Особенности некоторых биологических свойств штаммов Escherichia coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями

• Автор: Билалов, Фаниль Салимович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 113 с. : 15 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1.0 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Этиологическая роль штаммов Escherichia coli при инфекционных осложнениях у онкологических больных
1.2. Факторы патогенности бактерий Escherichia coli
2.0 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.0 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Частота встречаемости штаммов E.coli у онкологических больных с инфекционными осложнениями
3.2. Серологический пейзаж штаммов E.coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями
4.0 Факторы патогенности штаммов E.coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями
4.1. Адгезивные свойства
4.2. а-гемолитическая активность
4.3. Тиол-зависимая гемолитическая активность
4.4. Лецитиназная активность
5.0 Персистирующие свойства штаммов E.coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями
5.1. Антилизоцимная активность
5.2. «Антгшнтерфероновая» активность
5.5. Антикомплементарная активность
6.0 Тестирование факторов вирулентности штаммов E.coli, выделенных от онкологических и неонкологических больных с инфекционными осложнениями на различных биологических моделях
6.1. Легочная модель

6.2. Отек лапки мышей
6.3. Лигированная петля тонкого кишечника кролика
6.4. Кожно-некротическая проба
6.5. Протистоцидный тест
7.0 7.1. Устойчивость штаммов E.coli, выделенных от онкологи-
ческих больных с инфекционными осложнениями к антибактериальным препаратам
7.2. Фагочувствительность штаммов E.coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями
8.0 Генетические детерминанты некоторых факторов патогенности штаммов E.coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы.
Одной из актуальных проблем современной онкологии является разработка эффективных методов профилактики и лечения инфекционных осложнений [6,46,47,49], поскольку это связано повышением риска присоединения инфекционно-воспалительных осложнений бактериальной природы у-онкологических больных. В основе механизмов развития инфекционных осложнений, по мнению многих исследователей, лежит угнетение иммунной системы, повреждение естественных защитных барьеров организма, наличие об-структивных изменений, интоксикации и обширных оперативных вмешательств, что часто сопровождается массивной кровопотерей [50,114,180].
В спектре осложнений, наблюдаемых у онкологических больных, бактериальные инфекции встречаются примерно в 50% случаев и часто носят хронический рецидивирующий характер и являются причиной ранней гибели больных [15,68,180].
В последние годы произошли значительные изменения в спектре возбудителей, вызывающих инфекционные осложнения у онкологических больных. По данным литературы известно, что в 60-70-х годах прошлого столетия возникновение инфекционных осложнений у онкологических больных было обусловлено грамположительными бактериями, в частности стафилококками и стрептококками, а в настоящее время частой причиной инфекционных осложнений являются условно-патогенные грамотрицательные энтеробактерии (кишечные палочки, синегнойные палочки, протеи, цитробактеры, энтеро-бактеры, клебсиеллы) [6,43,69,89,180]. Особый интерес в изучении причин инфекционных осложнений у онкологических больных заслуживает Escherichia coli, которая часто, является причиной инфекций кишечного тракта, мочевыделительной и дыхательной систем, JIOP-органов, кожи и мягких тканей [43,117,121,143,180,186].
По мнению некоторых исследователей E.coli, выделенные при инфекционных процессах у онкологических больных несут комплекс генетически де-

ской активности, и штаммы, которые не вызывали гибель простейших в течение 5.5 и более минут, относили к нетоксигенным штаммам.
2.3. Методы комплексной оценки вирулентности бактерий Escherichia coli in vivo
2.3.1. Патогенность “in vivo” тестировали методом интраназального заражения мышей массой 16-18 г. “Легочная модель” /Н.К. Войно-Ясенецкая/ [31]. Мышам, массой 16-18 г. под легким эфирным наркозом, интраназально вводили 0,05 мл 18-часовой бульонной культуры /6-8х106/ E.coli. Часть мышей немедленно забивали, вскрывали грудную клетку, извлекали, а затем растирали легкие в стерильных ступках со стеклянным песком в физиологическом растворе /1 мл/ и определяли среднее количество бактерий, попавших при инфицировании легких высевом соответствующих разведений на 1,5% агар Хоттингера. Одновременно следили за поведением животных. Штаммы, вызывающие в первые 3-5 часов после заражения гибель 50% и более экспериментальных животных, считали высоковирулентными, в 12-18 часов - сред-невирулентными, 36-48 часов - слабовирулентными, и не вызывающие каких-либо изменений в поведении животных - авирулентными.
2.3.2. Определение токсигенности культур проводили на изолированной петле тонкого кишечника кролика [29]. Кроликам /1.5-2.0 кг/, предварительно голодавшим в течение суток, под барбитуровым наркозом /тиопентал натрия 10 мг/кг веса/, послойно вскрывали брюшную полость. На тонкой кишке кролика готовили 5 изолированных участков длиной 12 см с такими же ин-тактными участками, не считая дистального и проксимального отделов, которые не были использованы в исследованиях. После введения в изолированные петли по 1 мл испытуемых и контрольных проб, брюшную полость зашивали послойно. Через 16-18 часов животных умерщвляли воздушной эмболией, вскрывали брюшную полость и рассчитывали индекс дилятации отношением объема экссудата к длине изолированной петли /замеряли длину лигированного отрезка и объема жидкости/. Положительной считали кишеч-