Киллерная активность клинически значимых дрожжей Malassezia и Candida albicans

• Автор: Ожован, Ирина Михайловна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 116 с. : ил.

Содержание:
Содержание:
Обозначения и сокращения
1. Введение
2. Обзор литературы
Глава 2.1. Антагонизм между микроорганизмами
Глава 2.2. Характеристика антагонистических субстанций дрожжей: химическая природа, специфичность, наследование
2.2.1. Микоцины
2.2.2. Микроцины
Глава 2.3. Современное представление о механизме действия киллерных токсинов (микоцинов)
2.3.1. Общие представления о механизме действия микоцинов
2.3.2. Механизм действия Kl, К2 и К28 микоцинов
Глава 2.4. Методы определения антагонистической активности
Глава 2.5. Микоцинообразование у клинически значимых дрожжей
Глава 2.6. Современные аспекты применения явления микоцинообразования
Глава 2.6. Заключение по обзору литературы
3. Собственные исследования
Глава 3.1 Материалы и методы исследования
3.1.1. Объекты исследования и методы культивирования
3.1.2. Методы оценки киллерной активности штаммов дрожжей
3.1.3. Биохимические методы
Глава 3.2. Оценка киллерной активности штаммов клинически значимых дрожжей и выбор наиболее активных штаммов-продуцентов
3.2.1. Malassezia
3.2.2. Candida albicans
3.2.3. Взаимное влияние Malassezia и Candida albicans
Глава 3.3. Характеристика некоторых антагонистических субстанций, продуцируемых штаммами-киллерами
3.3.1. Malassezia furfur
3.3.2. Candida albicans
Глава 3.4. Модификация метода оценки целостности клеток
4. Заключение
5. Выводы
6. Список литературы
Обозначения и сокращения
pH - водородный показатель КОЕ - колониеобразующие единицы кДа - килодальтон
ВСР - бромкрезоловый пурпурный (краситель)
ЦПМ - цитоплазматическая мембрана ККЖ - концентрат культуральной жидкости КП - киллерный пептид

1. Введение
Актуальность проблемы
Антагонизм широко распространен среди различных групп микроорганизмов и обусловлен продукцией различных антимикробных веществ. Образование антимикробных веществ, в частности белков, токсичных для других организмов, известно у головневых грибов [Koltin Y., Day P.R., 1975], плесневых и других грибов [Mizutani et al., 1982], а также у бактерий [Konisky J., 1982; Блинкова Л.П., 2007]. Подобные антагонистические взаимоотношения обнаружены и у дрожжей [Bevan Е.А. et al., 1963; Woods D.R., Bevan E.A., 1968; Bussey H., 1972; Comitini F. et al., 2004; Paluszynski J.P. et al., 2007; Wang X., et al., 2007]. Белоксодержащие вещества с молекулярной массой от 10 кДа до 160 кДа, синтезируемые дрожжами и угнетающие или полностью подавляющие развитие других штаммов, видов и даже родов, принято называть киллерными токсинами или микоцинами [Golubev W., 1998].
Так называемые штаммы-убийцы (киллеры) дрожжей, продуцирующие белковые токсины фунгицидного или фунгистатического действия, известны уже более 40 лет и особенно детально исследованы у сахаромицетов [Голубев В.И. и Чуркина Л.Г., 1990; Наумов Г.И. с соавт., 2005]. Штаммы, образующие микоцины, обнаружены среди многих родов дрожжей, в том числе Candida, Cryptococcus, Rhodotorala, Kluyveromyces, Debaryomyces, Hansenula, которые встречаются в клинической практике [Young T.W., 1987; Starmer W.T. et al., 1987; Magliani W. et al., 1997; Golubev W., 1998; Schmitt M.J., 2002].
Наиболее распространенными в клинической практике являются дрожжи Candida albicans и Malassezia spp.
Дрожжи рода Malassezia являются представителями нормальной микрофлоры кожи человека и теплокровных животных. В человеческой популяции от 74 до 93% здоровых индивидуумов в возрасте от 14 до 60 лет

Таблица 5. Потенциальное применение киллерных токсинов
Сфера использования Применение Источник литературы
Биологическая борьба в сельском хозяйстве Антагонистическая активность против патогенных грибов растений. Предотвращение аэробной порчи силоса. Kitamoto Н.К. et al, 1993; Kitamoto Н.К. et al, 1999; Walker G.M. et al, 1995
Ферментация напитков Предохранение от нежелательного заражения вин, пива и т.п. Javadekar et al, 1995; Petering et al, 1991 Наумов Г.И. и др., 1973; Наумов Г.И. и др., 1986
Биологические исследования эукариотической клетки Изучение биосинтеза веществ, клеточных процессов, выделения белков Schmitt M.J., 1995; Wickner R.B.,1996
Пищевые технологии Консервирование Lowes K.F. et al, 2000; Palpacelli V. et al, 1991
Г енетика Селекция гибридов при слиянии протопластов, технологии рекомбинантных ДНК Javadekar et al, 1995; Vondrejs V. et al, 1996
Медицина Антагонизм против патогенов Polonelli L. et al, 1991,2008
Таксономия Чувствительность к киллерным токсинам может указывать на определенную филогенетическую принадлежность Golubev W.I., 1998; Kurtzman C.P., 1998