Белки транскрипционно-активных участков хроматина

• Автор: Караванов, Александр Аркадьевич
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 363 c. : ил

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
I. Общие понятия о структуре хроматина
1. Нуклеосомный уровень организации хроматина
2. Фибриллы нуклеосом
3. Супрафибриллярная упаковка хроматина
4. Организация супрафибрилл хроматина
в интерфазном ядре
5. Упаковка хроматина в метафазных хромосомах
II* Негистоновые белки хроматина (НЕБ)
1. Общая характеристика НЕБ как группы
2. НЕБ и процесс транскрипции
3. НЕБ, прочно связанные с хроматином
4. Белок А
5. Группа белков высокой подвижности
( НМО - белки)
1. Свойства НМЗ-- белков
2. Ткане- и видоспецифичность
3. Функция
Ш* Структура транскрипционно- активных
участков хроматина
1.Использование нуклеаз для изучения транскрипцинно-активного хроматина
2. Недометилирование ДНК и роль отдельных ее
участков в составе активного хроматина

3. Гистон Щ и его роль в организации
активных участков хроматина
1У. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Получение эритробластической селезенки
2. Получение ретикулоцитов
3. Выделение мРНК из ретикулоцитов
1. Выделение полисом
2. Выделение тотальной РНК
3. Хроматография тотальной РНК на колонках
олиго-дТ и "11Н.госе^$ "
4* Ультрацентрифугирование РНК в линейном
градиенте плотности сахарозы
5. Электрофорез РНК в полиакриламидном геле
6. Бесклеточная система синтеза белка из
зародышей пшеницы
7. Идентификация продуктов трансляции
4. Выделение ядер из тканей шекопитающих
I. Выделение ядер из яиц плодовой мушки
5. Выделение и очистка хроматина из ядер нормальной
и эритробластической селезенки мыши
1. Фракционирование на легко и прочно
связанные белки хроматина
2. Система транскрипции хроматина
6. Выделение ДНК
1. ДНК из ядер селезенки мыши

2. Выделение меченной К - тимидином ДНК
3. Гибридизация Н®- кДНК глобина мыши с ДНК
клеток эритробластической селезенки
7. Обработка ядер нуклеазами
8, Фракционирование белков
9» Получение индивидуальных фракций
НЮ--белков «
I* Электрофоретический анализ белков
2. Препаративное получение белков
методой электроэлзоции
3. Изоэлектрофокусирование белка в пластинах полиакриламидного геля
4. Серебрение белков после электрофореза
и изоэлектрофокусирования
5. Определение аминокислотного состава
6. Определение Ы. - концевой аминокислоты
7. концевой анализ с последовательным
отщеплением аминокислот
8. Определение молекулярной масоы
белка
9. Исследование способности образовывать комплексы с

10. Иодирование белков in vitro
11. Изучение межбелковых взаимодействий
12. Нагрузка меченным Ix*u белком
эритроцитов
10. Радиоавтография клеточных препаратов
I. Анализ белка, включившегося в
клетки
II* Очистка лимфоцитов человека и
получение из них ядер

возможных вариантов объяснения необходимости повторяющихся последовательностей именно в этих участках: а) чисто структурно они могут быть необходимы для стабилизации или стягивания петли (по механизму реассоциации), б) повышенная концентрация каких-либо последовательностей может быть необходима для опознавания либо белками матрикса, либо регуляторными белками и в) они просто-напросто могут быть сигналами начала и конца одной петли ДНК. Какой из этих вариантов окажется справедливым должны показать дальнейшие исследования.
В одной из работ были получены антитела к белкам матрикса и ИЗучеНО ИХ распределение В Пределах ЯДра / Campbell et al., 1979 /• Существует несколько моделей перехода от интерфазного хроматина к метафазному. Они основаны на разных допущениях. Так, Бак с соавт.
/вак et al., 1977 / основную роль отводят сворачиванию исходной

нуклеосомной фибриллы вначале в 300 А суперспираль, а затем в поо о
дую трубку диаметром 4000 А и толщиной стенки 300 А. Эта трубка имеет строение сходное с соленоидом. Другие авторы /Sedat, Manueli-dis, 1978 /, исходя из значительного сходства белков адерного матрикса и хромосомного остова, предполагают основную роль именно этих структур при компактизации в метафазную хромосому, считая основным и движущим моментом в компактизации их скручивание. Эти модели привлекают тем, что не вводят дополнительных механизмов и структур в и так достаточно сложную схему. Однако есть и другие предположения / Util ling ер, Johnson, 1980 / •
Заключая эту главу, можно сказать, что в настоящее время организация хроматина перестала быть такой загадочной, какой она была еще десять лет назад. Выяснены многие детали и механизмы его структуры, стало ясно, что она подчиняется определенным закономерностям на каждом уровне организации. Хотя и остается еще целый ряд нерешенных вопросов, но уже ясно, что в ближайшее время они будут