Характеристика хромосомных нарушений в эпителиальных клетках при хроническом гастрите и раке желудка

• Автор: Матвеенко, Ольга Альбертовна
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 132 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Механизм инициации воспалительной реакции организма
1.1.2. Индукция хронического воспаления в эпителиальной ткани
1.2. Экзогенные агенты, потенцирующие хроническое воспаление эпителия желудка
1.3. Последствия хронизации процесса воспаления на тканевом уровне
1.3.1. Метапластические изменения эпителиальной ткани желудка
1.3.2. Дисплазия как предопухолевое изменение слизистой оболочки желудка
1.4. Роль хромосомных нарушений в развитии рака желудка
1.4.1. Цитогенетические нарушения в клетках слизистой оболочки
при предопухолевых заболеваниях желудка
1.4.2. Хромосомные нарушения и их корреляция с некоторыми клинико-морфологическими параметрами при раке желудка
1.4.2.1. Хромосомные аномалии и гистологический тип опухоли
1.4.2.2. Хромосомные нарушения и метастазирование опухоли
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1 Материал исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Приготовление препаратов метафазных хромосомных здорового индивида
2.2.2. Выделение ДНК из анализируемой ткани
2.2.3. Получение контрольной ДНК
2.2.4. Приготовление зондов, путем введения метки в тестируемую
и контрольную ДНК
2.2.5. Проведение реакции сравнительной геномной гибридизации зондов на хромосомном препарате
2.2.6. Детекция гибридизационных сигналов
2.2.7. Хромогенная in situ гибридизация малых ядерных РНК (EBERs)
и латентного мембранного протеина (LMP2A) вируса Эпштейна-Барр
2.2.8. Методы статистического анализа

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Хромосомные нарушения в морфологически нормальном эпителии пациентов на фоне слабого хронического воспаления
3.2. Анализ уровня и спектра хромосомных аберраций в клетках эпителиальной ткани на фоне хронического гастрита
3.2.1. Хромосомные нарушения в клетках эпителиальных тканей
без дисплазии
3.2.2. Структура хромосомных нарушений в группе больных хроническим гастритом с диспластическими изменениями эпителия
3.3. Анализ уровня и спектра хромосомных аберраций в опухолевой
и прилежащей эпителиальной ткани на фоне хронического воспаления
3.4. Сравнительный анализ уровня и спектра хромосомных аберраций
по ходу развития патологического процесса в слизистой оболочке желудка.
3.5. Выявление ранних РНК (ЕВЕКя) и белка латентной инфекции 2А (ЬМР2А) вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) в эпителиальных клетках на фоне хронического гастрита
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Приложение 1. Клинико-морфологическая характеристика группы
пациентов с клиническим диагнозом хронический гастрит
Приложение 2. Характеристика группы пациентов с интестинальным
типом рака желудка
Приложение 3. Хромосомные нарушения в клетках эпителиальной ткани
желудка без морфологических изменений при хроническом гастрите
Приложение 4. Хромосомные нарушения в клетках эпителиальной ткани
желудка с диспластическими изменениями при хроническом гастрите
Приложение 5. Хромосомные аберрации в клетках эпителиальной ткани
у больных интестинальным типом РЖ на фоне хронического гастрита

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВЭБ - вирус Эпштейна-Барр
ГС - гибридизационная смесь
ДАБ - диаминобензидин
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИЛ - интерлейкин
КМ - кишечная метаплазия
НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат
ПГЕ - простогландин Е
СОЖ - слизистая оболочка желудка
ФГА - фитогемаагглютинин
ФИО - фактор некроза опухоли
ЦОГ - циклооксигеназа
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
АФК - активные формы кислорода
ВАС - (bacterial artificial chromosome) -искусственные хромосомы бактерий BSA - (bovine serum albumin) - бычий сывороточный альбумин CGH - (comparative genomic hybridization) - сравнительная геномная гибридизация
СОХ -1,2- (cyclooxygenase -1,2)- циклооксигеназа - 1,
EBERs - (virus-encoded small RNAs) - малые кодирующие вирусные РНК
EBNA1 - (Epstein-Barr virus nuclear antigen 1) - ядерный антиген 1 вируса
Эпштейна-Барр
FISH - (fluorescence in situ hybridization) - флуоресцентная in situ гибридизация HIF - (hypoxia-inducible factor) - фактор, индуцируемый гипоксией HR-CGH - (high resolution comparative genomic hybridization) - сравнительная геномная гибридизация высокого разрешения
IGF-1 - (insulin-like growth factors) - инсулинозависимый фактор роста IL - (interleukin) - интерлейкин
LMP2A - (latent membrane protein 2A) - латентный мембранный протеин 2А

обнаружено. Эта задача может быть решена с помощью метода CGH, который успешно применяется во многих лабораториях мира для молекулярно-цитогенетического исследования хромосомных нарушений в клетках различных органов и тканей.
Если принять во внимание тот факт, что нарушения генома являются одним из ранних событий при развертывании программы малигнизации, то исследования начальных стадий патологического процесса в эпителиальной ткани желудка представляются актуальными с точки зрения поиска маркеров опухолевой трансформации и более детального понимания процессов приводящих к развитию рака желудка.
1.4.2. Хромосомные нарушения и их корреляция с некоторыми клинико-морфологическими параметрами при раке желудка
Числовые и структурные нарушения хромосом являются обычным явлением, наблюдаемым при различных видах злокачественных новообразований у человека. Опухолевые клетки накапливают большое количество мутаций, затрагивающих такие фундаментальные клеточные процессы как дифференциация, пролиферация и апоптоз. Открытие изменений во многих генетических локусах, регулирующих рост, старение, идентифицированных в малигнизированных клетках, привели к пониманию рака как болезни генома. Генетические нарушения, обнаруженные в опухолях, включают точковые мутации, хромосомные транслокации, которые могут приводить к структурным перестройкам в генах, и числовые изменения по целым хромосомам. Как сегментные аномалии, так и дисбаланс по числу копий целых хромосом, приводящие к изменению дозы генов в опухолевых клетках, можно рассматривать как примеры анеуплоидии (Sen et al., 2000).
В отличие от предраковых заболеваний, в области цитогенетики уже манифестированного рака желудка существует большое количество работ.