Состояние апоптоза нейтрофилов периферической крови

• Автор: Балашова, Светлана Николаевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Архангельск
• Количество страниц: 121 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Апоптоз нейтрофилов: молекулярные механизмы и регуляция
1.2. Особенности пролиферативной активности нейтрофилов
1.3. Влияние цитокинов на апоптоз и пролиферацию нейтрофилов
Е4. Активность апоптоза нейтрофилов в условиях патологии
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Общая характеристика обследованных лиц
2.2. Иммунологические методы исследования
2.3. Статистическая обработка 41 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВА11ИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Уровень апоптоза и пролиферации нейтрофилов с учетом содержания иммунологических показателей крови у клинически здоровых людей
3.2. Сравнительная оценка состояния иммунологической реактивности клинически здоровых людей в зависимости от активности апоптоза нейтрофилов
3.3. Сравнительный анализ содержания иммунологических показателей крови и уровня апоптоза и пролиферации нейтрофилов у лиц с патологиями
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
1L-4 - интерлейкин-
IL-6 - интерлейкин-
1L-10 - интерлейкин-
IL-17F - интерлейкин-17F
TNF-a - фактор некроза опухоли альфа
IFN-y - интерферон гамма
sTRAIL - TNF-связанный апоптоз индуцирующий лиганд
CD3f - активированные (зрелые)'Г-лимфоциты
CD4+ - Т-хелперы
CD8 - цитотоксические Т-лимфоциты
CD 10 - ранний антиген В-клеток, предшественников В-лимфоцитов
CD16' - натуральные киллеры
CD25+ - Т-лимфоциты с рецептором к интерлейкину-
CD71+ - Т-лимфоциты с рецептором к трансферрину
HLADR7 - Т-лимфоциты с рецептором к главному комплексу гистосовместимости класса II CD95* - лимфоциты, меченные к апоптозу
AnV+/PI- - нейтрофилы, находящиеся на стадии апоптоза
AnV-/PI+ - поврежденные (некротические) нейтрофилы
AnV-/PI- - живые нейтрофилы

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования. Нейтрофилы являются самой многочисленной популяцией клеток периферической крови, на долю которых приходится до 70 % общего содержания лейкоцитов. Анализируя состав периферической крови, фактически можно оценить только 50 % клеток гранулоцитов, г.е. циркулирующий пул. Оставшиеся 50 % составляют пристеночные нейтрофилы, готовые выйти из сосудов в ткани для осуществления фагоцитоза и связанного с ним кислородного взрыва [7, 14, 39]. Помимо фагоцитоза пристеночные клетки могут образовывать нейчрофнльные окстрацеллюлярные сети (NET), способные фиксировать микроорганизмы благодаря трехмерной структуре [132, 274]. В свою очередь, циркулирующие нейтрофилы, находящиеся в периферической крови, не являются клетками, ограниченными в специализации. Они способны к молекулярной перестройке хроматина, реализации генетической информации, могут дифференцироваться под влиянием микроокружения в антигенпрезептирующие клетки [19].
11ейтрофилы секретируют огромное количество биологически активных веществ, в том числе почти все известные цитокины. Есть сведения, что грапулоциты способны активировать макрофаги, действуя на каспазу-6 и комплекс IL-lR/кипаза-М [144]; могут стимулировать пролиферацию Т-лимфоцитов [181 ], инициировать созревание дендритных клеток [57], вызывать ССЕ2-зависимый хемотаксис Thl7 [194] и стимулировать секрецию гистамина из базофилов посредством HRA-N фактора [260]. Кроме того, нейтрофилы осуществляют антителозависимую цитотоксичность, реализующуюся в реакциях противоопухолевой защиты

Пролиферация нейтрофилов происходит в гемопоэтических элементах костного мозга, откуда в кровоток в физиологических условиях выделяются палочкоядерные формы. Продолжительность жизни нейтрофилов после выхода их из костного мозга составляет около 10 часов в циркулирующей

возрастных групп: 20-29 лет (56 человек), 30-39 лет (42 человека), 40-49 лет (38 человек), 50-59 лет (47 человек) и 60-77 лет (17 человек).
Для анализа иммунологической реактивности и определения активности апоптоза на проточном лазерном цитофлуориметре осуществлено обследование 49 клинически здоровых людей (контрольная группа) в возрасте от 21 до 60 лез, проживающих на территории Архангельской области (студенты и преподаватели СГМУ), их них 30 мужчин и 19 женщин.
В целях определения особенностей взаимосвязи активности апоптоза нейтрофилов и иммунологических показателей данная группа (49 человек) клинически здоровых людей разделена на две подгруппы с относительно пониженным и относительно повышенным содержанием апоптотических нейтрофилов, деление проводилось с учетом среднеквадратичного отклонения ± о. Уровень указанных нейтрофилов рассчитывался как по результатам проточной лазерной цитофлуориметрии (АпУ+/Р1- менее 3 % и более 8 %), так и по показателям морфологических изменений в ядре (гранулоциты с пятью и более фрагментами ядра менее 3 % и более 6 %) (табл. 1).
Таблица
Количество клинически здоровых людей в группах с различным
содержанием апоптотических нейтрофилов
Параметры Лица с пониженным содержанием апоптотических нейтрофилов Лица с повышенным содержанием апоптотических нейтрофилов
Данные проточной лазерной цитофлуориметрии 18
Данные микроскопии ссгментограммы нейтрофилов 16
Для сравнения активности программируемой гибели гранулоцитов дополнительно изучено состояние иммунной системы 120 больных -пациентов медицинской компании МК «Биокор» - в возрасте от 20 до 60 лет,