Состояние дистрофинового слоя и макромолекулярная проницаемость сарколеммы волокон скелетных мышц в условиях тренировки и гравитационной разгрузки

• Автор: Гасникова, Наталья Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 145 с. : 29 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений
Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Дистрофии
1.1.1. Строение молекулы дистрофина
1.1.2. Костамеры. Дистрофин-дистрогликановый комплекс
1.1.3. Методы изучения дистрофина
1.1.4. Состояние дистрофинового слоя сарколеммы нормальных мышечных волокон при различных воздействиях
1.2. Макромолекулярная проницаемость сарколеммы
1.2.1. Методы изучения макромолекулярной проницаемости
1.2.2. Содержание креатинфосфокиназы и других мышечных белков в сыворотке крови
1.2.3. Поступление макромолекул в мышечные волокна
1.2.4. Механизм изменения макромолекулярной проницаелюсти, возможная роль в регуляции механозависимой пластичности скелетных мышц
1.3. Дистрофия Дюшенна и мыши линии тсЗх: морфологические и функциональные последствия нарушения синтеза дистрофина
1.3.1. Клиническое течение миодистрофии Дюшенна
1.3.2. Гистологические признаки дистрофии
1.3.3. Мыши линии тсИх
1.3.4. Патогенез развития дистрофии
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Организация экспериментов
2.1.1. Силовая тренировка мышц-разгибателей коленного сустава на фоне применения креатина

2.1.2. Хроническая низкочастотная стимуляция мышц-разгибателей коленного сустава
2.1.3. Определение уровня креатинфосфокииазы в крови космонавтов в рамках космического эксперимента «Профилактика»
2.1.4. Космический эксперимент «Мион»
2.1.5. 7-суточная «сухая» иммерсия
2.1.6. Лнтиортостатическое вывешивание крыс с последующей эксцентрической нагрузкой
2.1.7. Антиортостатическое вывешивание крыс в сочетании с хроническим введением калъций-связывающего агента ЭГТА

2.1.8. Антиортостатическое вывешивание мышей линии тсЬс
2.2. Забор и хранение экспериментального материала
2.2.1. Забор и хранение крови
2.2.2. Получение и хранение мышечных проб
2.3. Обработка экспериментального материала
2.3.1. Определение уровня креатинфосфокииазы в сыворотке крови

2.3.2. Определение уровня креатинфосфокииазы в капиллярной крови космонавтов
2.3.3. Иммуногистохимическое окрашивание мышечных срезов моноклональными антителами против дистрофина
2.3.4. Оценка состояния дистрофинового слоя
2.3.5. Подготовка мышечных срезов к флуоресцентной микроскопии для выявления волокон, содержащих синьку Эванса
2.3.6. Оценка мышечных срезов при флуоресцентной микроскопии

2.3.7. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты исследования
3.1. Силовая тренировка мышц-разгибателей коленного сустава на фоне применения креатина
3.1.1. Уровень мышечной креатинфосфокиназы в сыворотке крови

3.1.2. Состояние дистрофинового слоя в т. vastus lateralis
3.2. Хроническая низкочастотная стимуляция мышц-разгибателей коленного сустава
3.3. Определение уровня креатинфосфокиназы в крови космонавтов в рамках космического эксперимента «Профилактика»
3.4. Космический эксперимент «Мион»
3.5. 7-суточная «сухая» иммерсия
3.5.1. Состояние дистрофинового слоя в т. soleus
3.5.2. Уровень мышечной креатинфосфокиназы в сыворотке крови

3.6. Антиортостатическое вывешивание крыс с последующей эксцентрической нагрузкой
3.6.1. Состояние дистрофинового слоя в т. soleus
3.6.2. Количество волокон, содержащих сывороточный альбумин, в т. soleus
3.6.3. Уровень общей креатинфосфокиназы в сыворотке крови
3.7. Антиортостатическое вывешивание крыс в сочетании с хроническим введением кальций-связывающего агента ЭГТА
3.8. Антиортостатическое вывешивание мышей линии mdx

сарколеммы (аутокринная регуляция). bFGF рассматривается как ключевая сигнальная молекула, участвующая в трансформации механических стимулов при упражнениях в химический сигнал, инициирующий процессы репарации и клеточного роста (гипертрофия в ответ на механический стресс). Соответственно при разгрузке, в отсутствие повреждающего действия мышечных сокращений, целостность плазмалеммы восстанавливается и макромолекулярная проницаемость сарколеммы постепенно уменьшается, что сопровождается уменьшением выхода FGF и развитием атрофии мышечных волокон [Clarke et al., 1993, 1995, 1996, 1998].
Другой сигнальной молекулой, играющей важную роль как в регуляции регенераторных процессов, так и в адаптации мышечных волокон к измененному уровню механического стресса, является инсулиноподобный фактор роста I, в частности его изоформа — механозависимый фактор роста, экспрессирующийся в мышечных волокнах в ответ на механическую нагрузку и приводящий к развитию мышечной гипертрофии по механизму аутокринной/паракринной регуляции [Adams, 2002].
1.3. Дистрофия Дюшенна и мыши линии mdx: морфологические и функциональные последствия нарушения синтеза дистрофина
1.3.1. Клиническое течениемиодистрофии Дюшенна
Мутация гена, кодирующего синтез дистрофина, приводит к развитию мышечной дистрофии Дюшенна или Беккера. В первом случае следствием мутации является полное отсутствие дистрофина, во втором - дистрофии синтезируется в меньшем количестве в укороченном виде. Миодистрофия Дюшенна встречается у 1 из 3500 мальчиков и является рецессивным X-сцепленным генным заболеванием. Мальчики при рождении выглядят здоровыми, хотя у них и повышен уровень мышечной изоформы КФК в сыворотке крови. Первые клинические проявления обычно наблюдаются в