3 Характеристика штаммов секции Sporotrichiella при различных условиях культивирования
4.4 Характеристика штаммов секции Sporotrichiella по способности к токсинообразованию
4.5 Характеристика штаммов секции Sporotrichiella по патогенности
4.6 Молекулярно-генетическая характеристика штаммов видов
секции Sporotrichiella
4.6.1 Идентификация штаммов с помощью видоспецифичных праймеров
4.6.2 Характеристика штаммов методом секвенирования гена фактора элонгации 1а
Глава 5. ОЦЕНКА УСТОЙЧИВОСТИ СОРТОВ ОВСА И ЯЧМЕНЯ

К ФУЗАРИОЗУ ЗЕРНА
5.1 Оценка сортов овса и ячменя на естественном инфекционном
фоне
5.2 Оценка устойчивости к фузариозу образцов овса из коллекции
ВИР на искусственном инфекционном фоне
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
ПРИЛОЖЕНИЕ 2
ПРИЛОЖЕНИЕ 3
ПРИЛОЖЕНИЕ 4

полученной из зерна овса, пшеницы, кукурузы, риса: зерновая мука — 50 г; агар-агар — 15 г; вода — 1л. (Табл. 2.2.3.1). Автоклавировали среды 30 минут при давлении 1 атм. Автоматической пипеткой 1 мл питательной среды, охлажденной до 55°С, разливали в стерильные пенициллиновые флаконы. Перед разливом в среду добавляли сульфат стрептомицина в концентрации 100 мг/л. В качестве стандартной среды использовали КСА.
Таблица 2.2.3.1. Зерновые культуры, использованные для приготовления
питательных сред
Культура Сорт Область, район выращивания Год
овес Боррус Ленинградская, Тосненский 2006
пшеница Московская 39 Белгородская, Белгородский 2006
' кукуруза Краснодарская 507 Краснодарский, край 2006
рис неизвестен приобретен в магазине 2007
Флаконы со средами в течение двух суток выдерживали-при комнатной температуре и затем инокулировали культурами грибов. В течение последующих 7 суток флаконы выдерживали при температуре 23°С. В дальнейшем микробиологическим* пробойником (диаметр 9 мм) вырезали диск агара с культурой гриба и помещали в микропробирку объемом 1,5 мл. В качестве контроля использовали диски агара исходной среды. Повторность опыта трехкратная. Пробирки с культурами гриба до проведения экстракции токсинов хранили при температуре ~20°С. Анализ проводили в соответствие с методикой, изложенной в разделах 2.1.2.
2.2.4 Оценка патогенности
Патогенные свойства штаммов видов секции БрогоМсМеНа оценивали в лабораторных условиях с помощью инокуляции суспензией конидий грибов отрезков листьев овса сорта Боррус по адаптированной методике (Левитин и др., 1981; ЬпаИпи е! а1., 2009).
Штаммы грибов культивировали в течение 7 суток на КСА. Мицелий с обильным спороношением разводили в 2% растворе сахарозы,