Экспериментальная модель денервационно-реиннервационного синдрома: облегчающие эффекты семакса и урокиназы

• Автор: Вардья, Ирина Вадимовна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 127 с.

Маме, научившей меня говорить, и моему научному руководителю Ольге Петровне Балезиной, научившей меня говорить так, чтобы меня понгшали.
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
I. Общая характеристика денервационно-реиннервационного синдрома
1.1. Влияние аксотомии на нейроны
1.2. Влияние аксотомии на скелетную мышцу
II. Процесс регенерации и роста поврежденных аксонов в ПНС
III. Факторы роста периферических нервов
III. 1. Фактор роста нервов (NGF)
111.2. Мозговой нейротрофический фактор и нейротрофины
111.3. Цилиарный нейтротрофический фактор
III.4. Инсулиноподобные факторы роста (IGF)
III.5. Пептиды семейства меланокортинов
IV. Нейротрофические эффекты АКТГ и структурно сходных пептидов
V. Источники и механизмы действия АКТГ и родственных пептидов на рост и активность нервно-мышечного аппарата
V. 1. Источники АКТГ в организме
V.2. Механизмы действия пептидов семейства АКТГ
V.3. Эффекты АКТГ in vitro
VI. Клиническая практика использ о вайя пептидов семейства а-МСГ/АКТГ для
лечения нервно-мышечных заболеваний
VII. Пептидный препарат “СЕМАКС“ и его свойства
VIII. Общая характеристика строения и свойств урокиназы и тканевого активатора
плазминогена
VIII. 1. Химическая структура фермента урокиназы
VIII.2. Химическая структура тканевого активатора плазминогена
IX. Роль и функции урокиназы и тканевого активатора плазминогена в
регенерации и росте нервной ткани in vitro и in vivo
X. Содержание и функции урокиназы и ТАП в ПНС
X. 1. Во время эмбрионального развития
Х.2. В синаптической пластичности
Х.З. Во время посттравматической регенерации нерва
МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
I. Объекты исследования
И. Хирургические методы
III. Мофометрические методы
IV. Электрофизиологические методы
IV. 1. Метод регистрации суммарного потенциала действия в мышце in situ
(миограмма)
IV.2. Метод регистрации суммарного потенциала действия нерва in vitro
IV.3. Метод регистрации суммарного ИД нерва скелетной мышцы EDL
in vitro
IV.4. Обработка и анализ данных
V. Методы введения веществ
VI.1. Хроническое введение препаратов
VI.2. Однократное локальное введение веществ
VI. Используемые в работе вещества
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
I. Исследование процессов регенерации аксонов в составе малоберцового
нерва мыши после его раздавливания. Морфометрический и электрофизиологический анализ
1.1. Морфометрический анализ
1.2. Электрофизиологический анализ
1.2.1. Исследование электрической активности моторных волокон
малоберцового нерва мыши в первые две недели после пережатия нерва
1.2.2. Исследование хода реиннервации EDL мыши в первые две недели
после пережатия нерва с помощью М-ответа мышцы
1.2.3. Исследование хода регенерации сенсорных волокон малоберцового нерва в первые две недели после пережатия нерва
II. Исследование воздействия пептидного препарата семакс на процесс
регенерации аксонов малоберцового нерва мыши
II. 1. Морфометрический анализ влияния хронического внутрибрюшинного
введения семакса на регенерацию аксонов малоберцового нерва мышей.
синтеза и секреции урокиназы (моторными и чувствительными нейронами); повышение синтеза и секреции ТАП некоторыми сенсорными аксонами; на 8 день после раздавливания нерва протеолитическая активность в нерве обусловлена ТАП, который выделяется и Шванновскими клетками.
Таким образом, запуск повышения синтеза урокиназы после травмы нерва происходит с некоторой задержкой, по крайней мере на 24 часа от момента травмы.
Важно подчеркнуть, что и урокиназа и ТАП обладают также плазминоген-независимой протеолитической активностью, включающей в себя активацию нейрон-чувствигелы-юго фактора роста - HGF/SF [Mars et al., 1993] и способность непосредственно растворять молекулы внеклеточного матрикса, например фибронектин [McGuire and Seeds, 1990; Quigley et al., 1987]. Урокиназа способна активировать металлопротеиназы - ММР-2, субстратом которых являются желатины, коллагены и эластин [Keski-Oja et al., 1992].
F[apядy с вышеперечисленными функциями активаторов плазминогена необходимо упомянуть о том, что урокиназа (и ТАП) являются хемоаттрактантами для нейронов. Было показано, что культивируемые in vitro центральные нейроны направленно и ускоренно прорастали через трансфецированные урокиназной плазмидой астроциты [Muir, 1998].
Таким образом, на основании приведенных в обзоре литературных данных можно предположить, что в ходе посттравматической регенерации
периферического нерва реализуются следующие процессы при участии эндогенных активаторов плазминогена: 1) активация плазминогена, каскада плазмина, латентных металлопротеиназ; 2) направленная локальноя деградация внеклеточного матрикса (облегчение проростания и миграции); 3) запуск внутриклеточного каскада реакций после связывания урокиназы с рецептором; 4) высвобождение из внеклеточного матрикса факторов роста и активация некоторых из них; 5) высвобождение из внеклеточного матрикса цитокинов; 6)
хемоаттрактация клеток воспаления; 7) стимуляция ангиогенеза.
Вопрос о том. способна ли экзогенная урокиназа влиять на
посттравматическую регенерацию аксонов периферического нерва до сих пор не исследован.