Структурно-функциональные особенности сократительных и проводящих кардиомиоцитов крыс в аспекте гипоталамической нонапептидергической регуляции (экспериментально-гистологическое) исследование

• Автор: Солодовников, Виталий Валерьевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Оренбург
• Количество страниц: 120 с. : 35 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СОКРАТИТЕЛЬНЫХ И ПРОВОДЯЩИХ КАРДИО-МИОЦИТОВ В АСПЕКТЕ ИХ РЕАКТИВНОСТИ И ПЛАСТИЧНОСТИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и экспериментальные методы
2.2 Методики, использованные при обработке полученного материала
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Морфофункциональные параллелли между структурно-функциональной реорганизацией кардио-миоцитов и реактивными изменениями нонапептидер-гических нейросекреторных клеток гипоталамуса в условиях эмоционально-болевого стресса
3.2. Характер структурно-функциональных изменений кардиомиоцитов крыс при культивирование in vivo по методу Ф.М. Лазаренко
3.3. Органотипическое сокультивирование миокарда и крупноклеточных ядер гипоталамуса по методу Ф.М. Лазаренко и в диффузионных камерах
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение
Актуальность проблемы.
Изучение реактивности и пластичности клеток и тканей по-прежнему относится к числу актуальных вопросов морфологии, требующих дальнейшего разрешения. Задача эта важна не только с позиций учения о биологии тканей, но и определена запросами медицинской практики.
Разработка этой проблемы в течение длительного времени является предметом кропотливого исследования, однако многие ее аспекты до сих пор остаются дискуссионными. Особенно это касается раскрытия нейроэндокринных механизмов регуляции реактивно-пластических свойств миокарда. При этом на первый план выступает необходимость изучения морфофункциональных механизмов, обеспечивающих расширение диапазона адаптивных свойств различных кардиомиоцитов, в том числе, с позиции их нейроэндокринного контроля.
Несмотря на то, что структурной реорганизации миокарда млекопитающих животных и человека, наблюдаемой в различных экспериментальных и клинических условиях, посвящена обширная литература (Румянцев П.П., 1967; Katzberg Р. et al., 1977; Бродский В.Я., 1981; Большакова В.H., 1991; Дедков Э.И., 1995; Швалев В.Н. с соавт. 1992; Павлович Е.Р., 2003, 2006; Махова А.Н., 2003; Фарех Ф.М.И1., 2004; Саликова С.П., 2008), многие аспекты реактивных, адаптивных и репаративных преобразований сократительных и проводящих кардиомиоцитов нуждаются в уточнении. В первую очередь это касается диапазона гисто- и органотипических свойств структурных элементов миокарда при воздействиях на организм различных экстремальных факторов и установления роли нейроэндокринных факторов в регуляции процессов репаративных гистогенезов (Zachary D.D. et al., 1987; Стадников

A.A., 1989,2001).
Известно, что в дефинитивном миокарде млекопитающих исчерпан обособленный пул миогенных кардиомиоцитов (Sasaki K. et al., 1970), а в условиях различных экспериментальных воздействий отмечаются процессы гиперплазии и гипертрофии сердечных миоцитов, внутриклеточная регенерация и незначительная инициация синтеза ДНК (Румянцев П.П., 1982; Махова А.Н., 2003; Фарех Ф.М.Ш., 2004). Тем не менее, в научной литературе имеются указания на то, что в реактивно измененном миокарде взрослых экспериментальных животных возникают кардиомиоциты с признаками бласттрасформации (Стадников A.A., 2001). Однако до сих пор убедительных морфологических доказательств в этом плане крайне мало.
В последние годы значительное внимание уделяется изучению гипоталамической нейросекреции, роли и значимости нонапептидных гормонов подбугорья в позитивной регуляции клеточного и тканевого гомеостаза, в том числе и репаративных гистогенезов (Стадников A.A., Шевлюк H.H., Козлова А.Н., 2006; Стадников A.A., Шевлюк H.H., 2006; Канюков В.Н. с соавт., 2007; Стадников A.A., 2008; Саликова С.П., Бахтияров Р.З., 2008). Вместе с тем, относительно подобного влияния гипоталамических нонапептидов на различные виды кардиомиоцитов фактов крайне мало, и имеющиеся сведения характеризуются противоречивостью.
Требуют также уточнения сведения о значении, которое имеют различные клеточные элементы миокарда (кардиомиоциты, немышечные клетки сердца) на этапах адаптации и репарации, о влиянии на эти процессы внутри- и межсистемных регуляторных факторов, и, в первую очередь, это касается выяснения значения гипоталамических нонапептидов в регуляции процессов ультраструктурной реорганизации сократительных и проводящих кардиомиоцтов, особенно в условиях воздействия на организм дестабилизирующих факторов.

фронтально, ориентируясь по перекресту зрительных нервов. Затем глазными ножницами клиновидно вырезались небольшие фрагменты в области залегания супраоптических (СО) и паравентрикулярных (ПВ) ядер. Извлеченные фрагменты гипоталамуса помещались в другую стерильную чашку Петри с питательной средой 199. Для контроля на каждую стадию опыта вместо участков гипоталамуса помещались фрагменты лобных долей конечного мозга тех же крыс-доноров. Для оценки правильности выделения гипоталамических ядер проводился выборочный анализ взятого для трансплантации материала и оставшихся после выделения ядер частей гипоталамуса.
Прооперированных животных содержали в стандартных условиях вивария. В каждой серии опытов взятие материала осуществляли через 2, 4, 8, 12 суток от начала имплантации.
Органотипическое сокультивирование in vivo сократительных и проводящих кардиомиоцитов с супраоптическими и паравентрикулярными ядрами гипоталамуса в диффузионных камерах (ДК) проведено на 24 крысах. Контрольное культивирование КМЦ (без ядер гипоталамуса) проведено на 8 животных.
ДК изготавливались из полихлорвиниловых капсул на основе модификации методов G. Algire et al. (1954), Т.П. Евгеньевой (1983, 1994),
Э.И. Дедкова (1995, 1996). Мы использовали модификацию ДК (С.Д. Валов, 1998) на основе рацпредложения № 1241, выданного 23.10.98 г. Оренбургской государственной медицинской академией. При этом применялись миллипоровые фильтры фирмы «Sinpor» с величиной пор 0,3 мкм. В полость камеры помещали 3-4 фрагмента миокарда левого желудочка, проводящей системы и фрагментов гипоталамуса, содержащих паравентрикулярные и супраоптические ядра (размером по 3 мм3). Выделение ядер производили выше описанным способом. Камера закрывалась плотно с двух сторон крышками с фильтрами. Готовые камеры помещались в стерильную чашку Петри со средой 199. Крысам-