+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Антимикробное действие и экологическая роль полифункциональных белков

  • Автор:

    Го Даньян

  • Шифр специальности:

    03.02.03

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2013

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    136 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АМБП - антимикробные белки и пептиды;
АМП - антимикробные пептиды;
Д-Л - дестабилаза-лизоцим из медицинской пиявки;
рД-Л - рекомбинантная дестабилаза-лизоцим;
рД-ЛС - прогретая рД-Л, лишённая мурамидазной активности;
КС - клеточная стенка;
ЛПС - липополисахарид ПГ - псптидогликан;
Г1ФБ - полифункциональные белки;
СЭМ - сканирующая электронная микроскопия (или сканирующий электронный микроскоп);
ТЭМ - просвечивающая (трансмиссионная) электронная микроскопия (или просвечивающий электронный микроскоп).
ЦМ - цитоплазматическая мембрана;
Оа^Ас - Ы-ацетил-О-галактозамин;
ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Введение
Многим белкам свойственна полифункциоиальность, то есть, способность проявлять не одну, а две или более разных активностей, причем, с помощью различных механизмов. Особый интерес вызывают полифункциональные белки, одна из активностей которых - антимикробная. В настоящее время проводятся многосторонние исследования антимикробного действия множества белков и пептидов. Среди полифункциональных белков, проявляющих такую активность - ферменты, токсины, белки врождённой иммунной системы. Значительный интерес исследователей вызывают две группы полифункциональных антимикробных белков.
Во-первых, это белки, образующие параспоральные включения энтомопатогенной бактерии Bacillus thuringiensis:
а) Cry-белки, молекулы которых могут по-разному проявлять свою биологическую активность в зависимости от клеток - мишеней: высокоспецифично разрушать клетки чувствительных беспозвоночных, связываясь с рецепторами на мембранах клеток их средней кишки, и с меньшей специфичностью оказывать антимикробный эффект, для чего они должны приводить к разрушению клеточных стенок микроорганизмов и проявлять мембранотропную активность, подобно многим антимикробным белкам и пептидам;
б) Cyt белки, которые также полифункциональны, так как проявляют неспецифическую инсектицидную, гемолитическую, антимикробную активности, в последнем случае они способны разрушать клетки микроорганизмов и нарушать проницаемость цитоплазматических мембран, как многие антимикробные белки и пептиды.
Актуальность изучения антимикробной активности 5-эндотоксинов В. thuringiensis намного возросла в связи с введением с/у-генов в растения для
защиты последних от вредных насекомых. При этом большое количество таких белков, синтезируемых всеми частями генетически модифицированных растений, может накапливаться как в самих растениях, так и в почвах, и влиять на биоценозы.
Во-вторых, это фермент - представитель лизоцимов беспозвоночных животных: рекомбинантная дестабилаза-лизоцим (рД-Л) из медицинской пиявки, проявляющая гликозидазную, и мурамидазную, эндо-изопептидазную активности, а также неферментативпую антимикробную активность. Проводили сравнительное изучение антимикробной активности этого белка и его модифицированной формы, лишённой мурамидазной активности в результате прогревания рД-Л (90 С, 50 мин.).
Лизоцимы - конститутивные белки врождённой иммунной системы, они участвуют в иммунном ответе животных в ответ на воздействие токсинов. Поэтому при попадании токсинов (в том числе — 5-эндотоксинов В. thuringiensis) в насекомое у последнего возникает иммунный ответ, в котором участвуют и лизоцимы, наряду со многими другими белками и пептидами. В этот период вышеуказанные токсины и лизоцимы могут взаимодействовать. Такие процессы представляют несомненный интерес для понимания экологической роли этих белков, их влияния на факторы врождённого иммунитета и на развитие инфекции. Принципиальные этапы таких процессов можно смоделировать in vitro, первым шагом при этом является изучение антимикробных эффектов Cyt, Cry белков, а также лизоцимов. Поэтому сравнительное изучение особенностей антимикробного действия полифункциональных белков из параспоральных кристаллов В. thuringiensis и рД-Л из медицинской пиявки актуально, имеет большую теоретическую и практическую значимость.

иммунитета. Перечисленные признаки дали основание рассматривать лизоцимы как АМБП (Ibrahim et al., 2001; Wiesner, Vilcinkas, 2011).
Лизоцимы - это семейство белков с мол. массой 14-18 кДа. В настоящее время лизоцимы разделяют на 6 типов в зависимости от источников выделения (при этом есть определённые различия в аминокислотных последовательностях и свойствах белков):
1) лизоцимы с-типа, включая лизоцим, выделенный из белка куриного яйца, и множество других лизоцимов позвоночных животных; 2) лизоцимы g-типа -гусиные; 3) лизоцимы растений; 4) лизоцимы бактерий; 5) фаговые лизоцимы (лизоцим фагаТД; 6) лизоцимы i-типа - синтезируемые беспозвоночными животными (Козлов и др., 2010; Papagiani, 2003; Thainmasirirak et al., 2010).
Все типы лизоцимов, кроме лизоцимов растений, имеют сходную III структуру. Среди них наиболее изучен лизоцим белка куриного яйца, имеющий молекулярную массу 14,4 kDa (129 аминокислотных остатков). Он был первым белком, у которого установили последовательность аминокислот, и первым ферментом, у которого определили с помощью рентгеноструктурного анализа трёхмерную структуру. Лизоцим состоит из двух доменов, один представляет собой петлеобразную структуру, состоящую из трех а - спиралей, а другой домен состоит из р - слоев (Dong et al., 1999). Два домена разделены глубокой впадиной, которая тянется через целую молекулу. Четыре дисульфидных мостика между остатками 64-80, 76-96, 6-127, 30-115 поперечно связывают молекулярную структуру лизоцима. Энзиматическая активность лизоцима теряется, когда более двух дисульфидных мостиков разрушено (Рис. 7).

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.104, запросов: 967