Варианты хромосомной транслокации Т(9;22) у больных хроническим миелолейкозом

• Автор: Богданов, Константин Викторович
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 127 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

1. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
2. ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1.Современные взгляды на возникновение лейкозов. Роль протоонкогенов в развитии опухолевых процессов
1.2. Хромосомные изменения и лейкозы
1.2.1. Хронический миелолейкоз и его лечение
1.3. Протоонкоген аЫ, ген Ьсг, кодируемые ими белки, их структура и функции
1.4. Молекулярная организация генома в районе точки разрыва при хромосомной транслокации 1(9;22)
1.5. Методы детекции хромосомной транслокации Д9;22)
1.6. Применение метода РТ-ПЦР в клинической практике для определения хромосомной транслокации К9;22)
1.6.1. Применение метода РТ-ПЦР для диагностики и мониторинга минимальной остаточной болезни (МОБ)
1.6.2. Применение метода РТ-ПЦР для диагностики ХМЛ и РЬ-позитивного ОЛЛ
1.7. Клиническое и прогностическое значение вариантов хромосомной транслокации 1(9 ;22) у больных ХМЛ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал исследования. Краткая характеристика общей группы больных
2.2. Цитогенетическое исследование
2.2.1. Получение и культивирование клеток костного мозга и крови
2.2.2. Приготовление препаратов хромосом

2.2.3. Дифференциальное окрашивание хромосом
2.2.4. Анализ хромосом и принципы кариотипирования
2.3. Молекулярно-биологический метод исследования
2.3.1. Изолирование лейкоцитов из периферической крови больных ХМЛ и доноров путем лизирования раствором 0.83% хлорида аммония
2.3.2. Выделение РНК из изолированных лейкоцитов
2.3.3. Выделение РНК из клеток линии К562
2.3.3а. Контроль качества РНК, выделенной из периферической крови больных ХМЛ и клеток линии К
2.3.4. Проведение двухступенчатой РТ-ПЦР
2.3.4а. Синтез кДНК в реакции обратной транскрипции
2.3.46. Амплификахщя кДНК в полимеразной цепной реакции
2.3.5. Идентификация продуктов РТ-ПЦР
2.3.6. Распределение больных по группам. Статистическая обработка полученных результатов 59 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Исследование качества образцов РНК, полученных из периферической крови больных ХМЛ и клеток линии К
3.2. Оценка чувствительности двухступенчатой РТ-ПЦР с использованием коммерческого аналога ГО полимеразы, ТЕТ-7, термостабильной ДНК-полимеразы
3.3. Изучение частоты встречаемости вариантов хромосомной транслокации 1(9;22) у больных ХМЛ
3.4. Сравнительная характеристика основных клиникогематологических показателей у больных ХМЛ с вариантами транслокации Ь3а2 и Ь2а2
3.5. Сравнительная прогностическая характеристика ХМЛ с разными вариантами транслокации Ь3а2 и Ь2а2

3.5.1. Определение зависимости между вариантом транслокации (Ь3а2 или Ь2а2) и достижением полной гематологической ремиссии у больных ХМЛ, получавших терапию интерфероном-альфа
3.5.2. Определение зависимости между вариантом транслокации (Ь3а2 или Ь2а2) и достижением полной гематологической ремиссии у больных ХМЛ, получавших терапию миелосаном и гидроксимочевиной
3.5.3. Определение зависимости между вариантом транслокации (Ь3а2 или Ь2а2) и достижением цитогенетической ремиссии (редукция РЬ-позитивного лейкозного клона) у больных ХМЛ, получавших терапию интерфероном-альфа
3.5.4. Определение зависимости между вариантом транслокации (Ь3а2 или Ь2а2) и достижением цитогенетической ремиссии (редукция РЬ-позитивного лейкозного клона) у больных ХМЛ, получавших терапию миелосаном и гидроксимочевиной
3.5.5. Определение зависимости между группами больных ХМЛ с разными вариантами транслокации (Ь3а2, Ь2а2) и общей
продолжительностью жизни этих пациентов при использовании терапии интерфероном-альфа
3.5.6. Определение зависимости между группами больных ХМЛ с разными вариантами транслокации (Ь3а2, Ь2а2) и общей
продолжительностью жизни этих пациентов при использовании терапии миелосаном и гидроксимочевиной
3.5.7. Определение зависимости между группами больных ХМЛ с разными вариантами транслокации (Ь3а2, Ь2а2) и длительностью хронической фазы ХМЛ при использовании терапии интерфероном-альфа
3.5.8. Определение зависимости между группами больных ХМЛ с разными вариантами транслокации (Ь3а2, Ь2а2) и длительностью
+ INF-a
Рис.5. Сигнальные пути регуляции клеточной пролиферации с участием тирозинкиназы BCR-ABL.
Список использованных сокращений:
BCR-ABL - слитный белок, нерецепторная тирозинкиназа; INF-a - интерферон-альфа;
STAT (STAT1; STAT5) - белки активаторы транскрипции; Ras - ГТФ-связывающий белок;
Р53 - белок (дикий тип), опухолевый супрессор; Wafl - белок, ингибитор циклинзависимых киназ;
cdk2 - циклинзависимая киназа; pRb - белок ретинобластомы (ppRb - фосфорилированная форма белка ретинобластомы)