+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Создание рекомбинантного аденовируса CELO, экспрессирующего интерлейкин 2, и анализ его биологической активности

  • Автор:

    Черенова, Любовь Викторовна

  • Шифр специальности:

    03.00.03

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2002

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    123 с.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

ОГЛАВЛЕНИЕ.
Принятые сокращения
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Вирусные системы доставки генов в клетки эукариот
1.2. Общая характеристика аденовирусов, использование аденовирусов в качестве векторов для переноса генетической информации
1.2.1. Общая характеристика и классификация аденовирусов
1.2.2. Аденовирусы как векторы для переноса генетической информации
1.2.2.1. Векторы на основе аденовирусов человека
1.2.2.2. Векторы на основе аденовирусов животных и птиц
1.2.3. Аденовирус птиц СЕЬО, его особенности, использование в качестве вектора
1.2.3.1. Особенности структурно-функциональной организации генома аденовируса птиц РАУ-1 (СЕЬО)
1.2.3.2. Векторы на основе аденовируса птиц БАЛМ (СЕЬО)..
1.3. Цитокины как регуляторы иммунной системы организма, их практическое применение
1.3.1. Цитокины, их классификация
1.3.2. Интерлейкин 2 и его функции
1.3.3. Интерферон гамма и его функции
1.3.4. Практическое применение цитокинов (интерлейкина 2 и интерферона у)
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2,1. Материалы
2.1.1. Вирусы и бактериальные штаммы
2.1.2. Клеточные линии

2.1.3. Плазмидные векторы
2.1.4. Ферменты и другие реактивы
2.1.5. Лабораторные животные
2.2. Методы
2.2.1. Выделение и очистка плазмидной ДНК
2.2.2. Выделение аналитических количеств плазмидной ДНК
2.2.3. Гидролиз ДНК специфическими эндодезоксирибонуклеазами
2.2.4. Фракционирование фрагментов ДНК методом электрофореза в агарозном геле
2.2.5. Препаративное разделение фрагментов ДНК и элюция их из геля !
2.2.6. Лигирование фрагментов ДНК
2.2.7. Трансформация клеток Е.соП
2.2.8. Определение нуклеотидной последовательности ДНК
2.2.9. Синтез дезоксиолигонуклеотидов
2.2.10. Полимеразная цепная реакция
2.2.11. Трансфекция клеток линии ЬМН для получения рекомбинантных аденовирусов
2.2.12. Накопление вирусов
2.2.13. Очистка и концентрирование аденовирусов
2.2.14. Выделение вирионной ДНК
2.2.15. Титрование вирусов
2.2.16. Выделение ДНК из клеток, зараженных аденовирусом
2.2.17. Электрофорез белков в ПААГ-ДСН
2.2.18. Иммуноблотинг
2.2.19. Определение биологической активности интерлейкина 2 с использованием МТТ-теста
2.2.20. Иммуноферментнфый анализ

2.2.21. Определение ферментативной активности SEAP в образцах
сыворотки крови мышей
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Конструирование рекомбинантного аденовируса птиц CELO, несущего ген интерлейкина
3.1.1. Создание плазмидной конструкции, содержащей ген интерлейкина 2 человека в составе экспрессирующей кассеты под контролем HCMV-промотора
3.1.2. Создание плазмидной конструкции, несущей ген интерлейкина 2 в составе фрагмента генома аденовируса птиц CELO
3.1.3. Получение аденовируса CELO-IL2 методом гомологичной рекомбинации в культуре клеток LMH
3.1.4. Наращивание рекомбинантного аденовируса CELO-IL2 в куриных эмбиронах
3.2. Экспрессия гена интерлейкина 2 в составе аденовируса CELO-IL2 и накопление рекомбинантного белка интерлейкина 2 в аллантоисной жидкости зараженных куриных эмбрионов
3.3. Трансдукция различных линий клеток млекопитающих рекомбинантным аденовирусом CELO-IL
3.4. Возможность использования рекомбинантного аденовируса CELO-IL2 для эффективного переноса терапевтических генов, которые используются в генной терапии опухолей ex vivo.
3.5. Возможность использования рекомбинантного аденовируса CELO-IL2 для эффективного переноса терапевтических генов, которые используются в генной терапии сформированных опухолей in vivo
3.5.1. Замедление роста подкожных трансплантатов В16 меланомы и увеличение продолжительности жизни животных при

механизм противоопухолевого действия связан с активацией №С-клеток, цитотоксических Т-лимфоцитов и макрофагов. Также большую роль играет усиление экспрессии клетками молекул адгезии (интегринов группы УЬА и 1САМ-1), продуктов генов МНС I и II класса, что способствует осуществлению процессов распознавания опухолеассоциированных антигенов.
Таким образом, интерферон у представляет собой белок с выраженным противовирусным и противоопухолевым действием, он играет важную роль в иммунорегуляции, являясь ключевым фактором клеточного иммунного ответа и ингибитором гуморального иммунного ответа.
1.3.4. Практическое применение цитокинов (интерлейкина 2 и интерферона у).
Среди цитокинов ранее всего в медицинской практике стали применять интерфероны. Главной областью их применения было лечение вирусных заболеваний. В настоящее время практически все используемые препараты получают на основе рекомбинантных интерферонов, широко используется комплексный препарат лейкинферон, содержащий наряду с интерферонами интерлейкин 1, 6, фактор некроза опухолей а. Выпускается препарат гаммаферон, а также лекарственные препараты индукторов интерферона -циклоферон, амиксан, камедон, полудан, ридостин. Интерлейкин 2 выпускается в виде препаратов ронколейкина и пролейкина, которые разрешены к применению в России для лечения гнойных, септических процессов, травм. Перспективно использование цитокинов для стимуляции общей иммунореактивности организма. В США рекомбинантный интерферон у фирмы “ОепеШесй” получил разрешение Департамента по контролю за качеством пищевых

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.087, запросов: 967