Роль аномалий гена BCR-ABL в развитии резистентности к терапии иматинибом у больных хроническим миелоидным лейкозом

• Автор: Морданов, Сергей Викторович
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 96 с. : 33 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. СОВРЕМННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О BCR-ABL ЗАВИСИМЫХ МЕХАНИЗМАХ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОИДНОГО ЛЕЙКОЗА ИМАТИНИБОМ
1.1. Цитогенетические и молекулярные основы патогенеза

1.2. Биологические основы целенаправленной терапии ХМЛ ингибиторами тирозинкиназ
1.3. Механизмы резистентности ХМЛ к терапии ингибиторами тирозинкиназ
1.4. BCR-ABL-зависимые механизмы резистентности ХМЛ к терапии иматинибом
1.5.1. Амплификация гена BCR-ABL
1.5.2. Мутации гена BCR-ABL ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Характеристика пациентов
2.2. Методы исследования
2.2.1. Стандартное цитогенетическое исследование клеток костного мозга
2.2.2. Молекулярно-цитогенетические исследования
2.2.3 Молекулярно-генетические исследования
2.2.4. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ МУТАЦИЙ КИНАЗНОГО ДОМЕНА ГЕНА BCR-ABL НА РАЗВИТИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С ХМЛ К ТЕРАПИИ ИМАТИНИБОМ
3.1. Мутации киназного домена гена BCR/ABL в зависимости от типа резистентности

3.2. Влияние муталий гена BCR-ABL на динамику цитогенетического и молекулярного ответов у пациентов, получающих терапию иматинибом.
ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ АМПЛИФИКАЦИИ ГЕНА BCR-ABL НА РАЗВИТИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С ХМЛ К ТЕРАПИИ ИМАТИНИБОМ
4.1. Амплификация гена BCR/ABL в зависимости от типа резистентности
4.2. Характеристика клонов опухолевых клеток с амплификацией гена BCR-ABL
4. 3. Динамика цитогенетического и молекулярного ответов у пациентов, получающих терапию иматинибом, в зависимости от наличия дополнительных копий гена BCR-ABL
4.4. Влияние величины опухолевого клона с амплификацией гена BCR-ABL на вероятность достижения цитогенетического и молекулярного ответов ГЛАВА 5. Оценка значения аномалий гена BCR-ABL в комплексе демографических и клинико-лабораторных данных в развитии резистентности к терапии иматинибом методом дискриминантного анализа.
ГЛАВА 6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ВЫВОДЫ
Практические рекомендации:
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ELN - European LeukemiaNet
FISH - флуоресцентная in situ гибридизация
IS - International scale (международная шкала оценки уровня
транскрипта BCR/ABL)
IRIS - international randomized study of interferon and sti57
Ph-хромосома - филадельфийская хромосома
БМО - большой молекулярный ответ
БЦО - большой цитогенетический ответ
ГО — гематологический ответ
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
КМ - костный мозг
МинЦО - минимальный цитогенетический ответ
МЦО - малый цитогенетический ответ
ОБМО - отсутствие большого молекулярного ответа
ОТ-ПЦР - реакция обратной транскрипции - полимеразная цепная реакция
ОЦО - отсутствие цитогенетического ответа
ПЦО - полный цитогенетический ответ
ПДР - полимеразная цепная реакция
ПМО - полный молекулярный ответ
РНК - рибонуклеиновая кислота
XMJI - хронический миелолейкоз
ЧЦО — частичный цитогенетический ответ
ЦО - цитогенетический ответ

позволяющие классифицировтаь мутации гена BCR-ABL по сообщаемой ими степени резистентности (Von Bubnoff N., Schneller F., Peschel C. et al., 2002; Corbin A., La Rose P., Stoffregen E. et al. 2003). Данный подход можно рассматривать как функциональную классификацию мутаций, среди которых выделяют значительно, умеренно или незначительно снижающие чувствительность Вег-Abi киназы к иматинибу в тестах in vitro.
Для оценки влияния различных мутаций на связывание иматиниба с Bcr-Abl киназой используются биохимический и пролиферативный тесты. Биохимический тест определения киназной активности - определяется фосфорилирующая активность изолированной мутантной формы Abi киназы в присутствии различных концентраций иматиниба in vitro. Пролиферативный тест - оценка пролиферативной активности клеточных линий, несущих мутантную форму АЫ киназы, в присутствии различных концентраций иматиниба in vitro.
Чувствительность к иматинибу в биохимическом и пролиферативном тестах определяется показателем IC5o (inhibitor concentration 50%) -концентрацией иматиниба, снижающей активность фермента АЫ на 50% в биохимическом тесте и уменьшающей индекс пролиферации Ph позитивных клеточных линий in vitro на 50%.
Роль мутаций, которые выявляются у пациентов, резистентных к иматинибу, обязательно оценивается в тестах in vitro. В этих исследованиях подтверждается связь этих мутаций с резистентностью к иматинибу доказана в экспериментах in vitro измерением показателя IC50 в пролиферативном и биохимическом тестах.
В результате исследований выявлено, что степень чувствительности к иматинибу при различных мутациях варьирует, но всегда наблюдается повышение уровня 1С5о- Однако, если для одних мутаций (например, ТЗ151; Е255К) значения IC50 достоверно коррелируют с клиническим течением заболевания, то для других мутаций клиническое значение этого показателя лишь относительно (Laneuville Р, Dilea С, Yin OQ, et al., 2010).