Высокоантагонистические штаммы лактобацилл, перспективные для конструирования новых пробиотических препаратов

• Автор: Червинец, Юлия Вячеславовна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Количество страниц: 104 с.

Список сокращений:
ЖКТ - желудочно-кишечный тракт СПИ - средний показатель адгезии ММ - молекулярная масса ЗЗР - зона задержки роста
МИК - минимальная ингибирующая концентрация
L.a.- Lactobacillus acidophilus
L.с. - Lactobacillus casei
L.f. - Lactobacillus fermentum
L.p. - Lactobacillus plantarum
L.r. - Lactobacillus rhamnosus

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Пробиотики
1.1.1 .Понятие пробиотиков
1.1.2.Понятие бактериоцинов и микроцинов
1.1.3.Характеристика антагонистически активных штаммов лактобацилл
1.1.3.1.Частота встречаемости бактерициппродуцирующих
штаммов лактобацилл
1.1.3.2.Спектр антагонистической активности бактерицинпроду-цирующих штаммов лактоба-
. цилл
1.1.3.3.Физико-химические характеристики бактериоцинов, синтезируемых лактобациллами
1.1.3.4.Генетический контроль синтеза бактериоцинов
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВНИЯ
2.1. Характеристика исследуемого материала
2.2. Выделение чистой культуры лактобацилл
2.3. Идентификация лактобацилл
2.4. Праймеры и постановка. ПЦР для видовой идентификации лактобацилл
2.5. Изучение антагонизма микроорганизмов методом перпендикулярных штрихов
2.6. Определение антагонистической способности микроорганизмов (продукция бактериоцинов)
2.7. Определение антагонистической способности лактобацилл (продукция микроцинов)
2.8. Определение антимикробной активности супернатантов, содержащих бактериоциноподобные вещества
2.9. Совместное культивирование на поверхности твердой питательной среды
2.10. Определение чувствительност лактобацилл к желчи
2.11. Определение чувствительности лактобацилл к соляной кислоте
2.12. Определение кислотопродуцирующей способности лактобацилл
2.13. Определение признаков патогенности
2.13.1. Определение лецитиназной активности
2.13.2. Определение казеинолитической активности
2.13.3 Определение желатиназной активности
2.13.4. Определение нуклеазной активности
2.13.5. Определение каталазной активности
2.13.6. Определение гемолитической активности
2.13.7. Определение антилизоцимной активности

2.14. Определения адгезивной способности микроорганизмов
2.15. Определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным
препаратам (качественная)
2.16 Определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (количественная)
2.17. Определения чувствительности латобацилл к химиопрепаратам и хитозану
2.18. Статистическая обработка материала
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Выделение и идентификация лактобацилл
3.2. Антагонистическая активность лактобацилл
3.2.1. Бактериоцинная и микроцинная активность
3.2.2. Антагонистическая активность прогретой культуры
3.2.3. Межмикробный антагонизм
3.3. Чувствительность лактобацилл к антимикробным препаратам
3.4. Чувствительность лактобацилл к химиопрепаратам и хитозану
3.5. Ферменты патогенности и адгезивная способность лактобацилл
3.6. Чувствительность лактобацилл к соляной кислоте и желчи
3.8. Кислотопродуцирующая способность лактобацилл
3.9. Характеристика групп сравнения
ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

37. Антагонистических отношений между выделенными из препарата ли-некс бактериями Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium infantis, Enterococcus faecium и исследуемыми штаммами лактобацилл выявлено не было. Также антагонистическую активность не проявили E.coli, Staphylococcus, Candida albicans, L. plantarum 8RA-3 и Bacillus subtilis при совместном культивировании с лактобациллами.
3.3. Чувствительность лактобацилл к антимикробным препаратам
Исследованы 20 штаммов лактобацилл, проявившие антагонистическую активность по отношению к тестовым культурам, на чувствительность к антибиотикам (фото 3): аминогликозидам (гентамицину), бета-лактамным, в частности, пенициллинам, в том числе аминопенициллинам (ампициллину, амоксициллин), пенициллинам, резистентным к пеницил-линазе (оксациллину), а также линкозаминам (линкомицину), макролидам (олеандомицину, кларитромицину), тетрациклинам, фторхинолонам (оф-локсацину, ципрофлоксацину, норфлоксацину), амфениколам (хлорамфе-николу) и антибактериальным химиопрепаратам (метронидазолу).
При исследовании резистентности исследуемых культур к антимикробным препаратам выявлено, (рис.З), что 100% штаммов лактобацилл резистентны к ципрофлоксацину, норфлоксацину, пенициллину и метронидазолу. 95,2% выделенных штаммов резистентны гентамицину и кларитромицину, 85,7% - к офлоксацину, 57,2% - к линкомицину, 38% - к амоксициллину, 38% к тетрациклину, 19% - к оксациллину, 14,3% - к ам-пицилину, 9,5% - к олеандомицину и 4,8% к хлорамфениколу.
При исследовании чувствительности лактобацилл к антимикробным препаратам были получены следующие данные: ни к одному из антибиотиков данные бактерии не проявили 100% чувствительность (рис.4). 95,2% выделенных штаммов оказались чувствительными к хлорамфениколу, 90,5% - к олеандомицину, 85,7% к ампициллину, 81% к оксациллину, 62% к амоксициллину и тетрациклину, 42,8% к линкомицину, 14,3% к офлоксацину, 4,8% к гентамицину и кларитромицину (габл.6).