Разработка схемы определения стероидных гормонов и нестероидных противовоспалительных препаратов в биологических жидкостях методом ВЭТСХ

• Автор: Объедкова, Екатерина Валерьевна
• Шифр специальности: 02.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 180 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1Л. Характеристика определяемых аналитов: кортикостероидов,
лекарственных стероидных соединений и нестероидных противовоспалительных средств (НПВС)
1.1.1. Кортикостероиды и лекарственные стероидные соединения..
1.1.2. Свойства нестероидных противовоспалительных средств (НПВС)
1.2. Методы определения кортикостероидов и нестероидных противовоспалительных препаратов в биологических жидкостях
1.2.1. Иммунологические методы анализа
1.2.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
1.2.3. Метод капиллярного электрофореза
1.2.4. Современная тонкослойная хроматография (ТСХ)
1.2.4.1. Современные подходы к определению биологических соединений методом тонкослойной хроматографии
1.2.4.2. Неподвижные и подвижные фазы в ВЭТСХ
1.2.4.3. Параметры удерживания в ТСХ, эффективность и селективность разделения
1.2.4.4. Методы детектирования в тонкослойной хроматографии
1.3. Поверхностно-активные вещества (ПАВ) и макроциклические агенты, используемые при хроматографическом и электрофоретическом определении биологически активных соединений

1.3.1. Характеристика поверхностно-активных веществ и их применение в хроматографическом и электрофоретическом анализе
1.3.2. Циклодекстрины
1.4. Разделение энантиомеров нестероидных противовоспалительных средств в условиях ВЭТСХ
1.4.1. Теоретические основы хиральной хроматографии
1.4.2. Разделение энантиомеров в условиях ВЭТСХ
1.4.3. Прямой метод разделения
1.4.3.1. Типы хиральных селекторов
1.4.4. Лигандообменная хроматография
1.4.4.1. Механизм хирального разделения в лигандообменной хроматографии
1.4.4.2. Хиральное разделение методом лигандообменной хроматографии
1.4.5. Механизмы комплексообразования при хиральном разделении
1.5. Пробоподготовка биологических жидкостей при определении стероидных гормонов и нестероидных противовоспалительных средств
1.5.1. Сорбционное концентрирование и жидкостная экстракция
1.5.2. Сверхсшитый полистирол как материал для твердофазной экстракции
1.5.2.1. Физико-химические свойства полистирольных сеток
1.6. Характеристические профили биологически активных соединений для диагностики заболеваний
1.6.1. Электрофоретические профили биологически активных соединений
1.6.2. Хроматографические профили биологически активных соединений

1.7. Анализ многомерных данных

ГЛАВА II. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБЪЕКТОВ И МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ. ХЕМОМЕТРИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ОБРАБОТКЕ ДАННЫХ
11.1. Оборудование
11.2. Реагенты
11.3. Пробоподготовка биологических объектов к анализу
П.3.1. Жидкостная экстракция
II.3.2. Твердофазная экстракция (ТФЭ)
11.4. Методы исследования
11.4.1. Высокоэффективная жидкостная хроматография стероидных
гормонов и лекарственных препаратов
11.4.2. Метод мицеллярной электрокинетической хроматографии (МЭКХ) при определении кортикостероидов и синтетических стероидных лекарственных средств
11.4.3. Высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ) с денситометрическим детектированием
11.4.3.1. Определение стероидных гормонов и стероидных
синтетических препаратов методом ВЭТСХ
11.4.3.2. Разделение энантиомеров нестероидных
противовоспалительных средств методом ВЭТСХ
11.4.3.2.1. Модификация ТСХ-пластин
11.4.3.2.2. Установление пределов обнаружения и факторов
разрешения энантиомеров нестероидных противовоспалительных средств (НПВС)

экспрессностью, отсутствием необходимости работать с токсичными растворителями. Предложен метод определения нестероидных противовоспалительных средств (НПВС) с использованием мицеллярных подвижных фаз (добавки ДДСН, ЦТАБ) [108]. Несмотря на гидрофильность определяемых аналитов, использование мицеллярных фаз позволяет разделять НПВС в обращенно-фазовом режиме вследствие отталкивающих электростатических взаимодействий между аналитами и модифицированной мономерами ПАВ стационарной фазой.
Применение ПАВ при электрофоретическом анализе
Добавки поверхностно-активных веществ в рабочий буфер позволяют реализовать режимы мицеллярной и микроэмульсионной электрокинетической хроматографии (МЭЭКХ) [113].
В настоящее время наибольший интерес вызывает использование полимерных ПАВ - высокомолекулярных соединений, образованных ковалентно связанными молекулами ПАВ. Эти соединения можно вводить в низких концентрациях (ККМ=0), что позволяет проводить анализ в присутствии и других добавок. Однако жесткая структура подобных мицелл замедляет массоперенос между псевдостационарной и водной фазами, что приводит к ухудшению разделения компонентов по сравнению с классическими мицеллами.
В [114] предложен новый, простой и удовлетворяющий «зеленой химии» подход к синтезу полимерных мицелл с амфифильным сополимером: полученный в присутствии азобисизобутиронитрила (А1ВИ — 02оЫз18оЬи1угопИг17е) сополимер метилметакрилат метакриловой кислоты растворяли в водном растворе гидроксида натрия (0,2 М) и перемешивали в течение 20 мин. Требуемого значения рН=9,2 достигали путем добавления насыщенного раствора борной кислоты.