Генетические детерминанты инфекционности вируса гриппа и иммуногенности противогриппозных вакцин

• Автор: Романова, Юлия Романовна
• Шифр специальности: 03.02.02
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 167 с. : ил.

Моим родителям посвящается
ОГЛАВЛЕНИЕ
1 ВВЕДЕНИЕ
2 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
2.1 Высокопатогенный вирус гриппа птиц
2.2 Современные тенденции в разработке противогриппозных вакцин
3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1 Тканевые культуры
3.2 Вирусы
3.2.1 Эпидемические штаммы вируса гриппа
3.2.2 Конструирование вирусов методом обратной генетики
3.3 Секвенирование
3.4 Культивирование и титрование вирусов
3.5 Титрование вируса методом бляшек с/без трипсина
3.6 Получение и инфицирование макрофагов
3.7 Индукция ИФН в бронхиальных эпителиальных клетках человека
3.8 Определение сывороточных и секреторных антител
3.9 Инфекционность и патогенность вирусов для цыплят
3.10 Инфекционность и иммуногенность вирусов для мышей
3.11 Патогенность, иммуногенность и протективная эффективность вирусов для хорьков
3.12 Патогенность и иммуногенность вирусов для макак
3.13 Определение цитокинов в носовых смывах макак
3.14 Гемолиз тест
3.15 Анализ стабильности вирусов методом атомно- силовой микроскопии
3.16 Инфекционность вирусов in vitro при различном pH среды или в присутствии лизосомотропных агентов
3.17 Проточная цитометрия
3.18 Кинетика вирусного роста
4 РЕЗУЛЬТАТЫ
4.1 Получение H5N1 вакцинного кандидата с модифицированным NS геном и изучение его свойств
4.1.1 Конструирование вакцинного кандидата
4.1.2 Рост вакцинного кандидата VN1203ANS1 в клетках Vero
4.1.3 Стимуляция ИФН в бронхиальных эпителиальных клетках человека (ИВЕ) и макрофагах вакцинным штаммом VN1203ANS
4.1.4 Патогенность вакцинного кандидата VN1203ANS1 для цыплят
4.1.5 Иммуногенные и протективные свойства вакцинного кандидата VN1203ANS
для мышей

/М203-М. Аналогично были получены плазмиды, содержащие гены, кодирующие белки НА и ЫА вирусов А/1пбопез1а/05/05 (номера сиквенсов в банке данных соответственно ЕР541394 и ЕР541395) и АУНопд Копд/213/03 (номера сиквенсов соответственно АВ212054 и АВ212056).
Рис. 1 Карта плазмид рНУУ2006, содержащих гены вируса гриппа