Лектин красной водоросли Tichocarpus crinitus. Биологическая активность лектинов морских гидробионтов

• Автор: Черников, Олег Викторович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 113 с. : ил.

Содержание
Содержание
Список сокращений
Введение
1. Литературный обзор
1.1. Общая характеристика и классификация лектиноп
1.2. Лектины морских гидробионтов
1.3. Биологические функции лектинов
1.4. Изменение углеводных структур гликоконъюгатов при неопластической трансформации
1.5. Применение лектинов
1.6. Заключение
2. Материалы и методы
2.1. Реактивы и материалы
2.2. Общие методы
2.3. Получение суспензии эритроцитов
2.4. Реакция прямой гемагглютинации
2.5. Реакция ингибирования гемагглютинации
2.6. Поиск лектинов в экстрактах бурых, красных и зеленых водорослей
2.7. Проверка экстрактов на присутствие полифенолов обработкой поливинилпирролидоном (PVP)
2.8. Выделение лектииа из красной водоросли Tichocarpus crinitus (TCL)
2.9. Физико-химические свойства TCL
2.10. Митогенная активность
2.11. Цитокин-индуцирующая активность
2.12. Взаимодействие лектинов с микроорганизмами
2.13. Взаимодействие лектинов с фитовирусами
2.14. Иммуноферментиый анализ (ИФА)
2.15. Твердофазный лектин-ферментный анализ (ТЛФА)
3. Результаты и обсуждение
3.1. Поиск лектинов в экстрактах морских водорослей
3.2. Выделение и очистка лектина из красной водоросли Tichocarpus crinitus

3.3. Физико-химические свойства ТСЬ
3.4. Митогенная активность
3.5. Цитокин-индуцирующая активность
3.6. Взаимодействие лектинов с микроорганизмами
3.7. Взаимодействие лектинов с вирусами
3.8. Разработка диагностических тест-систем на основе лектинов
Выводы
Список литературы

Список сокращений
АКГ - альфа-1-кислый гликопротеин.
BOM - вирус огуречной мозаики.
ГА - гемагглютинирующая активность.
ЙЛ-6 - интерлейкин-6.
ИФА - иммуноферментный анализ.
ИФН-у - интерферон-у.
ЛПС - липополисахаридов.
ОФА - онкофетальный антиген.
РЭА - раково-эмбриональный антиген.
ТБГ - трофобласт-специфический-бета-1 гликопротеин.
ТЛФА - твердофазный лектин-ферментный анализ.
YBK - Y-вирус картофеля.
ФНО-а - фактор некроза опухоли альфа.
BSA - бычий сывороточный альбумин.
BSM - муцин из желудка крупного рогатого скота.
Con А - лектин конканавалин А.
CGL - лектин из мидии Crenomytilus grayanus.
СРВ - С-реактивный белок.
CRD - углевод-связывающий домен (carbohydrate-recognition domain). DTL — лектин из асцидии Didemnum ternatanum.
DTL-A - лектин из асцидии Didemnum ternatanum.
FBS - эмбриональная сыворотка крупного рогатого скота.
Fet — фетуин.
Fuc - L-фукоза.
Gal - D-галактоза.
GalNAc - N- ацети л-D - гал ак гоз ами н.
Glc - D-глюкоза.
GlcNAc - їчІ-ацетил-О-глюкозамин.
GlcUA - глюкуроновая кислота.
Lac - лактоза.
LacNAc - N-ацетилактозамин.

печени. Исследования показали увеличение разветвления гликанов и наличие фукозы, связанной а-1—>3 связью с И-ацетил-Б-глюкозамином.
Альфа-1-кислый гликопротеин (орозомукоид, АКГ) - один из наиболее хорошо изученных белков острой фазы, уровень которого может повышаться в 2-4 раза при развитии острой воспалительной реакции. Физиологическая роль АКГ до конца не установлена, но время появления его в крови, а также сильный аффинитет к основным компонентам позволяют рассматривать его в качестве иммуномодулятора, способного связываться с эндогенными и экзогенными медиаторами воспаления. При патологических процессах в печени, связанных с алкоголизмом, было показано уменьшение сиаловых кислот и увеличение фукозилирования и разветвления гликанов. Обнаружено, как и в случае трансферрина, наличие фукозы, связанной а-1—>3 связью с Ы-ацетмл-О-глюкозамином. При воспалительных процессах таких, как ревматоидный артрит происходит увеличение разветвления гликанов, изменение количества сиаловых кислот и появление трех и четырех антенных цепей, а также появление большого количества кислых форм АКГ (Turner, 1992).
Иммуноглобулин G (IgG) составляет основную часть всех иммуноглобулинов сыворотки крови человека. Содержание олигосахаридных компонентов в составе иммуноглобулинов колеблется от 3 до 13% в зависимости от их класса. Вне зависимости от расположения, все олигосахаридные цепи иммуноглобулинов имеют примерно одинаковый набор основных моносахаридов: галактоза, манноза, N-ацетилглюкозамин, N-ацетилгалактозамнн, фу коза и сиаловая кислота. Олигосахаридные цепи, входящие в состав иммуноглобулинов здорового человека, имеют высокую микрогетерогенность с преобладанием комплексов биантенного типа, а также сиаловых кислот. При изучении изменения гликозилирования IgG при различных заболевания было показано, что при воспалительных процессах происходит отщепление концевой галактозы. При этом увеличивается содержание концевого N-ацетилглюкозамина. Повышенное содержание свободного N-ацетилглюкозамина в иммуноглобулине G может служить маркером определения ревматоидного артрита. У больных множественной миеломои выявлено увеличение углеводных цепей с преобладанием фукозы, галактозы и сиаловой кислоты. Изменения гликозилирования IgG также были