Комплексная оценка взаимодействия E. faecalis и Blastocystis spp. в системе ассоциативного симбиоза кишечника человека

• Автор: Бугеро, Нина Владимировна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Оренбург
• Количество страниц: 305 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ПЕРЕЧЕНЬ ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИИ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 .Современные представления о симбиотических ассоциациях кишечника и его нарушениях
1.2.Роль простейших Blastocystis spp. в патологии человека
1.3 .Общая характеристика Enterococcus spp
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 .Материалы исследования
2.2.Методы исследования
2.3.Методы статистического анализа данных
ГЛАВА 3. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА BLASTOCYSTIS spp., ВЫДЕЛЕННЫХ У ОБСЛЕДОВАННЫХ
3.1 .Инвазированность обследованных простейшими Blastocystis spp
3.2.Характеристика морфологических свойств выделенных бла- стоцист
3.3.Вирулентность изолятов простейших Blastocystis spp. in vivo
3.4.Характеристика факторов персистенции бластоцист
3.5.Персистентная активность Blastocystis spp. при дисбактерио- зе кишечника
3.6.Уровень показателей персистенции в зависимости от виру-
лентности бластоцист
ГЛАВА 4. ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕНЕНИЙ АССОЦИАТИВНОГО
СИМБИОЗА КИШЕЧНИКА ЧЕЛОВЕКА ПРИ БЛАСТО- 105 ЦИСТНОЙ ИНВАЗИИ
4.1.Особенности микрофлоры толстого отдела кишечника при инвазии Blastocystis spp
4.2.Показатели частоты встречаемости и плотности колонизации представителей микрофлоры кишечника при изменении вирулентности 116 бластоцист
4.3.Особенности микробиоты тонкого отдела кишечника
4.4.Изменение направленности химических процессов в кишеч- 4 нике при бластоцистной инвазии
ГЛАВА 5. ИЗМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЭНТЕРОКОККОВ В УСЛОВИЯХ МЕЖМИКРОБНОГО ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С ПРОСТЕЙШИМИ БЛАСТОЦИСТАМИ
5.1 .Видовой спектр энтерококков, выделенных у обследованных
5.2.Культурально-биохимические свойства E.faecalis
5.3.Вирулентность клинических изолятов Е. faecalis
5.4.Персистентные свойства Е. faecalis
5.5.Результаты изучения генетических детерминант патогенно

сти энтерококков
ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ E.FÄECALIS В
УСЛОВИЯХ АССОЦИАТИВНОГО ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С 155 BLASTOCYSTIS spp
6.1. Изменение факторов персистенции И вирулентности энте-рококков и бластоцист до и после совместного культивирования
6.2.Определение репродуктивной функции E. faecalis в ходе изменения антилизоцимной активности при сокультивировании с бласто- 171 цистами
6.3.Биологические свойства Е. faecalis до и после сокультивиро-
вания с бластоцистами
ГЛАВА 7. ВЫЯВЛЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ВИРУЛЕНТНОСТИ ПРОСТЕЙШИХ BLASTOCYSTIS spp
7.1 .Определение вирулентности бластоцист методом рестрик- 2Q | ционного анализа (РА) ДНК
7.2.Показатели частота встречаемости бластоцист с различной 2Qg
степенью вирулентности, выявленной биопробой и РА ДНК
ГЛАВА 8. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ E.FAECALIS В АССОЦИАЦИИ С BLASTOCYS- 211 TIS spp. IN VITRO
8.1.Изучение встречаемости генетических маркеров патогенно-сти микросимбионта Е. faecalis в ассоциации с бластоцистами in vitro
8.2. Идентификация нуклеотидных последовательностей генов, контролирующих синтез желатиназы (gelE)
8.3.Выявление нуклеотидных последовательностей генов, кон- 012 тролирующих синтез бактериоцитогенности (cpd)
8.4.Выявление генов gelE и cpd у Е. faecalis, изолированных из микробных консорциумов, в которых отсутствовали бластоцисты
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ПРИЛОЖЕНИЯ

ПЕРЕЧЕНЬ ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
AM - ассоциативный микросимбионт
АС - ассоциативный симбиоз
ДМ - доминантный микросимбионт
KP - колонизационная резистентность
MC - макросимбионт (хозяин)
АЛА - антилизоцимная активность
АЛфА - антилактоферриновая активность
АГА - антигистоновая активность
LD50 (lg) - 50% летальная доза (Dosis letalis)
ЕД - единица активности
КОЕ/мл количественное выражение содержание микробов (колония образующая единица)
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ЭР - эндонуклеазы рестриктирующие
ГТ.о. - пар оснований
П.н. - пар нуклеотидов
РА - рестрикционный анализ
г - коэффициент ранговой корреляции Спирмена
ПДРФ - полиморфизм длин рестрикционных фрагментов
жкт - желудочно-кишечный тракт
ЯБЖ - язвенная болезнь желудка
ЯБД - язвенная болезнь 12 перстной кишки
XX - хронический холецистит
хг - хронический гастрит
ЖБД - желчно-каменная болезнь

Boreham R.E. et al., 1993; Lanuza M.D. et al., 1999), иммунодиффузии (Müller
H.E., 1994; Lanuza M.D. et al., 1999), и иммунофлуоресцентного анализа (Ng G.C. et al, 1996, 1999; Tan S.W. et al., 2001).
M.D. Lanuza et al. (1999) отметили различия в антигенной структуре штаммов, выделенных от больных с хронической и острой формами диареи. Данная информация позволяет предположить, что различия между серологическими группами бластоцист могут быть связаны с особенностями развития и течения вызываемого ими заболевания.
Имеются данные о внутривидовом разнообразии В. hominis (Husebye E., 1994; Boreham P., 1996; Macfarlane G.T., 1997; Bengmark S., 2000). Были обнаружены варианты этих простейших, отличающихся по структуре ДНК.
Немецкий исследователь доктор K.G. Kukoschke в 2002 году был одним из первых, которому удалось выявить в фекалиях больных диареей и здоровых лиц присутствие различных типов Blastocystis spp.
В 2004 году доктор D.W. Мак Pherson в больнице Святого Иосифа в Канаде обнаружил различия в морфологических формах цист, выделенных у лиц с патологией желудочно-кишечного тракта и здоровых лиц.
Проведенное в 2007 году исследование доктором М. Lanusa и его сотрудниками в Валенсии, Испании, показали, что выделенные в сыворотке крови антитела у лиц с диарейным синдромом, инвазированных бластоцистами и здоровых лиц имели различия (Пушкарева В.И., 2006).
В 2007 году исследования, проведенные доктором Руна Stensvold в Дании, диагностировали выделения Blastocystis spp. подтипов 2, 3 и 4 в своем большинстве у пациентов при поносах.
На сегодняшний день не вызывает сомнений, что Blastocystis hominis является сборным видом и состоит из ряда так называемых субтипов (subtype), которые различаются на генетическом уровне. Молекулярно-генетические исследования показали, что Blastocystis, выделяемые от людей и животных, могут быть разделены на 10 и более субтипов, в связи с чем и были предложены изменения в номенклатуре вида, согласно которым используется название