Использование культуры тканей in vitro в селекции гороха

• Автор: Соболева, Галина Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Орел
• Количество страниц: 174 с. : ил.

Общая характеристика работы
1. Обзор литературы
1.1. Методы культивирования изолированных клеток и тканей растений
1.2. Сомаклональная изменчивость
1.3. Применение методов культуры тканей в селекции растений
1.4. Методы регенерации in vitro гороха
2. Условия, материал и методика проведения исследований
2.1. Место проведения исследований и почвенно-климатические
условия
2.2. Исходный материал
2.3. Методика проведения исследований
3. Индукция процессов каллусогенеза и морфогенеза в каллусных тканях гороха
3.1. Индукция процессов дедифференциации и каллусогенеза
3.2. Индукция процессов морфогенеза в каллусной ткани гороха
3.3 Индукция процессов ризогенеза гороха
4. Разработка параметров длительного субкультивирования каллусов гороха с сохранением высокого морфогенетического потенциала
4.1 Длительное субкультивирование каллусных тканей гороха
4.2 Морфогенез в длительно культивируемых каллусных культурах гороха
4.3. Регенерация корнесобственных растений регенерантов Ro
4.4. Морфобиологические особенности регенерантных растений гороха
5. Селекция каллусов гороха in vitro на устойчивость к осмотическому стрессу
5.1 Определение сублетальных и летальных концентраций селективного фактора

5.2 Субкультивирование каллусных линий на селективных средах
5.3. Индукция стабильного морфогенеза у толерантных к осмотическому
• стрессу каллусных линий гороха
5.4. Морфофизиологическая оценка регенерантных линий гороха на засухоустойчивость
6. Микроразмножение форм гороха in vitro
Выводы
Предложения и рекомендации для селекции
Литература

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Зерновые бобовые культуры занимают особое место среди сельскохозяйственных растений как основные источники высококачественного растительного белка. Горох является ведущей зернобобовой культурой, широко возделываемой в различных регионах России, где занимает около 80% площадей зернобобового клина (Зеленов А.Н., 2001). Традиционный селекционный процесс, основанный на применении половой гибридизации, как средства передачи генетической информации, позволил достичь значительных успехов в повышении урожайности и качества зерна гороха.
Интенсификация сельскохозяйственного производства ставит перед селекционерами сложные задачи по созданию новых сортов, отличающихся высокой урожайностью, устойчивостью к болезням и вредителям, стрессовым факторам внешней среды, высокой пластичностью. Для создания таких сортов необходим поиск и привлечение современных достижений науки, ускоряющих и повышающих результативность селекционного процесса. Одним из наиболее динамично развивающихся направлений, ориентированных на создание нового исходного материала для селекции, является использование биотехнологических методов.
Культура клеток и тканей ш vitro в настоящее время находит применение в широком диапазоне биологических исследований. Это стало возможным в результате разработки технологий культивирования тканей и клеток с последующей регенерацией из них фертильных растений. Подобные технологии отстают в своем развитии применительно к такой экономически важной зернобобовой культуре как горох.
При культивировании клеток и тканей гороха на искусственных средах имеются многочисленные доказательства появления генетической изменчивости, как на клеточном уровне, так и у растений-регенерантов

- содержание воды в тканях методом высушивания;
- величина ассимиляционной поверхности листьев методом высечек;
• - масса, объем и величина поглощающей поверхности корневой
системы;
- продуктивность семяобразования по процентному отношению числа
выполненных семян к числу семязачатков в бобах;
-семенная продуктивность растений по числу бобов, числу семян и их сухой массе в расчете на растение;
Показатели засухоустойчивости определяли согласно «Практикуму по физиологии растений» под редакцией Н.Н. Третьякова (1990).
Основные количественные показатели подвергали вариационностатистической обработке (Доспехов Б.А., 1985, Рокицкий П.Ф., 1974) с использованием ПЭВМ.