Эколого-биологические особенности сибирских штаммов грибов рода Fusarium, распространенных на зерне пшеницы

• Автор: Савицкая, Анна Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.02.08
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Красноярск
• Количество страниц: 237 с. : ил.

1 Обзор литературы
1.1 Систематическое положение грибов рода Fusarium
1.1.1 Краткий обзор таксономических систем рода
Fusarium
1.1.2 Молекулярная диагностика грибов рода Fusarium
1.1.3 Использование аптамеров в качестве высокоспецифичных детекторов для определения представителей рода
Fusarium
1.2 Биология грибов рода Fusarium
1.2.1 Морфологические особенности грибов рода Fusarium
1.2.2 Вегетативная совместимость и несовместимость грибов рода Fusarium
1.2.3 Факторы патогенности грибов рода Fusarium
1.3 Видовой состав и ареал возбудителей фузариоза злаковых культур
1.3.1 Заболевания злаковых растений, вызываемые фитопатогенными грибами рода Fusarium
1.3.2 Заболевания людей, вызываемые фитопатогенными
грибами рода Fusarium
1.3.3 Географическое распространение и вредоносность возбудителей фузариоза злаковых культур
2 Объекты и методы исследования
2.1 Характеристика объектов исследования
2.2 Состав и подготовка питательных сред
2.3 Методы исследования
2.3.1 Выделение и идентификация микромицетов рода
Fusarium
2.3.2. Проведение генотипирования штаммов Fusarium с применением видоспецифичных праймеров
2.3.3 Оценка фитопатогенных свойств грибов рода Fusarium на семенах, проростках и вегетирующих растениях
2.3.4 Изучение реакций вегетативной совместимости (несовместимости)
2.3.5 Оценка чувствительности грибов рода Fusarium к биологическим фунгицидам в лабораторных и полевых условиях
2.3.6 Клеточная селекция зерновых растений на устойчивость к микоторсинам грибов рода Fusarium
2.3.7 Селекция специфичных аптамеров к штамму БЗ смл Fusarium oxysporum, бактериям Salmonella Enteritidis и Salmonella Typhimurium
Глава 3 Оценка фитосанитарного состояния зерна сортов пшеницы, рекомендованных для возделывания в условиях Сибири
3.1 Частота встречаемости грибов рода Fusarium в семенном материале
3.2 Видовой состав грибов рода Fusarium, распространенных на семенах пшеницы
Глава 4 Фитопатогенные свойства сибирских штаммов Fusarium sporotrichioides и Fusarium oxysporum, выделенных из зерна пшеницы
4.1 Фитопатогенные свойства сибирских штаммов
Fusarium sporotrichioides
4.1.1 Фитоксические свойста биологически активных веществ Fusarium sporotrichioides
4.1.2 Фитопатогенные свойства штаммов Fusarium sporotrichioides
4.1.3 Влияние метаболитов штамма Z 3-06 Fusarium sporotrichioides на вегетирующие растения пшеницы и формирование микробоценоза ризосферы
4.1.4 Фитопатогенные свойства моноспоровых культур штамма Z 3-06 Fusarium sporotrichioides
4.2 Фитопатогенные свойства сибирских штаммов Fusarium oxysporum
4.2.1 Фитоксические свойста биологически активных веществ Fusarium oxysporum
4.2.2 Фитопатогенные свойства штаммов Fusarium oxysporum
4.2.3 Фитопатогенные свойства моноспоровых культур штамма S 1.1 Fusarium oxysporum
Глава 5 Вегетативные реакции сибирских штаммов Fusarium sporotrichioides и Fusarium oxysporum
5.1 Характеристика культурально-морфологических свойств моноспоровых культур Fusarium sporotrichioides и Fusarium oxysporum
5.2 Характеристика реакций вегетативной совместимости Fusarium sporotrichioides и Fusarium oxysporum
Глава 6 Чувствительность сибирских штаммов Fusarium sporotrichioides и Fusarium oxysporum к микроорганизмам -антагонистам
6.1 Оценка чувствительности штаммов и моноспоровых культур Fusarium sporotrichioides к биоконтрольным микроорганизмам
6.20ценка чувствительности штаммов и моноспоровых

97 103 108 108 113 115 '

2.3 Методы исследования
2.3.1 Выделение и идентификация микромицетов рода Fusarium
Выделение грибов из ризосферы осуществляли методом водных смывов; выделение из почвы - методом многократных разведений; выделение из семян - методом накопления во влажных камерах [16, 18]. При выделении грибов с поверхности семян пшеницы и гороха для каждого сорта брали не менее 100 шт., лабораторную всхожесть семян определяли на седьмые сутки, инфицируемость проростков - на 10 сутки во влажных камерах. Изолированные колонии и мицелий с семян отсевали на твердые питательные среды КДА и СА.
Получение моноконидиальных культур осуществляли двумя методами:
1. Для получения моноконидиальных культур использовали минеральный состав среды Чапека с добавлением глицерина (г/л: глицерин — 2,0; NaN03 - 2,0; КН2Р04 - 0,5; MgS04-7H20 - 0,5; FeS04 - 0,01; вода - 1000 мл) [40]. Готовую среду в объеме 20 мл развивали в конические колбы и стерилизовали при давлении 0,5 атм. В остывшую среду вносили посевной материал из расчета 10 КОЕ/мл и культивировали на роторной качалке (250 об/мин) в течение трех суток. Затем стерильной пипеткой отбирали 0,02 мл суспензии культуры и делали высев в чашки Петри на среду Чапека. Чашки помещали в термостат при температуре 25±1 °С и культивировали до начала прорастания колониеобразующих единиц. Затем, изолированные колонии, отсевали в чашки Петри и после визуального и микроскопического контроля делали пересев на скошенный агар, для дальнейшей работы.
2. Для получения моноспоровой культуры 3 мл водного агара (2%) разливали в чашки Петри и оставляли при комнатной температуре до застывания. В 10 мл раствора стерильной соды (Ъ1а2СОз) готовили суспензию конидий таким образом, чтобы содержание конидий в поле зрения микроскопа при малом увеличении (10 X) составляло 1-10 конидий в капле. Полученную суспензию высевали на тонкий слой водного агара, для чего стерильной пи-