Клинико-молекулярно-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I типа

• Автор: Миловидова, Татьяна Борисовна
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : 22 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Цель и задачи исследования
Научная новизна
Практическая значимость
Положения, выносимые на защиту
Апробация работы
Г Л AB AI: ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Общая характеристика наследственных моторно-сенсорных нейропатий
1.1.1 Классификация наследственных моторно-сенсорных нейропатий
1.1.2 Клинические признаки наследственных моторно-сенсорных нейропатий
1.1.3 Морфологическая основа НМСН
1.2 Молекулярно-генетическая характеристика НМСН 1 типа
1.2.1 НМСН1А (СМТ1А, М1М*118220) uHHnC(HNPP, М1М*162500)
1.2.2 НМСН1В (СМТ1В, М1М*118200)
1.2.3 НМСН1С (СМТ1С, МІМЧ01098)
1.2.4 HMCH1D (CMT1D, М1МЧ29010)
1.2.5 HMCH1F (CMT1F, М1М*162280)
1.3 Молекулярно-генетическая характеристика Х-сценленных форм НМСН 1 тина
1.3.1 НМСН1Х(СМТ1Х, М1М*304040)
1.3.2 НМСНХ5 (СМТХ5, М1М*311850)
1.4 Молекулярно-генетическая характеристика мислинопатнй с рецессивным типом наследования
1.4.1 НМСН4А (СМТ4А, МІМ*606598)
1.4.2 НМСН4В1 (СМТ4В1, М1М*603557)
1.4.3 НМСН4В2 (СМГ4В2, М1М*607597)
1.4.4НМСН4С (СМТ4С, М1М*608206)
1.4.5. HMCHLom (CMT4D, М1М*601455)
1.4.6. НМСН4Е (СМТ4Е, М1М*605253)
1.4.7 HMCH4F (CMT4F, М1М*605725)
1.4.8 HMCH4G (CMT4G, М1М%605285)
1.4.9 HMCH4I1 (СМТ4Н, М1М*611104)
1.4.10 HMCH4J (CMT4J, MIM*609390)
ГЛАВА П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
11.1 Материалы исследования
П.2 Забор венозной крови
П.З Выделение геномной ДНК из цельной крови
11.4 Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
11.5 Прямое автоматическое секвенирование
11.6 Мультиплексная пробаза висимая лигазнаяреакция (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification - MLPA)
П.7 MLPA-анализ числа копий гена РМР
11.8 Электрофорез в полиакриламидном геле
11.9 Анализ сцепления
11.10 Электронейромиография
Глава Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
111.1 Молекулярно-генетический анализ НМСН1 типа с доминан тным типом
наследования
Ш.1.1 Анализ спектра мутаций гена РМР
III.1.2 Анализ спектра мутаций гена GJB
III. 1.3 Анализ спектра мутаций гена MPZ (РО)
111.2.1 Анализ мутаций гена GDAP
111.2.2 Анализ повторяющихся мутаций генов SH3TC2, NDRG1, FGD4 и FIG
111.3 Анализ сцепления в двух больших семьях с HMCHI
111.4 Статистический анализ сходства клинической картины групп пациентов с различными типами HMCHI
111.5 Алгоритмы диагностики различных типов HMCHI
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
Список публикаций но теме диссертационной работы
Список литературы
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АД - Аутосомно-доминантный
АР — Аутосомно-рецессивный
АА — Акриламид
бисАА — метиленбисакриламид
ДНК — Дезоксирибонуклеиновая кислота
кДНК - комплементарная ДНК
НМСН - Наследственная Моторно-Сенсорная Нейропатия ПААГ — ПолиАкрилАмидный Г ель ПНС — Периферическая Нервная Система ПЦР - Полимеразная Цепная Реакция
ПДАФПолиморфизм Длины Амплификационных Фрагментов
СПИ - Скорость Проведения Импульса по двигательным или сенсорным волокнам
нервов
сМ — сантиморганида
т.п.н. — тысяча пар нуклеотидов
ЦНС — Центральная Нервная Система
ШМТ — болезнь Шарко-Мари-Тута
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
ЭНМГ - ЭлектроНейроМиоГрамма
Сх32 - Connexin 32 (белок, коннексин 32)
ЕС — экстрацеллюлялнаяпетля
FIG4 - SAC1 lipid phosphatase domain containing
EGR2 - Early Growth Response 2 (раннееразвитиеответа 2)
FGD4 - PH domain containing
GDAP1 - Ganglioside-induced Differentiation-Associated Protein 1 GJB1 - Gap Junction protein, Beta 1 (белокщелевогоконтакта)
IC - интрацеллюлярная петля
KIAA1985 (SH3TC2) - SH3 domain and TetratriCopeptide repeats
LITAF - Lipopolysaccharide-Induced TNF factor (липополисахарид-индуцирующий
TNF фактор )
MBP - Myelin Basic Protein
{Pareyson et al, 2000; Vandenberghe et al, 2002). Другие мутации гена EGR2 вызывают тяжелую форму HMCH1D (иногда называемую синдром Дежерина-Сота), которая начинается в период младенчества и раннего детства. Одной из этих мутаций является замена аминокислоты аргинина на триптофан в позиции 359 (Arg359Trp) (Timmerman et al, 1999). Две другие замены - аспартановой кислоты на тирозин в позиции 383 (Asp383Tyr) и глутамина на лизин в 412 положении (Glu412Lys) (Numakura et al, 2003; Szigeti et al, 2007). У некоторых пациентов встречаются и не сильные проявления заболевания и появляются они в более позднем возрасте. Доля мутаций гена ERG2 составляет менее 2% всех случаев НМСН 1 типа.
1.2.5 HMCH1F (CMT1F, MIM*162280)
НМСН 2E/1F (CMT2E/1F) характеризуется постепенной прогрессирующей моторно-сенсорной нейропатией с различными клиническими и электрофизиологическими признаками. Заболевание начинается в рамках первых трех десятилетий жизни. Некоторые больные имеют очень раннее начало болезни в течение первого десятилетия жизни. У больных наблюдаются трудности при ходьбе и беге, связанные с прогрессирующей дистальной слабостью и дистрофией нижних конечностей. Парезы дистальной части нижней конечности варьируют от легкой слабости полного паралича дистальной группы мышц. Сухожильные рефлексы снижены или отсутствует. Сенсорные нарушения сильно не выражены, но присутствуют у всех затронутых лиц. Часто наблюдаются «полая» стопа и деформация кисти по типу «когтистой лапы».
Hurst с соавторами с помощью Southem-блот анализа и метода гибридизации in situ локализовал ген NEFL на хромосоме 8 (8р21) (Hurst et al, 1987). Somerville et al. так же локализовал этот ген на хромосоме 8 посредством метода гибридизации insitu и назвал его NF68 (Somerville et al, 1988). Также ими были найдены вторичные сайты гибридизации на центромерной области хромосомы 2 и длинном плече хромосомы 7, где находятся предолагаемые локусы для других промежуточных нейрофиламентов.
Ген NEFL состоит из четырех экзонов и кодирует небольшой белковый компонент (легкую цепь) нейрофиламентов, состоящий из 543 аминокислот (рис.