Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Люкевич, Татьяна Владимировна
03.00.12
Кандидатская
2005
Москва
100 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
О ОГЛАВЛЕНИЕ
♦ ВВЕДЕНИЕ
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Молекулярные механизмы действия гормонов
1.2 Физиологические эффекты цитокинина
1.3 Элементы трансдукции цитокининового сигнала
1.3.1 Цитокинин-связывающие белки
1.3.2 Участие двухкомпонентной системы в восприятии и передаче цитокининового сигнала
1.3.3 Другие возможные пути трансдукции цитокининового сигнала
1.4 Действие цитокинина на транскрипцию хлоропластных генов
1.5 Транскрипционная система хлоропластов
1.5.1 Роль сигма-подобных факторов в дифференциальной экспрессии хлоропластных генов
1.5.2 ДНК-связывающие белки хлоропластов
1.5.3 Неспецифические ДНК-связывающие
белки хлоропластов
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Объект исследований
2.2 Синтез коньюгата цитокинина с белком
2.3 Получение иммунной сыворотки против зеатинрибозида
2.4 Выделение моноспецифических антител к зеатину
^ 2.5 Синтез иммуноаффинного сорбента (АТг-сефарозы) для
выделения АТа.„
2.6 Получение антиидиотипических антител к зеатину
2.6.1 Иммунизация кроликов моноспецифическими антителами к зеатину
2.6.2 Выделение А Та.и с помощью хроматографии на А Т7 сефарозе
2.7Выделение хлоропластов из листьев ячменя и экстракция из них белков
2.8 Хроматографическая очистка зеатин-связывающего белка
2.8.1 Гель-фильтрация на сефадексе Г
2.8.2 Гидрофобная хроматография на фенил-сефарозе
2.8.3 Аффинная хроматография
2.9 Твердофазный иммуноферментный анализ
2.9.1. Идентификация зеатин-связывающего белка
2.9.2 Определение специфичности антисыворотки против зеатин-рибозида и очищенных антител к зеатину
2.9.3 Выявление присутствия АТа.и в антисыворотке против Ш зеатинрибозида
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АТа_н антиидиотипические антитела
БСА бычий сывороточный альбумин
ДДС-Ыа додецилсульфат натрия
хлЗСБ хлоропластный зеатин-связывающий
белок
ИФА иммуноферментный анализ
кДд/ килодальтон
ПААГ полиакриламидный гель
А Б
Рис. З.А. Электрофорез белковых фракций хлоропластов листьев ячменя. Гель окрашен Кумасси 11-250. 1-Белки-маркеры. 2 - Суммарный белок
хлоропластов. 3 - Супернатант лизированных хлоропластов после
центрифугирования 20 мин при 16000§. 4 - Белки мембранной фракции, полученной после центрифугирования лизированных хлоропластов 20 мин при 16000§. Б. Детектирование хлЗСБ методом иммуноблотинга с антиидиотипическими антителами против зеатина. Для их визуализации применяли коньюгат антивидовых антител с пероксидазой хрена. 1. Белки-маркеры. 2 - Суммарный белок хлоропластов. 3 - Супернатант, полученный после центрифугирования лизированных хлоропластов в течение 20 мин 16000§. 4 - Мембранная фракция, полученная в тех же условиях центрифугирования.
Для исследования функциональных свойств хлЗСБ мы проводили его очистку с помощью многоступенчатой хроматографии.
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Фенольные соединения клеточной стенки различных частей стебля льна (Linum usitatissimum) в pulse-chase экспериментах с интактными растениями | Погодина, Наталья Михайловна | 1999 |
Состав и накопление флавоноидов и танидов у женских и мужских клонов видов рода Salix L. | Оразов, Олег Энверович | 1998 |
Фитогормоны и флавонолы в регуляции прорастания пыльцы и роста пыльцевых трубок петунии (Petunia hybrida L.) | Минкина, Юлия Викторовна | 2007 |