Роль бактериальных биопленок в этиопатогенезе мочекаменной болезни

• Автор: Толордава, Этери Ромеовна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 120 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Классификация мочевых камней.
1.2. Эпидемиологические и этиологические факторы мочекаменной болезни.
1.3. Методы лечения мочекаменной болезни.
1.4. Роль микроорганизмов в камнеобразовании.
1.5. Биопленка: определение, методы исследования,
формирование и средства борьбы с ними.
1.5.1. Методы исследования биопленок.
1.5.2. Роль биопленки в хронизации инфекционной болезни.
1.5.3. Современные подходы в борьбе с биопленками.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Микроорганизмы образуют биопленки на мочевых камнях.
3.2. Микрофлора мочевых камней.
3.2.1. Тестирование уропатогенов на наличие уреазной активности и генов, кодирующих факторы патогенности.
3.2.2. Сравнительный анализ микробного пейзажа мочевых камней и мочи, забранной до оперативного вмешательства.
3.3. Влияние антибактериальных препаратов на процесс формирования биопленок и на уже сформированные биопленки.
3.3.1. Влияние антибиотика.

3.3.2. Влияние препарата «лапрот» (на основе человеческого лактоферрина) и антибиотика
ципрофлоксацина на рост и процесс образования
биопленок клиническим изолятом Pseudomonas aeruginosa in vitro.
3.3.3. Влияние фаговых препаратов на процесс
формирования биопленок клиническим изолятом
Escherichia coli.
3.4. Ультраструктура мочевых камней.
3.5. Зависимость формирования биопленок от химического состава камня.
3.6. Способность выделенных микроорганизмов формировать биопленки на поверхностях различной природы.
3.7. Экспериментальное моделирование процесса образования биопленки.
3.8. Действие препарата «споробактерин» при моделировании процесса образования биопленки на мочевых камнях.
ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение
Актуальность темы
Проблема формирования бактериями биопленок широко изучается во всем мире. Огромное количество исследований, посвященных процессу образования биопленок и его генетическому контролю, выполненных на лабораторных моделях (на стекле или пластике, обеспечивающих экономичные подходы для широкомасштабных скрининговых экспериментов), позволили получить принципиальные знания о механизмах формирования биопленок патогенными бактериями (Costerton J.W. et al. 1999., Смирнова Т.А. и соавт. 2010., Романова Ю.М. и соавт. 2011). Особенно важную роль биопленки играют в формировании очагов хронической инфекции при заболеваниях мочевыделительной системы. Мочекаменная болезнь (уролитиаз, МКБ) является одним из распространенных урологических заболеваний. По последним данным это заболевание встречается не менее чем у 3% населения всего мира (Лопаткин H.A. и соавт. 2000). Инфекционные заболевания мочевыводящих путей (ИМП), являются прямыми или косвенными провокаторами МКБ (Вощула В.И. и соавт. 2007). При ИМП отмечается высокий уровень рецидивов инфекции, которая принимает характер хронической с частыми обострениями. При лечении МКБ широко используется различный инструментарий в виде дренажных систем, катетеров, стентов, на поверхности которых могут формироваться биопленки, что приводит к развитию «катетер-ассоциированной ИМП», или «биофильм-инфекции». (Costerton J. 1995, 1999; Романова Ю.М. и соавт. 2004, 2011; Перепанова Т.С. и соавт. 2011). Бактерии, инфицирующие мочевыводящие пути, также способствуют новому камнеобразованию (Лопаткин H.A. и соавт. 2000; Лопаткин H.A. и соавт. 2007).
Интенсивное развитие современной молекулярно-биологической и электронно-микроскопической методической базы сформировало качественно новый уровень исследований, позволяющий анализировать развитие инфекционного процесса, непосредственно используя клинически доступные биоматериалы от больных.
Основной стратегией борьбы с инфекционными осложнениями МКБ является антибиотикотерапия, которая в ряде случаев оказывается безуспешной. Особый интерес вызывает проблема неэффективного превентивного (предоперационного) назначения антибиотиков при удалении камней из почечной лоханки, так как в 87,5% случаев развивается пиелонефрит при отрицательных данных бактериологического анализа мочи.

genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma species, Gardnerelia vaginalis, Candida albicans
Клинические изоляты, использованные в работе. В экспериментальной части работы были использованы следующие клинические изоляты:
Название микроорганизма Кол-во Источник клинического изолята
Escherichia coli 21 моча
Escherichia coli 12 камень из почки
Enterococcus faecalis 21 камень из почки
Enterococcus faecium 15 камень из почки
Staphylococcus epidermidis 11 камень из почки
Staphylococcus aureus 4 камень из почки
Staphylococcus haemolyticus 28 камень из почки
Klebsiella pneumonia 13 камень из почки
Proteus mirabilis 22 камень из почки
Acinetobacter baumannii 4 камень из почки
Morganella morganii
Pseudomonas aeruginosa 22 камень из почки
Pseudomonas aeruginosa PA103 «-» референсный штамм
Pseudomonas aeruginosa PAO «-» референсный штамм любезно предоставлен д.м.н. В.Н. Крыловым (ГНЦ ВНИИ Г енетика).