+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Биохимический и ультраструктурный анализ аппарата подвижности бактерий и архей

  • Автор:

    Метлина, Антонина Леонидовна

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Докторская

  • Год защиты:

    2003

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    251 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


СОДЕ РЖАН И Е
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Структура и свойства
жгутиков бактерий и архей
1. Ультраструктура бактериального жгутика (БЖ)
1.1 Базальное тело БЖ
1.1.1. Дополнительные компоненты БЖ
1.2. Нить БЖ
1.3. Крюк БЖ
1.4. НАР-белки БЖ...:
1.5. Структура и экспорт аксиальных компонентов БЖ
1.6. Система генов жгутиковой подвижности бактерий
2. Особенности нитей бактериальных жгутиков (НБЖ)
2.1. Самосборка НБЖ
2.2. Полиморфизм НБЖ
2.3. Молекулярное строение НБЖ и их полиморфные
переходы
2.4. Сборка НБЖ in vivo
3. Структурные белки мотора бактериального жгутика и его
функционирование
4. Архебактериальные жгутики
4.1. Структура и свойства жгутиков архей
4.2. Первичная структура флагеллинов архей
4.3. Стабильность жгутиков архей
4.4. Предполагаемая модель сборки жгутиков архей
5. Заключение
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Получение бактериальной массы и изолирование нитей бактериальных жгутиков (НБЖ)
1.1. Получение подвижных форм бактерий
1.2. Получение биомассы и изолирование НБЖ из Bacillus
subtil is
1.3. Получение биомассы Escherichia coli MS 1
1.4. Получение биомассы и изолирование НБЖ Bacillus brevis
var. G.-B.p+
1.5. Получение биомассы Ervinia chryzanthemi ENA-
2. Очистка НБЖ
3. Выделение «интактных» жгутиков бактерий (ИЖБ)
Escherichia coli MS 1
4. Выделение ИЖБ Bacillus brevis var. G.-B. p+ и Bacillus brevis
var. G.-B. p"
5. Выделение ИЖБ Vibrio alginolyticus
6. Выделение ИЖБ Ervinia chryzanthemii ENA-
7. Очистка ИЖБ
8. Получение флагеллина в мономерной форме
8.1. Получение ДК-флагеллина
8.2. Получение ДН-флагсллина
9. Получение биомассы Halobacterium halobium и
Halobacterium salinarium
10. Выделение нитей жгутиков архей (НЖА)
11. Очистка НЖА
12. Выделение кэповидных (cap's) структур
13. Аминокислотный анализ флагеллина
14. Аналитическое центрифугирование
15. Определение концентрации белка
16. Электрофорез в полиакриламидном геле

17. Расчет содержания белков в препаратах жгутиков
18. Электронномикроскопические исследования
19. Определение Ы-концевой последовательности флагеллина
20. Модификация тирозиновых остатков флагеллина тетранитрометаном
20.1. Модификация флагеллина в 8 М мочевине
20.2. Модификация ДК-флагеллина
20.3. Модификация нитей бактериальных жгутиков
21. Определение способности модифицированного тетранитрометаном флагеллина к самосборке
22. Изучение кинетики полимеризации флагеллина
в присутствии сульфата аммония и полиэтиленгликоля (ПЭГ)
22.1. Полимеризация ДК-флагеллина в присутствии ПЭГ
22.2. Полимеризация ДН-флагеллина в присутствии ПЭГ
22.3. Полимеризация ДК-флагеллина в присутствии
сульфата аммония
23. Круговой дихроизм
23.1. Спектры кругового дихроизма
23.2. Регистрация величины молярной эллиптичности [0]222 флагеллина в присутствии ПЭГ или сульфата аммония
24. Получение миозина
25. Выделение субфрагмента 1 миозина
26. Получение стержневой части молекулы миозина (СЧМ)
27. Определение АТФазной активности миозина
28. Определение неорганического ортофосфата
29. Соосаждение нитей бактериальных жгутиков и флагеллина
с миозином и СЧМ
30. Определение количества соосажденных с миозином
нитей бактериальных жгутиков

cheW, cheY, cheZ), два рецепторных гена {tar, tap), и гены подвижности {inotA и motB). Продукты этих генов используются только после полной сборки базального тела. Гены, которые требуются для формирования жгутика, названы flа генами. Продукты двух генов mot К и motB требуются для энергизации мотора. Гены, кодирующие компоненты хемотаксиса, обозначены che; жгутики che мутантов функциональны, но имеют измененную переключающую мотор в различные режимы систему, поэтому клетки не способны адекватно отвечать на изменение условий окружающей среды (Parkinson, 1977; Macnab, 1987). Район III содержит главным образом гены, необходимые для сборки жгутиков. Он содержит fliC - ген флагеллина, ген ст-фактора, который инициирует транскрипцию гена fl iC и других поздних генов.
Исследование неполных базальных структур, образованных мутантами по генам района III, показало, что гены этого района необходимы на ранних стадиях процесса сборки базального тела. К нему относится ген MS-комплекса ifliF) и другие ранние компоненты базального тела (fliE), 5т7с//-переключения вращения базального тела (fliG, fliM, fliN), возможно, часть экспортного аппарата (fliH, flil). Здесь же находится fliK, который отвечает за контроль длины крюка.
Наиболее изученные жгутики S. typhimurium, E. coli (Kuwajima et al., 1986) и
В. subtilis (lino 1977, DeLange et al., 1976) состоят из одного флагеллина, однако, имеется ряд бактерий, у которых в нити жгутика обнаружено несколько флагеллинов, кодированных несколькими генами. Так, например, у C. crescentus имеется 2 кластера генов, кодирующих флагеллины (Newton & Ohta, 1990).
2. Особенности нитей бактериальных жгутиков (НБЖ).
2.1. Самосборка НБЖ.
НБЖ - один из наиболее удобных объектов изучения общих принципов самосборки биологических структур. Молекулы флагеллина, из которых состоят

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.263, запросов: 967